| 第一部分 干扰素的研究进展 | 第1-17页 |
| 1 干扰素的基本特性 | 第11-17页 |
| ·干扰素的本质及理化特性 | 第11页 |
| ·干扰素产生的机理 | 第11-12页 |
| ·干扰素的生物学特性 | 第12-13页 |
| ·高度的生物活性 | 第12页 |
| ·相对的种属特异性 | 第12-13页 |
| ·微弱的抗原性 | 第13页 |
| ·干扰素的功能及其作用机制 | 第13-14页 |
| ·抗病毒作用 | 第13页 |
| ·免疫调节作用 | 第13页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第13-14页 |
| ·鸡干扰素分子生物学研究进展 | 第14-17页 |
| ·Ⅰ型鸡干扰素 | 第14页 |
| ·Ⅱ型鸡干扰素 | 第14-15页 |
| ·干扰素用于治疗与预防疾病的潜力 | 第15-17页 |
| 第二部分 鸡传染性支气管炎及鸡传染性支气管炎病毒 | 第17-29页 |
| 1 鸡传染性支气管炎 | 第17-21页 |
| ·概述 | 第17-18页 |
| ·IB的流行病学，临床症状和病理学研究 | 第18-19页 |
| ·流行病学 | 第18页 |
| ·临床症状 | 第18页 |
| ·病理变化 | 第18-19页 |
| ·IB的诊断 | 第19-21页 |
| ·病毒分离 | 第19页 |
| ·血清学诊断 | 第19-20页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第20-21页 |
| ·防制研究 | 第21页 |
| 2 鸡传染性支气管炎病毒 | 第21-29页 |
| ·IBV的分类地位 | 第21-22页 |
| ·形态结构 | 第22页 |
| ·IBV的血凝性 | 第22页 |
| ·IBV的基因组结构 | 第22-23页 |
| ·IBV主要的结构蛋白质及功能 | 第23-25页 |
| ·纤突蛋白(S) | 第23-24页 |
| ·膜蛋白(M) | 第24页 |
| ·核衣壳蛋白(N) | 第24-25页 |
| ·IBV分子变异机制 | 第25-26页 |
| ·IBV疫苗的研究进展 | 第26-29页 |
| 第三部分 鸡Ⅱ型干扰素基因在重组禽痘病毒中的表达 | 第29-38页 |
| 1 材料和方法 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·载体构建 | 第30-31页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·S-FPV-017疫苗种毒的制备 | 第32页 |
| ·转染和病毒筛选 | 第32-33页 |
| ·转染质粒的纯化 | 第32-33页 |
| ·转染 | 第33页 |
| ·重组病毒蚀斑筛选 | 第33页 |
| ·重组病毒(RFPV-IFN-Ⅱ)的PCR检测 | 第33页 |
| ·重组禽痘病毒的DNA制备 | 第33页 |
| ·IFN-Ⅱ基因的PCR鉴定 | 第33页 |
| ·IFN-Ⅱ蛋白的间接免疫荧光检测 | 第33-34页 |
| ·RFPV-IFN-Ⅱ表达IFN-Ⅱ的抗病毒效价的测定 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-36页 |
| ·表达鸡IFN-Ⅱ基因的禽痘病毒转移载体的构建 | 第34页 |
| ·鸡IFN-Ⅱ重组鸡痘病毒的筛选与纯化 | 第34-35页 |
| ·重组禽痘病毒的PCR鉴定 | 第35页 |
| ·表达鸡IFN-Ⅱ蛋白的间接免疫荧光检测 | 第35-36页 |
| ·RFPV-IFN-Ⅱ表达鸡IFN-Ⅱ抗病毒效价的测定 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四部分 IBV S1基因和鸡IFN-Ⅱ基因在鸡痘病毒载体中的表达 | 第38-47页 |
| 1 材料 | 第39页 |
| ·种毒和载体 | 第39页 |
| ·工具酶和其它材料 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-42页 |
| ·含IBV S1基因和鸡Ⅱ干扰素基因的禽痘病毒转移载体的构建 | 第39-40页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第40页 |
| ·S-FPV-017疫苗种毒的制备 | 第40-41页 |
| ·重组禽痘病毒的构建和筛选 | 第41页 |
| ·转染 | 第41页 |
| ·重组病毒的筛选及纯化 | 第41页 |
| ·重组禽痘病毒的PCR鉴定 | 第41页 |
| ·引物和反应条件 | 第41页 |
| ·禽痘病毒的DNA制备 | 第41页 |
| ·PSY-IFN-Ⅱ-S1表达IFN-Ⅱ蛋白的检测 | 第41页 |
| ·IFN-Ⅱ蛋白的间接免疫荧光检测 | 第41页 |
| ·IFN-Ⅱ蛋白的抗病毒效价的测定 | 第41页 |
| ·PSY-IFN-Ⅱ-S1表达IBVS1蛋白的检测 | 第41-42页 |
| ·IBV S1蛋白的间接免疫荧光检测 | 第41-42页 |
| ·IBV S1的Western blot检测 | 第42页 |
| 3 结果 | 第42-45页 |
| ·含鸡IFN-Ⅱ基因和IBV S1基因的禽痘病毒转移质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·重组禽痘病毒的筛选及纯化 | 第43页 |
| ·重组禽痘病毒的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·RFPV-IFN-Ⅱ-S1表达IFN-Ⅱ蛋白和S1蛋白的间接免疫荧光检测 | 第44页 |
| ·RFPV-IFN-Ⅱ-S1表达鸡Ⅱ型干扰素抗病毒效价的测定 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第五部分 共表达鸡IFN-Ⅱ和IBV S1基因重组鸡痘病毒的免疫效力的研究 | 第47-66页 |
| 1 材料 | 第48页 |
| ·病毒 | 第48页 |
| ·重组禽痘病毒 | 第48页 |
| ·动物试验用SPF鸡及SPF鸡胚 | 第48页 |
| 2 方法 | 第48-52页 |
| ·重组禽痘病毒和禽痘病毒弱毒疫苗(S-FPV-017)的制备及滴定 | 第48-49页 |
| ·重组禽痘病毒和禽痘病毒弱毒制备 | 第48页 |
| ·重组禽痘病毒和禽痘病毒弱毒疫苗(S-FPV-017)滴定 | 第48-49页 |
| ·免疫试验的设计 | 第49页 |
| ·攻毒试验 | 第49页 |
| ·传染性支气管炎病毒的分离和PCR鉴定 | 第49-50页 |
| ·IBV的分离 | 第49页 |
| ·IBV RNA的提取与反转录 | 第49-50页 |
| ·病理观察 | 第50页 |
| ·肾脏组织冰冻切片的间接免疫荧光检测 | 第50-51页 |
| ·肾脏组织冰冻切片的制作 | 第50页 |
| ·IBV的间接免疫荧光检测 | 第50-51页 |
| ·抗体检测 | 第51页 |
| ·抗原的制备 | 第51页 |
| ·IBV抗体检测 | 第51页 |
| ·FPV抗体检测 | 第51页 |
| ·体重检测 | 第51-52页 |
| ·外周血CD4~+、CD8~+和ΓΔTCR~+T淋巴细胞百分比含量的检测 | 第52页 |
| ·淋巴细胞样品的制备 | 第52页 |
| ·CD4~+、CD8~+和γδTCR~+三种T淋巴细胞亚类的测定 | 第52页 |
| ·实验数据的处理与统计 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-63页 |
| ·重组禽痘病毒和禽痘病毒弱毒疫苗(S-FPV-017)的效价 | 第52页 |
| ·重组禽痘病毒免疫后各组抗体的变化 | 第52-54页 |
| ·抗FPV抗体变化 | 第53页 |
| ·抗IBV抗体的变化 | 第53-54页 |
| ·重组禽痘病毒对IBV强毒攻击的免疫保护性 | 第54-56页 |
| ·不同免疫组攻毒后鸡的死亡和发病情况 | 第54-55页 |
| ·不同疫苗免疫组IBV强毒攻击后病毒分离和PCR检测 | 第55-56页 |
| ·病理观察结果 | 第56-59页 |
| ·肾脏冰冻切片的间接免疫荧光检测 | 第59页 |
| ·不同疫苗免疫组实验鸡体重增长监测 | 第59-60页 |
| ·细胞受体的检测 | 第60-63页 |
| ·外周血液中γδTCR~+T淋巴细胞变化 | 第60-61页 |
| ·外周血液中CD4~+T淋巴细胞变化 | 第61-62页 |
| ·外周血液中CD8~+T淋巴细胞变化 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| ·表达鸡IFN-Ⅱ和IBV S1基因重组鸡痘病毒的免疫效果 | 第63-64页 |
| ·表达鸡IFN-Ⅱ和IBV S1基因重组鸡痘病毒免疫后T细胞亚类的变化 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
