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白细胞介素1β对AtT20细胞POMC基因表达调控的研究

英文缩写第1-7页
中文摘要第7-10页
英文摘要第10-13页
前言第13-15页
实验材料第15-21页
 一、细胞培养及试剂第15页
 二、放免试剂第15页
 三、RT-PCR和Southern杂交试剂、引物、探针第15-16页
 四、细菌菌株和质粒载体第16-19页
 五、克隆质粒所用酶类及分子量Marker第19页
 六、PCR扩增引物第19-20页
 七、克隆质粒DNA序列分析试剂第20页
 八、转染试剂第20页
 九、仪器第20-21页
实验方法第21-33页
 一、本研究的技术路线第21-22页
 二、细胞培养及rhIL1β刺激实验第22页
 三、RIA测定ir-ACTH含量第22-23页
 四、AtT20细胞总RNA提取第23-24页
 五、RT-PCR扩增POMC cDNA第24页
 六、Southern杂交及分析第24-26页
 七、质粒DNA制备第26-27页
 八、质粒DNA重组第27-29页
 九、质粒DNA的双链测序第29-30页
 十、质粒DNA的纯化第30页
 十一、重组荧光素酶报告基因真核表达质粒转染AtT20细胞及rhIL1β刺激实验第30-31页
 十二、荧光素酶活性及β-Gal活性测定第31-33页
结果第33-60页
 一、rhIL1β对AtT20细胞ir-ACTH分泌的影响第33-34页
 二、rhIL1β对AtT20细胞POMC mRNA水平的影响第34-37页
 三、大鼠POMC基因5’上游近端调控序列报告基因质粒的重组第37-41页
 四、重组质粒的酶切电泳图谱分析及核苷酸序列测定第41-49页
 五、pGL2-POMCs重组质粒在AtT20细胞中的转录调控活性测定第49-60页
讨论第60-67页
 一、rhIL1β对AtT20细胞ACTH分泌和POMC基因表达的影响第60-61页
 二、POMC基因基础表达的调控第61-63页
 三、IL1β对POMC基因(-480/+63bp)片段转录调控的影响第63-64页
 四、AP1位点在IL1β诱导POMC基因转录调控中的作用第64-65页
 五、POMC基因5’上游(-480/-34bp)调控序列中存在IL1β可诱导的调控位点第65-67页
结论第67-68页
综述第68-77页
参考文献第77-90页
致谢第90-91页
个人简历第91页

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