| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-35页 |
| 1 小麦抗白粉病研究进展 | 第15-24页 |
| ·小麦与白粉病菌互作的生物学机制 | 第15-16页 |
| ·小麦白粉菌侵染寄主的过程 | 第15页 |
| ·白粉菌侵染过程中寄主细胞的生理生化反应 | 第15-16页 |
| ·植物与病原菌互作的类型 | 第16-18页 |
| ·植物病原菌无毒基因的克隆 | 第18页 |
| ·植物抗病基因研究进展 | 第18-22页 |
| ·植物抗病基因的结构与分类 | 第18-19页 |
| ·抗病基因结构域的功能 | 第19页 |
| ·已克隆的植物抗病基因 | 第19-21页 |
| ·R基因在基因组的分布与进化 | 第21-22页 |
| ·小麦抗白粉病的基因源 | 第22-24页 |
| 2 禾本科作物比较基因组学研究进展 | 第24-26页 |
| 3 病毒诱导基因沉默技术研究进展 | 第26-35页 |
| ·VIGS技术的原理 | 第26-28页 |
| ·VIGS病毒载体的开发 | 第28-31页 |
| ·VIGS载体导入植物的方法 | 第31-32页 |
| ·目的基因沉默后的检测方法 | 第32页 |
| ·提高VIGS效率的途径 | 第32页 |
| ·VIGS技术的应用 | 第32-33页 |
| ·VIGS技术的优点 | 第33-34页 |
| ·VIGS技术的局限性 | 第34-35页 |
| 第二部分 研究报告 | 第35-88页 |
| 第一章 根据基因芯片克隆抗病相关基因并进行功能分析 | 第35-65页 |
| 1 材料与方法 | 第36-45页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·植物材料 | 第36页 |
| ·白粉菌菌源 | 第36页 |
| ·大麦基因芯片 | 第36-37页 |
| ·簇毛麦叶片cDNA文库 | 第37页 |
| ·试验方法 | 第37-45页 |
| ·根据基因芯片上调表达探针设计的引物 | 第37-38页 |
| ·接种和取样方法 | 第38页 |
| ·总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·反转录第一链的合成 | 第39页 |
| ·cDNA片段扩增及扩增产物的回收 | 第39-40页 |
| ·cDNA片段的克隆和序列比较 | 第40-41页 |
| ·簇毛麦叶片cDNA文库筛选 | 第41页 |
| ·瞬间表达载体的构建 | 第41页 |
| ·利用基因枪瞬间表达重组质粒 | 第41-42页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·目的蛋白的诱导表达和检测 | 第43页 |
| ·激素处理方法 | 第43页 |
| ·Real-time RT-PCR方法 | 第43-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-63页 |
| ·利用基因芯片信息克隆抗病相关基因cDNA片段 | 第45-47页 |
| ·簇毛麦Hv-EREBP基因的克隆与功能分析 | 第47-55页 |
| ·簇毛麦Hv-EREBP基因的序列分析 | 第47-51页 |
| ·Hv-EREBP蛋白的亚细胞定位 | 第51页 |
| ·融合蛋白Hv-EREBP的表达 | 第51-53页 |
| ·Hv-EREBP基因在接种白粉菌后的簇毛麦叶片中的表达 | 第53页 |
| ·Hv-EREBP基因在激素诱导后的簇毛麦叶片中的表达 | 第53-55页 |
| ·簇毛麦Hv-PKI基因的克隆与分析 | 第55-63页 |
| ·簇毛麦Hv-PKI基因的序列分析 | 第55-58页 |
| ·Hv-PKI蛋白的亚细胞定位 | 第58-59页 |
| ·融合蛋白Hv-PKI的表达 | 第59-60页 |
| ·Hv-PKI基因在接种白粉菌后的簇毛麦叶片中的表达 | 第60-61页 |
| ·Hv-PKI基因在激素诱导后的簇毛麦叶片中的表达 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 第二章 簇毛麦抗病基因类似物HV-LRR的克隆与功能分析 | 第65-74页 |
| 1 材料与方法 | 第66-68页 |
| ·试验材料 | 第66页 |
| ·试验方法 | 第66-68页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物cDNA序列与基因组序列的克隆 | 第67页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物的染色体定位 | 第67页 |
| ·Real-time RT-PCR方法 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-73页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物的克隆 | 第68-69页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物在簇毛麦染色体上的定位 | 第69-70页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物在接种白粉菌后的簇毛麦叶片中的表达 | 第70-71页 |
| ·Hv-LRR抗病基因类似物在外源激素诱导后的簇毛麦叶片中的表达 | 第71-73页 |
| 3 讨论 | 第73-74页 |
| 第三章 建立簇毛麦病毒诱导基因沉默体系并研究抗白粉病相关基因的功能 | 第74-88页 |
| 1 材料和方法 | 第74-78页 |
| ·植物材料及白粉菌菌源 | 第74页 |
| ·用于基因沉默的目标基因 | 第74页 |
| ·病毒载体及其构建方法 | 第74-75页 |
| ·体外转录生成病毒转录本 | 第75-76页 |
| ·接种病毒转录本 | 第76页 |
| ·接种病毒转录本后植株的表型观察 | 第76页 |
| ·RNA提取及反转录第一链的合成 | 第76页 |
| ·Real-time RT-PCR技术分析基因表达量 | 第76-77页 |
| ·白粉菌接种及取样方法 | 第77-78页 |
| ·染色观察白粉菌侵染状况 | 第78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-85页 |
| ·BSMV:GFP接种植株的表型观察 | 第78-79页 |
| ·PDS基因沉默效果分析 | 第79-80页 |
| ·BSMV:PDS接种植株的表型观察 | 第80-82页 |
| ·利用BSMV在簇毛麦中沉默Hv-EREBP基因与Hv-S/TPK基因 | 第82-83页 |
| ·白粉菌侵染状况观察 | 第83-85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| 全文结论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
