利用同源序列法克隆柑橘抗病基因类似物及其初步分析
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| ·课题的提出 | 第8页 |
| ·国内外研究进展 | 第8-15页 |
| ·植物抗病与感病的机理 | 第8-9页 |
| ·抗病基因的克隆 | 第9页 |
| ·植物抗病基因克隆的技术 | 第9-10页 |
| ·转座子标签技术 | 第10页 |
| ·定位克隆技术 | 第10页 |
| ·已克隆到的植物抗病基因 | 第10-12页 |
| ·已克隆到的植物抗病基因产物的结构特征及其功能 | 第12-13页 |
| ·核苷酸结合位点(NBS) | 第12页 |
| ·亮氨酸富集区(LRR) | 第12-13页 |
| ·亮氨酸拉链(LZ)和TIR | 第13页 |
| ·STK类基因 | 第13页 |
| ·跨膜受体激酶(LRR-TM-PK) | 第13页 |
| ·R基因类似序列的研究现状 | 第13-14页 |
| ·抗病基因介导的抗病信号转导 | 第14-15页 |
| ·R基因与avr基因相互识别产生信号 | 第14页 |
| ·R基因介导信号转导过程 | 第14-15页 |
| ·本研究的目标和内容 | 第15-16页 |
| ·研究目标 | 第15页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料及方法 | 第16-23页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-23页 |
| ·引物的设计 | 第16页 |
| ·总DNA的提取 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增 | 第17页 |
| ·总RNA的提取及RT-PCR | 第17-19页 |
| ·总RNA的提取 | 第17-19页 |
| ·cDNA的合成 | 第19页 |
| ·PCR扩增 | 第19页 |
| ·特异带的回收 | 第19页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第19-20页 |
| ·回收产物的克隆 | 第20页 |
| ·连接 | 第20页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第20页 |
| ·质粒DNA的提取及酶切 | 第20-21页 |
| ·DNA测序及序列分析 | 第21页 |
| ·Southern blot | 第21-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-30页 |
| ·总RNA的提取 | 第23页 |
| ·特异PCR及RT-PCR体系参数的优化 | 第23-25页 |
| ·RGA的分离和克隆 | 第25-26页 |
| ·枳壳抗病基因同源序列的分析及与已知抗病基因比较 | 第26-28页 |
| ·枳壳抗病基因同源序列RGA的RFLP分析 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| ·总RNA的提取方法的改进 | 第30页 |
| ·RGA的克隆及其分析 | 第30-31页 |
| ·对植物抗病基因工程的思考 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-38页 |
| 附表 | 第38-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
