摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词(Abbreviation) | 第7-11页 |
1.绪论 | 第11-30页 |
·高等植物的开花调控 | 第11-16页 |
·植物几种主要的成花途径 | 第12-14页 |
·春化途径 | 第12页 |
·自主开花途径 | 第12-13页 |
·光周期开花途径 | 第13页 |
·赤霉素途径 | 第13-14页 |
·高等植物主要的成花基因 | 第14-16页 |
·春化作用与抽薹开花 | 第16-22页 |
·春化作用的相关基因 | 第16-21页 |
·高等植物中春化途径开花基因的研究现状 | 第21-22页 |
·抽薹性状研究进展 | 第22-23页 |
·大白菜耐先期抽薹育种 | 第22页 |
·晚抽薹遗传研究 | 第22-23页 |
·晚抽薹性分子标记研究 | 第23页 |
·基因克隆的方法 | 第23-26页 |
·根据已知序列克隆基因 | 第23页 |
·根据已知探针克隆基因 | 第23-24页 |
·未知序列的基因打靶 | 第24-26页 |
·随机引物法克隆未知序列基因 | 第24页 |
·mRNA差别显示(mRNA differential display,DD) | 第24页 |
·代表性差示分析(represential display analysis,RDA) | 第24-25页 |
·抑制性扣除杂(suppression subtractive hybridization,SSH) | 第25页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第25-26页 |
·用特异抗体克隆基因 | 第26页 |
·特异基因的功能克隆 | 第26页 |
·实时荧光定量PCR | 第26-29页 |
·实时荧光定量PCR原理 | 第26-27页 |
·反应原理 | 第26-27页 |
·定量原理 | 第27页 |
·定量方法 | 第27页 |
·实时荧光定量PCR的应用 | 第27-29页 |
·基因表达的定量 | 第28页 |
·等位基因的鉴定 | 第28页 |
·单核苷酸多态性(SNP)及突变分析 | 第28-29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
2 材料和方法 | 第30-46页 |
·实验材料及处理 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-42页 |
·RNA的提取 | 第30-32页 |
·器皿的处理 | 第30页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·仪器 | 第31页 |
·RNA提取的步骤 | 第31页 |
·RNA的检测 | 第31页 |
·RNA纯化 | 第31-32页 |
·cDNA的合成 | 第32-34页 |
·1st strand cDNA合成反应 | 第32页 |
·2nd strand cDNA合成反应以及末端平滑化 | 第32-33页 |
·合成的cDNA精制 | 第33页 |
·合成的cDNA检测 | 第33-34页 |
·cDNA-AFLP分析与抽薹性相关的序列 | 第34-38页 |
·cDNA酶切及接头连接 | 第35页 |
·预扩增 | 第35-36页 |
·选择性扩增 | 第36-37页 |
·聚丙烯酰胺胶的制备 | 第37页 |
·测序胶电泳 | 第37页 |
·银染 | 第37-38页 |
·与抽薹相关的cDNA-AFLP目标片段的获得 | 第38-42页 |
·差异条带的统计 | 第38页 |
·差异条带的回收及重扩增 | 第38页 |
·目的片段的琼脂糖凝胶回收纯化 | 第38-39页 |
·目的片段与载体的连接 | 第39-40页 |
·目标片段的转化 | 第40-42页 |
·RT-PCR检测 | 第42-44页 |
·合成cDNA一链 | 第42-43页 |
·RT-PCR检测 | 第43-44页 |
·荧光定量PCR | 第44-46页 |
·本实验采用takara公司的SYBR Premix Ex Tag~(TM) | 第44-45页 |
·实时荧光定量PCR反应条件 | 第45页 |
·结果处理 | 第45-46页 |
3 结果与分析 | 第46-59页 |
·低温春化结果 | 第46页 |
·cDNA-AFLP多态性分析 | 第46-47页 |
·差异条带功能分类 | 第47-52页 |
·差异片段的半定量RT-PCR检测 | 第52-53页 |
·差异片段的荧光定量PCR分析 | 第53-59页 |
4.讨论 | 第59-64页 |
·荧光定量分析结果 | 第59-62页 |
·低温诱导下均上调表达的基因 | 第59-60页 |
·在两材料中表达模式不同的基因 | 第60-61页 |
·低温诱导下表达呈现上调-下调-再上调表达趋势的序列 | 第61-62页 |
·低温诱导过程中发现的其它EST | 第62-64页 |
·低温诱导过程中的基因表达调控 | 第62页 |
·低温诱导与信号转导 | 第62-63页 |
·低温诱导与胁迫应答 | 第63-64页 |
5 结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
致谢 | 第70页 |