| 第一章 对虾白斑综合症病毒研究进展 | 第1-41页 |
| ·前言 | 第16-17页 |
| ·对虾白斑综合症的症状及病理变化 | 第17-18页 |
| ·对虾白斑综合症的症状 | 第17页 |
| ·对虾白斑综合症的病理变化 | 第17-18页 |
| ·对虾白斑综合症的病原体 | 第18-21页 |
| ·对虾白斑病概况 | 第18页 |
| ·白斑病毒粒子的形态学 | 第18-19页 |
| ·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的命名 | 第19-20页 |
| ·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的分类地位 | 第20-21页 |
| ·WSSV在对虾体内的感染增殖及分布 | 第21-22页 |
| ·WSSV在对虾体内的感染增殖 | 第21页 |
| ·WSSV在对虾体内的分布 | 第21-22页 |
| ·WSSV的传播及流行 | 第22-24页 |
| ·WSSV的宿主范围 | 第22-23页 |
| ·WSSV的传播途径 | 第23页 |
| ·WSSV的爆发及流行 | 第23-24页 |
| ·对虾组织培养及WSSV感染的动物模型 | 第24-25页 |
| ·对虾组织培养 | 第24页 |
| ·WSSV感染的动物模型 | 第24-25页 |
| ·对虾白斑病毒功能基因组的研究。 | 第25-27页 |
| ·3WSSV基因组编码的多肽。 | 第27-35页 |
| ·白斑病毒的结构蛋白及其功能 | 第27-32页 |
| ·WSSV结构蛋白的糖基化修饰 | 第32-33页 |
| ·WSSV转录和复制相关的蛋白 | 第33-34页 |
| ·WSSV启动子序列特征 | 第34-35页 |
| ·对虾白斑病毒的进化分析 | 第35页 |
| ·WSSV的检测 | 第35-40页 |
| ·PCR检测 | 第36页 |
| ·核酸杂交检测 | 第36-39页 |
| ·用特异性抗体检测WSSV | 第39-40页 |
| ·其他检测技术 | 第40页 |
| ·对虾白斑综合症病毒的防治 | 第40-41页 |
| 第二章 细胞凋亡及凋亡抑制 | 第41-77页 |
| ·前言 | 第41页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第41-48页 |
| ·细胞凋亡的概念 | 第41-43页 |
| ·细胞凋亡的生理学意义 | 第43-44页 |
| ·细胞凋亡的病理学意义： | 第44-46页 |
| ·细胞凋亡的形态学变化 | 第46-47页 |
| ·细胞凋亡的生化改变 | 第47-48页 |
| ·细胞凋亡的信号途径 | 第48-55页 |
| ·死亡受体途径(Deathreceptorpathway) | 第48-53页 |
| ·死亡因子(Deathfactor) | 第49-50页 |
| ·死亡受体(Deathreceptor) | 第50-52页 |
| ·接头分子(Adaptor) | 第52-53页 |
| ·线粒体途径(Mitochondrialpathway) | 第53-55页 |
| ·Caspases——细胞凋亡的“刽子手” | 第55-64页 |
| ·Caspases研究的意义 | 第56-57页 |
| ·Caspases的一般生物学特性 | 第57-58页 |
| ·Caspases家族蛋白的结构 | 第58-59页 |
| ·Caspases的级联激活反应 | 第59-62页 |
| ·Caspases与细胞凋亡的执行 | 第62-63页 |
| ·裂解细胞凋亡抑制蛋白 | 第62-63页 |
| ·裂解细胞外基质蛋白及骨架蛋白 | 第63页 |
| ·裂解DNA修复相关分子 | 第63页 |
| ·裂解其它的相关分子 | 第63页 |
| ·Caspases的抑制物 | 第63-64页 |
| ·病毒编码的凋亡抑制蛋白 | 第64页 |
| ·哺乳动物凋亡蛋白抑制物家族 | 第64页 |
| ·BCL-2蛋白家族中的凋亡抑制亚家族成员 | 第64页 |
| ·人工合成的肽类抑制剂 | 第64页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第64-69页 |
| ·DNA降解分析 | 第65-66页 |
| ·基于凋亡细胞膜通透性的染色方法 | 第66-67页 |
| ·细胞凋亡的相关蛋白分析 | 第67页 |
| ·细胞凋亡的酶学分析 | 第67-68页 |
| ·其他细胞凋亡的检测方法 | 第68-69页 |
| ·病毒对细胞凋亡的抑制机制 | 第69-75页 |
| ·干扰死亡受体的信号传导 | 第69-70页 |
| ·抑制死亡受体与死亡配体的结合 | 第70页 |
| ·抑制BCL-2家族中促凋亡成员的功能 | 第70-71页 |
| ·抑制Caspase的活性 | 第71-74页 |
| ·病毒抑制细胞凋亡的生物学意义 | 第74-75页 |
| ·本研究的背景、目的和意义 | 第75-77页 |
| 第三章 研究方法 | 第77-92页 |
| ·质粒DNA的制备和纯化 | 第77-79页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第77页 |
| ·质粒DNA的大量制备 | 第77-78页 |
| ·DNA的溴化乙锭—氯化铯浮力密度梯度离心纯化 | 第78-79页 |
| ·限制性酶消化反应 | 第79页 |
| ·载体去磷酸化 | 第79页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第79-80页 |
| ·玻璃奶法 | 第79页 |
| ·低熔点琼脂糖法 | 第79-80页 |
| ·DNA连接反应 | 第80页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第80-82页 |
| ·氯化钙法 | 第80-81页 |
| ·电转化法 | 第81-82页 |
| ·菌落PCR初步鉴定阳性重组质粒 | 第82页 |
| ·DNA测序 | 第82页 |
| ·病毒的增殖、分离和提纯 | 第82-84页 |
| ·毒源制备及病毒在螯虾中增殖 | 第82页 |
| ·病毒的提取与纯化 | 第82-83页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第83-84页 |
| ·原代虾细胞培养 | 第84-85页 |
| ·细胞培养、冻存和复苏 | 第85-86页 |
| ·细胞培养 | 第85-86页 |
| ·细胞冻存 | 第86页 |
| ·细胞复苏 | 第86页 |
| ·WSSV病毒基因组Cosmid文库的构建 | 第86-92页 |
| ·质粒DNA的准备 | 第86-87页 |
| ·基因组DNA的处理 | 第87-88页 |
| ·基因组DNA片段碱性去磷酸化 | 第88页 |
| ·连接与包装 | 第88-89页 |
| ·Cosmid单克隆DNA的小量提取 | 第89-92页 |
| 第四章 对虾白斑病毒感染螯虾的最适条件研究 | 第92-101页 |
| ·引吾 | 第92-93页 |
| ·实验材料 | 第93页 |
| ·试剂、实验动物 | 第93页 |
| ·引物 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-96页 |
| ·病毒的生产和纯化 | 第93-94页 |
| ·螯虾的饲养与病毒的感染 | 第94页 |
| ·血细胞记数 | 第94页 |
| ·酚氧化酶活力的测定 | 第94页 |
| ·WSSV感染死虾的PCR检测 | 第94-95页 |
| ·总RNA的提取以及RT-PCR | 第95-96页 |
| ·研究结果 | 第96-100页 |
| ·WSSV在不同的温度下对螯虾有不同的感染效率 | 第96-98页 |
| ·血细胞记数与酚氧化酶的测定 | 第98页 |
| ·RT-PCR | 第98-99页 |
| ·组织切片 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-101页 |
| 第五章 WSSV囊膜蛋白蛋黄抗体对病毒感染螯虾的抑制研究 | 第101-121页 |
| ·前言 | 第101-103页 |
| ·材料 | 第103-105页 |
| ·试剂 | 第103-104页 |
| ·载体 | 第104页 |
| ·引物 | 第104-105页 |
| ·菌株和实验动物 | 第105页 |
| ·实验方法 | 第105-111页 |
| ·病毒的生产和纯化 | 第105页 |
| ·重组质粒的构建 | 第105-106页 |
| ·重组质粒的转化 | 第106页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第106-108页 |
| ·SDS-PAGE： | 第108页 |
| ·Westernblot | 第108-109页 |
| ·囊膜蛋白的多克隆鸡抗的制备 | 第109页 |
| ·多价高免卵黄抗体的制备 | 第109页 |
| ·病毒的滴度测定 | 第109页 |
| ·抗体中和实验 | 第109-110页 |
| ·口服被动免疫 | 第110页 |
| ·囊膜蛋白的注射免疫 | 第110-111页 |
| ·结果与分析 | 第111-117页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第111-112页 |
| ·重组蛋白的表达和纯化 | 第112-113页 |
| ·病毒滴度 | 第113-114页 |
| ·抗体中和实验 | 第114-115页 |
| ·口服被动免疫 | 第115-116页 |
| ·囊膜蛋白的口服免疫 | 第116-117页 |
| ·讨论 | 第117-121页 |
| 第六章 对虾白斑综合症病毒凋亡抑制基因的鉴定与功能研究 | 第121-142页 |
| ·引吾 | 第121-123页 |
| ·材料 | 第123-125页 |
| ·试剂 | 第123-124页 |
| ·载体 | 第124页 |
| ·菌株和细胞 | 第124页 |
| ·病毒和实验动物 | 第124页 |
| ·引物 | 第124-125页 |
| ·实验方法 | 第125-128页 |
| ·病毒的提取与纯化 | 第125页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第125页 |
| ·对虾原代细胞的培养 | 第125页 |
| ·Cosmid文库的构建 | 第125页 |
| ·重组质粒的构建 | 第125-126页 |
| ·质粒DNA对细胞的转染 | 第126页 |
| ·细胞形态学观察 | 第126页 |
| ·Hoechst33258染色： | 第126-127页 |
| ·细胞DNA的提取 | 第127页 |
| ·PI染色及流式细胞仪分析 | 第127-128页 |
| ·标记拯救 | 第128页 |
| ·研究结果 | 第128-139页 |
| ·放线菌素D可以诱发对虾原代细胞凋亡 | 第128-129页 |
| ·WSSV感染抑制了放线菌素D诱发的对虾原代细胞凋亡 | 第129-133页 |
| ·Cosmid文库的构建以及标记拯救 | 第133-135页 |
| ·重组表达质粒pIEl-390和pIEl-397的构建和鉴定 | 第135-136页 |
| ·pIEl-390可以支持AcMNPV△p35／pol+在Sf9细胞中的复制 | 第136-138页 |
| ·ORF390的瞬时表达可以抑制AcMNPV△p35／pol+感染Sf9诱发的细胞凋亡。 | 第138-139页 |
| ·讨论 | 第139-142页 |
| 第七章 WSSV凋亡抑制基因oRF390的原核与真核表达 | 第142-160页 |
| ·引言 | 第142-143页 |
| ·材料 | 第143-145页 |
| ·试剂 | 第143页 |
| ·菌株与质粒 | 第143-145页 |
| ·引物 | 第145页 |
| ·实验方法 | 第145-153页 |
| ·重组质粒的构建 | 第145-146页 |
| ·重组质粒DNA的转座 | 第146页 |
| ·重组BacmidDNA(＞100kb)的提取与制备 | 第146-148页 |
| ·ORF390的原核表达及纯化 | 第148-149页 |
| ·ORF390的真核表达及纯化 | 第149-151页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第151-152页 |
| ·Westernblot | 第152页 |
| ·Bradford法测定蛋白质浓度 | 第152-153页 |
| ·ORF390的结构分析 | 第153页 |
| ·研究结果 | 第153-158页 |
| ·重组质粒pPrO-390、pFast—390的鉴定 | 第153-154页 |
| ·重组病毒vAc—390的筛选及PCR鉴定 | 第154-155页 |
| ·ORF390的原核表达与纯化 | 第155-156页 |
| ·ORF390的真核表达与纯化 | 第156-157页 |
| ·ORF390的结构分析 | 第157-158页 |
| ·讨论 | 第158-160页 |
| 研究总结与创新 | 第160-162页 |
| 参考文献 | 第162-190页 |
| 博士研究生期间已发表和待发表的论文 | 第190-191页 |
| 致谢 | 第191-192页 |
