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水稻OsMPEC基因及拟南芥胁迫诱导microRNA的分离及其功能分析

第一部分 水稻OsMPEC 基因的克隆及其功能分析第1-53页
 中文摘要第11-13页
 英文摘要第13-15页
 1 前言第15-22页
   ·植物叶绿素合成途径第15页
   ·镁原卟啉甲酯环化酶第15-16页
   ·镁原卟啉甲酯环化酶的编码基因(MPEC 基因)在光合自养生物中广泛存在第16-18页
   ·MPEC 基因在植物中的研究第18页
   ·MPEC 基因在突变体中的研究第18-21页
   ·本课题的目的和意义第21-22页
 2 材料与方法第22-34页
   ·实验材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·菌株与质粒第22页
     ·酶与各种生化试剂第22页
     ·实验用的引物和寡核苷酸第22-23页
   ·实验方法第23-34页
     ·水稻OsMPEC 序列的克隆第23-24页
     ·植物表达载体的构建第24-27页
     ·植物表达载体的转化第27-29页
     ·转基因植株Northern 杂交分析第29-31页
     ·转基因植株的鉴定分析第31-32页
     ·转基因愈伤组织中 gus 基因表达的定量分析第32-33页
     ·转基因植株生理指标的测定第33-34页
 3 结果与分析第34-42页
   ·水稻OsMPEC 序列分析第34-36页
     ·水稻OsMPEC 序列的获得第34页
     ·水稻OsMPEC 序列的克隆第34-36页
   ·OsMPEC 基因的表达分析第36-38页
     ·OsMPEC 基因主要在光合器官中表达第36页
     ·高温和低温可以诱导OsMPEC 基因的表达第36-38页
     ·缺氧胁迫、缺铁胁迫和铜胁迫可以抑制OsMPEC 基因的表达第38页
   ·OsMPEC 基因功能在水稻中的研究第38-42页
     ·转基因水稻的获得和鉴定第38-39页
     ·正反义转基因植株的表型第39-40页
     ·转基因水稻抗性植株的生理指标的测定第40-42页
 4 讨论第42-45页
   ·水稻OsMPEC 基因可以受到温度信号的响应第42页
   ·水稻OsMPEC 基因对三种环境胁迫信号的响应第42-43页
   ·水稻OsMPEC 基因参与植物叶绿素的生物合成途径第43-44页
   ·水稻OsMPEC 基因影响植物光合系统I 的合成第44-45页
 5 结论第45-46页
 6 参考文献第46-53页
第二部分 拟南芥胁迫诱导microRNA 的分离及其功能分析第53-110页
 中文摘要第53-55页
 英文摘要第55-57页
 1 前言第57-76页
   ·microRNA 的概念与特征第57-59页
     ·microRNA 的概念第57页
     ·microRNA 的特点第57-58页
     ·microRNA 与siRNA 的比较第58-59页
   ·植物miRNA 的生物学合成代谢途径第59-62页
     ·植物miRNA 的形成过程第59-60页
     ·参与植物miRNA 形成过程的酶第60-62页
   ·miRNA 的分离第62-63页
     ·直接克隆法第63页
     ·正向遗传学方法第63页
     ·生物信息学方法第63页
   ·miRNA 的功能第63-64页
     ·miRNA 对靶基因剪切第64页
     ·miRNA 的翻译抑制作用第64页
     ·miRNA 与转录沉默第64页
   ·miRNA 靶基因的预测第64-68页
     ·生物信息学第67-68页
     ·miRNA 表达芯片第68页
     ·miRNA 靶基因的生物学验证第68页
   ·miRNA 的表达特性第68-69页
   ·植物中miRNA 介导的基因调控第69-73页
     ·参与生长激素信号传导第69页
     ·参与植物组织器官的生长发育第69页
     ·参与器官极性发育和发育转换第69-70页
     ·参与植物抗逆反应第70-73页
   ·miRNA 启动子的研究第73-74页
   ·本课题的目的和意义第74-76页
 2 材料与方法第76-84页
   ·实验材料第76-78页
     ·植物材料第76页
     ·菌株与质粒第76页
     ·酶与各种生化试剂第76页
     ·实验用的引物和寡核苷酸第76-78页
   ·实验方法第78-84页
     ·拟南芥miRNA 芯片实验第78-79页
     ·拟南芥miRNA 表达模式的RT-PCR 半定量检测第79页
     ·拟南芥miRNA 的克隆第79-80页
     ·植物表达载体的转化第80-81页
     ·转基因植物的GUS 表达分析第81-84页
 3 结果与分析第84-95页
   ·拟南芥芯片实验第84-87页
     ·胁迫响应miRNA 的获得第85-86页
     ·胁迫响应miRNA 的分类第86-87页
   ·芯片结果验证第87-88页
   ·胁迫诱导miRNA 时序性表达分析第88-89页
   ·miRNA 基因前体上游序列分析第89页
   ·胁迫诱导miRNA 启动子分析第89-95页
     ·miRNA 上游序列的分离和表达载体构建第90页
     ·转基因拟南芥的获得第90-95页
 4 讨论第95-99页
   ·外源环境胁迫可以诱导miRNA 的表达第95-96页
   ·miRNA 可以同时参与植物的生长发育过程和胁迫响应过程第96-97页
   ·miRNA的表达模式可能与其启动子中富含的胁迫响应元件有关第97页
   ·miRNA上游序列具有启动子活性第97-98页
   ·miRNA 启动子可能具有和功能基因启动子类似的调控模式第98-99页
 5 结论第99-100页
 6 参考文献第100-110页
7 附录第110-115页
致谢第115-116页
攻读学位期间发表的学术论文第116页

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