长期定位施肥棕壤及西藏高原土土壤微生物特性研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第10-11页 |
| ·土壤微生物研究进展 | 第11-13页 |
| ·土壤微生物在生态系统中的作用 | 第11-12页 |
| ·土壤微生物多样性研究进展 | 第12-13页 |
| ·土壤微生物多样性与土壤性质和功能的关系 | 第13页 |
| ·土壤微生物群落多样性研究方法 | 第13-21页 |
| ·经典的微生物纯培养法 | 第13-14页 |
| ·生物标志物法 | 第14-15页 |
| ·Biolog微平板法 | 第15页 |
| ·分子生物学方法 | 第15-21页 |
| ·土壤微生物总DNA的提取 | 第16页 |
| ·随机扩增多态DNA分析 | 第16-17页 |
| ·限制片段长度多态性分析 | 第17页 |
| ·单链构象多态性分析 | 第17页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第17-19页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第19-21页 |
| ·本课题的研究内容 | 第21-22页 |
| 第2章 材料和方法 | 第22-32页 |
| ·供试土壤 | 第22页 |
| ·沈阳棕壤 | 第22页 |
| ·西藏高原土 | 第22页 |
| ·土壤基本理化性质测定方法 | 第22-23页 |
| ·土壤细菌群落结构分析方法 | 第23-28页 |
| ·仪器及试剂 | 第23-24页 |
| ·土壤总DNA的提取 | 第24页 |
| ·细菌16S rDNA PCR | 第24-25页 |
| ·DGGE | 第25-26页 |
| ·变性剂储存液的配制 | 第25页 |
| ·电泳变性胶的配制 | 第25页 |
| ·电泳变性胶的灌制 | 第25-26页 |
| ·V3区的DGGE分离 | 第26页 |
| ·染色 | 第26页 |
| ·特征条带的回收 | 第26页 |
| ·特征条带的纯化 | 第26-27页 |
| ·克隆 | 第27-28页 |
| ·装载体 | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·挑克隆及重组子的检测 | 第28页 |
| ·目的DNA序列的测定 | 第28页 |
| ·数据处理 | 第28页 |
| ·土壤微生物定量分析 | 第28-32页 |
| ·引物与探针 | 第28-29页 |
| ·反应体系 | 第29-30页 |
| ·扩增程序 | 第30-31页 |
| ·标准曲线的制作 | 第31-32页 |
| 第3章 沈阳棕壤实验结果与分析 | 第32-42页 |
| ·土壤基本理化性质 | 第32-33页 |
| ·细菌16S rDNA片段扩增 | 第33页 |
| ·细菌DGGE | 第33-39页 |
| ·DGGE图谱分析 | 第33-35页 |
| ·DGGE谱带戴斯系数 | 第35-36页 |
| ·DGGE谱带聚类分析 | 第36-37页 |
| ·系统发育树 | 第37-39页 |
| ·沈阳棕壤微生物定量结果分析 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第4章 西藏高原土实验结果与分析 | 第42-52页 |
| ·土壤基本理化性质 | 第42页 |
| ·细菌16S rDNA片段扩增 | 第42-43页 |
| ·细菌DGGE | 第43-49页 |
| ·DGGE图谱分析 | 第43-45页 |
| ·DGGE谱带戴斯系数 | 第45-46页 |
| ·DGGE谱带聚类分析 | 第46-47页 |
| ·系统发育树 | 第47-49页 |
| ·西藏高原土微生物定量结果分析 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-52页 |
| 第5章 结论与讨论 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·土壤微生物核糖体DNA PCR扩增 | 第52页 |
| ·DGGE方法 | 第52-53页 |
| ·DGGE凝胶的制备 | 第52-53页 |
| ·DGGE电泳过程 | 第53页 |
| ·DGGE结果 | 第53-54页 |
| ·克隆条带的选择 | 第54页 |
| ·Real-Time PCR | 第54-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
