第一部分 水稻OsMPEC 基因的克隆及其功能分析 | 第1-53页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
英文摘要 | 第13-15页 |
1 前言 | 第15-22页 |
·植物叶绿素合成途径 | 第15页 |
·镁原卟啉甲酯环化酶 | 第15-16页 |
·镁原卟啉甲酯环化酶的编码基因(MPEC 基因)在光合自养生物中广泛存在 | 第16-18页 |
·MPEC 基因在植物中的研究 | 第18页 |
·MPEC 基因在突变体中的研究 | 第18-21页 |
·本课题的目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-34页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·酶与各种生化试剂 | 第22页 |
·实验用的引物和寡核苷酸 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-34页 |
·水稻OsMPEC 序列的克隆 | 第23-24页 |
·植物表达载体的构建 | 第24-27页 |
·植物表达载体的转化 | 第27-29页 |
·转基因植株Northern 杂交分析 | 第29-31页 |
·转基因植株的鉴定分析 | 第31-32页 |
·转基因愈伤组织中 gus 基因表达的定量分析 | 第32-33页 |
·转基因植株生理指标的测定 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-42页 |
·水稻OsMPEC 序列分析 | 第34-36页 |
·水稻OsMPEC 序列的获得 | 第34页 |
·水稻OsMPEC 序列的克隆 | 第34-36页 |
·OsMPEC 基因的表达分析 | 第36-38页 |
·OsMPEC 基因主要在光合器官中表达 | 第36页 |
·高温和低温可以诱导OsMPEC 基因的表达 | 第36-38页 |
·缺氧胁迫、缺铁胁迫和铜胁迫可以抑制OsMPEC 基因的表达 | 第38页 |
·OsMPEC 基因功能在水稻中的研究 | 第38-42页 |
·转基因水稻的获得和鉴定 | 第38-39页 |
·正反义转基因植株的表型 | 第39-40页 |
·转基因水稻抗性植株的生理指标的测定 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
·水稻OsMPEC 基因可以受到温度信号的响应 | 第42页 |
·水稻OsMPEC 基因对三种环境胁迫信号的响应 | 第42-43页 |
·水稻OsMPEC 基因参与植物叶绿素的生物合成途径 | 第43-44页 |
·水稻OsMPEC 基因影响植物光合系统I 的合成 | 第44-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
6 参考文献 | 第46-53页 |
第二部分 拟南芥胁迫诱导microRNA 的分离及其功能分析 | 第53-110页 |
中文摘要 | 第53-55页 |
英文摘要 | 第55-57页 |
1 前言 | 第57-76页 |
·microRNA 的概念与特征 | 第57-59页 |
·microRNA 的概念 | 第57页 |
·microRNA 的特点 | 第57-58页 |
·microRNA 与siRNA 的比较 | 第58-59页 |
·植物miRNA 的生物学合成代谢途径 | 第59-62页 |
·植物miRNA 的形成过程 | 第59-60页 |
·参与植物miRNA 形成过程的酶 | 第60-62页 |
·miRNA 的分离 | 第62-63页 |
·直接克隆法 | 第63页 |
·正向遗传学方法 | 第63页 |
·生物信息学方法 | 第63页 |
·miRNA 的功能 | 第63-64页 |
·miRNA 对靶基因剪切 | 第64页 |
·miRNA 的翻译抑制作用 | 第64页 |
·miRNA 与转录沉默 | 第64页 |
·miRNA 靶基因的预测 | 第64-68页 |
·生物信息学 | 第67-68页 |
·miRNA 表达芯片 | 第68页 |
·miRNA 靶基因的生物学验证 | 第68页 |
·miRNA 的表达特性 | 第68-69页 |
·植物中miRNA 介导的基因调控 | 第69-73页 |
·参与生长激素信号传导 | 第69页 |
·参与植物组织器官的生长发育 | 第69页 |
·参与器官极性发育和发育转换 | 第69-70页 |
·参与植物抗逆反应 | 第70-73页 |
·miRNA 启动子的研究 | 第73-74页 |
·本课题的目的和意义 | 第74-76页 |
2 材料与方法 | 第76-84页 |
·实验材料 | 第76-78页 |
·植物材料 | 第76页 |
·菌株与质粒 | 第76页 |
·酶与各种生化试剂 | 第76页 |
·实验用的引物和寡核苷酸 | 第76-78页 |
·实验方法 | 第78-84页 |
·拟南芥miRNA 芯片实验 | 第78-79页 |
·拟南芥miRNA 表达模式的RT-PCR 半定量检测 | 第79页 |
·拟南芥miRNA 的克隆 | 第79-80页 |
·植物表达载体的转化 | 第80-81页 |
·转基因植物的GUS 表达分析 | 第81-84页 |
3 结果与分析 | 第84-95页 |
·拟南芥芯片实验 | 第84-87页 |
·胁迫响应miRNA 的获得 | 第85-86页 |
·胁迫响应miRNA 的分类 | 第86-87页 |
·芯片结果验证 | 第87-88页 |
·胁迫诱导miRNA 时序性表达分析 | 第88-89页 |
·miRNA 基因前体上游序列分析 | 第89页 |
·胁迫诱导miRNA 启动子分析 | 第89-95页 |
·miRNA 上游序列的分离和表达载体构建 | 第90页 |
·转基因拟南芥的获得 | 第90-95页 |
4 讨论 | 第95-99页 |
·外源环境胁迫可以诱导miRNA 的表达 | 第95-96页 |
·miRNA 可以同时参与植物的生长发育过程和胁迫响应过程 | 第96-97页 |
·miRNA的表达模式可能与其启动子中富含的胁迫响应元件有关 | 第97页 |
·miRNA上游序列具有启动子活性 | 第97-98页 |
·miRNA 启动子可能具有和功能基因启动子类似的调控模式 | 第98-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
6 参考文献 | 第100-110页 |
7 附录 | 第110-115页 |
致谢 | 第115-116页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第116页 |