| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Summary | 第9-11页 |
| Ⅰ 引言 | 第11-13页 |
| Ⅱ 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 马铃薯糖苷生物碱在国内外的研究概况 | 第13-16页 |
| ·马铃薯 SGAs 的化学结构 | 第13页 |
| ·马铃薯 SGAs 在组织器官中的分布 | 第13页 |
| ·SGAs 抗病虫作用 | 第13-14页 |
| ·SGAs 药理学作用 | 第14页 |
| ·SGAs 的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·马铃薯 SGAs 合成代谢途径研究 | 第15-16页 |
| 2 miRNA 的研究进展 | 第16-22页 |
| ·miRNA 的概述 | 第16-18页 |
| ·miRNA 生物形成和机制 | 第18页 |
| ·植物 miRNA 与 siRNA | 第18-20页 |
| ·植物 miRNA 的分布 | 第20-22页 |
| 3 植物 miRNA 研究方法 | 第22-26页 |
| ·新 miRNA 基因克隆 | 第22-23页 |
| ·Northern blottiong | 第23页 |
| ·microRNA 基因芯片 | 第23-24页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第24-25页 |
| ·锁定的核苷酸原位结交 | 第25页 |
| ·small RNA 高能量测序 | 第25-26页 |
| ·马铃薯 miRNA 研究现状 | 第26页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 5 本研究的技术路线 | 第27-29页 |
| ·基因克隆技术路线 | 第27-28页 |
| ·smallRNA 高通量测序技术路线 | 第28-29页 |
| Ⅲ 马铃薯 SGAs 合成代谢途径末端 SGTs 基因克隆及序列分析 | 第29-46页 |
| 1 材料与方法 | 第29-35页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌种和质粒 | 第29页 |
| ·试验药品 | 第29页 |
| ·试验仪器与设备 | 第29页 |
| ·主要溶液及培养基的配制 | 第29-30页 |
| ·马铃薯块茎总 RNA 提取 | 第30页 |
| ·引物设计与合成 | 第30-31页 |
| ·三个 SGTs 基因 cDNA 克隆 | 第31-32页 |
| ·目的片段的回收和克隆 | 第32-33页 |
| ·目的基因与 pMDR19-T 载体连接 | 第33页 |
| ·E.coli DH5α大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| ·三个糖基转移酶基因序列测定及生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-44页 |
| ·总 RNA 质量检测 | 第35页 |
| ·cDNA 中目的片段的 PCR 扩增 | 第35-36页 |
| ·SGTs 基因克隆、阳性重组子的筛选 | 第36-38页 |
| ·SGTs 基因核苷酸序列分析 | 第38页 |
| ·SGTs 蛋白生物信息学分析 | 第38-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| Ⅳ smallRNA 高通量测序及 SGAs 合成相关 miRNA 筛选 | 第46-53页 |
| 1 材料与方法 | 第46-48页 |
| ·试验材料 | 第46页 |
| ·试验药品 | 第46页 |
| ·试验仪器及设备 | 第46页 |
| ·试验材料处理 | 第46页 |
| ·马铃薯叶片及块茎中 smallRNA 提取 | 第46-47页 |
| ·smallRNA 的质量检测 | 第47页 |
| ·构建马铃薯叶片及块茎 smallRNA 库 | 第47-48页 |
| ·smallRNA 高通量测序 | 第48页 |
| ·成熟 miRNA 筛选 | 第48页 |
| ·miRNA 靶基因的预测 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-51页 |
| ·马铃薯 miRNA 筛选 | 第48页 |
| ·调控马铃薯 SGAs 靶基因筛选及功能分析 | 第48-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| Ⅴ 结论 | 第53-54页 |
| Ⅵ 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
| 导师简介 | 第64页 |