| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-14页 |
| 2 文献综述 | 第14-29页 |
| ·基因组学 | 第15-18页 |
| ·功能基因组学 | 第18-29页 |
| ·同源比较法 | 第18页 |
| ·表达序列标签 | 第18-20页 |
| ·基因表达系列分析 | 第20页 |
| ·微阵列分析 | 第20-21页 |
| ·反求遗传学方法 | 第21-29页 |
| ·限制性酶介导整合技术在真菌功能基因组研究上的应用 | 第22-23页 |
| ·转座子标签技术在真菌功能基因组研究上的应用 | 第23-25页 |
| ·T-DNA插入在真菌功能基因组研究上的应用 | 第25-29页 |
| 3 材料与方法 | 第29-38页 |
| ·供试菌株 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·抗生素 | 第30页 |
| ·转化与筛选 | 第30-31页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第31页 |
| ·T-DNA插入的分子检测 | 第31-34页 |
| ·普通PCR检测方法 | 第31-32页 |
| ·热不对称嵌套PCR检测方法 | 第32-33页 |
| ·DNA的酶切和Southern杂交 | 第33-34页 |
| ·DNA片段的回收、克隆和测序 | 第34-35页 |
| ·DNA片段的回收 | 第34页 |
| ·DNA片段与载体pGEM-T Easy的连接 | 第34-35页 |
| ·生长发育变异观察 | 第35-36页 |
| ·致病性测定 | 第36页 |
| ·混合接种 | 第36页 |
| ·单个突变体致病性变异的鉴定 | 第36页 |
| ·测序与序列分析 | 第36-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-61页 |
| ·大规模T-DNA插入条件的优化 | 第38-41页 |
| ·培养基的优化 | 第38页 |
| ·潮霉素B的合适用量 | 第38-40页 |
| ·头孢噻肟钠和羧卞青霉素的合适用量 | 第40-41页 |
| ·T-DNA插入的分子验证及其稳定性 | 第41-43页 |
| ·T-DNA插入的PCR验证 | 第41-42页 |
| ·T-DNA插入的Southern分析 | 第42-43页 |
| ·转化子T-DNA插入的稳定性 | 第43页 |
| ·T-DNA插入突变体生长发育变异观察 | 第43-50页 |
| ·T-DNA插入突变体致病性分析 | 第50页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的扩增和分析 | 第50-61页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的扩增 | 第50-52页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的克隆 | 第52页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的结构及其功能推导 | 第52-61页 |
| 5 问题与讨论 | 第61-65页 |
| ·关于转化效率 | 第61页 |
| ·关于T-DNA转化整合的机制 | 第61页 |
| ·关于T-DNA插入的拷贝数 | 第61-62页 |
| ·TAIL-PCR | 第62-63页 |
| ·T-DNA载体的改进问题 | 第63页 |
| ·关于快速获得所需稻瘟病菌基因的突变体的途径 | 第63页 |
| ·关于T-DNA饱和突变体库的容量 | 第63-65页 |
| 6 结论与展望 | 第65-67页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·有待进一步研究的问题 | 第65-66页 |
| ·展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录1 其它方法获得稻瘟菌突变体的分析 | 第74-90页 |
| 附录1.1 稻瘟病菌紫外诱变突变体分析 | 第74-79页 |
| 附录1.2 稻瘟病菌微波诱发突变体的分析 | 第79-86页 |
| 附录1.3 稻瘟菌REMI诱变突变体分析 | 第86-90页 |
| 附录参考文献 | 第90-91页 |
| 附录2 博士研究生期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |