马铃薯乙烯响应因子基因的克隆及表达载体构建
| 缩略语表 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-18页 |
| ·转录因子的激活方式及调控机理 | 第7-8页 |
| ·转录因子的激活方式 | 第7页 |
| ·转录因子的调控机制 | 第7-8页 |
| ·植物转录因子的研究 | 第8-17页 |
| ·植物转录因子研究方法 | 第9-12页 |
| ·DNA结合区的研究方法 | 第9-10页 |
| ·转录调控区的研究方法 | 第10页 |
| ·利用突变体和转基因的功能分析方法 | 第10-12页 |
| ·AP2/EREBP转录因子研究现状 | 第12-13页 |
| ·ERF转录因子的研究现状 | 第13-17页 |
| ·ERF转录因子的DNA结合域 | 第13-14页 |
| ·ERF转录因子的顺式作用元件 | 第14页 |
| ·ERF转录因子诱导基因表达调控 | 第14-15页 |
| ·ERF转录因子调节植物的生长发育 | 第15页 |
| ·ERF转录因子在植物胁迫应答中的作用 | 第15-17页 |
| ·ERF转录因子在马铃薯中的研究 | 第17页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第17-18页 |
| 第二章 马铃薯ERF基因cDNA的克隆及表达分析 | 第18-32页 |
| ·前言 | 第18页 |
| ·材料和方法 | 第18-26页 |
| ·材料和试剂 | 第18页 |
| ·试管薯的诱导 | 第18-19页 |
| ·RNA提取前期准备工作 | 第19页 |
| ·马铃薯块茎总RNA的提取 | 第19-20页 |
| ·引物设计 | 第20页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第20-21页 |
| ·PCR产物的合成 | 第21页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第21-22页 |
| ·目的基因与克隆载体pUCM-T的连接 | 第22页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·连接产物的转化 | 第23页 |
| ·克隆质粒的提取 | 第23-25页 |
| ·重组子的PCR扩增和酶切鉴定 | 第25页 |
| ·重组子的测序 | 第25页 |
| ·ERF基因荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·总RNA的提取结果 | 第26页 |
| ·ERF基因cDNA的扩增 | 第26-27页 |
| ·提取质粒电泳检测结果 | 第27页 |
| ·重组子的PCR与双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组子测序结果 | 第28-29页 |
| ·ERF基因qRT-PCR结果 | 第29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| 第三章 马铃薯 ERF 基因的生物信息学分析 | 第32-38页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·ERF基因相似性分析 | 第33页 |
| ·ERF基因蛋白质的序列性质分析 | 第33-37页 |
| ·一级结构及理化性质预测 | 第33页 |
| ·二级结构预测及分析 | 第33-34页 |
| ·疏水性分析 | 第34页 |
| ·跨膜结构的预测 | 第34-35页 |
| ·信号肽预测 | 第35页 |
| ·三级结构预测及分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 马铃薯ERF基因表达载体的构建 | 第38-45页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料和方法 | 第38-41页 |
| ·材料和试剂 | 第38页 |
| ·表达载体pBI121 大量碱法提取 | 第38-39页 |
| ·ERF基因与表达载体pBI121 的连接与鉴定 | 第39-40页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的冻融法转化 | 第40-41页 |
| ·农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·克隆质粒和表达载体pBI121 的双酶切 | 第41页 |
| ·目的片段与pBI121 回收结果 | 第41-42页 |
| ·重组质粒PCR和双酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者介绍 | 第53-54页 |
| 导师简介 | 第54-55页 |
