摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-32页 |
1. 水稻半不育现象及其研究进展 | 第12-18页 |
·籼粳亚种间杂种半不育 | 第12-17页 |
·水稻品种内的半不育 | 第17-18页 |
2. 水稻花粉发育的研究进展 | 第18-26页 |
·水稻花粉发育的过程 | 第18-20页 |
·水稻花粉败育的途径 | 第20-21页 |
·控制水稻及其他高等植物花粉发育过程的关键基因 | 第21-26页 |
3 驱动蛋白 | 第26-31页 |
·驱动蛋白结构和生化特性 | 第26-28页 |
·驱动蛋白超级家族的统一分类和命名 | 第28页 |
·驱动蛋白的功能 | 第28-30页 |
·驱动蛋白与植物雄性不育 | 第30-31页 |
4 本研究的目的与意义 | 第31-32页 |
第二章 水稻花粉半不育突变体的形态和细胞学观察 | 第32-52页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
·植物材料分离 | 第33-34页 |
·田间种植 | 第34页 |
·育性调查 | 第34页 |
·扫描和透射电镜观察 | 第34-35页 |
·每个花药花粉粒总数计数 | 第35页 |
·裂药性观察与柱头花粉数目观察 | 第35页 |
·小孢子DAPI染色分析 | 第35-36页 |
·花药的半薄切片观察 | 第36页 |
·减数分裂染色体压片观察 | 第36页 |
2 结果与分析 | 第36-48页 |
·w207-2的主要表型特点 | 第36-39页 |
·w207-2半不育形成的原因分析 | 第39-42页 |
·w207-2雄配子发育过程分析 | 第42-48页 |
3. 讨论 | 第48-52页 |
·水稻半不育突变体的研究意义 | 第48页 |
·w207-2半不育发生的原因分析 | 第48-49页 |
·w20-2雄配子败育的时期和原因分析 | 第49-52页 |
第三章 水稻花粉半不育基因的图位克隆与功能分析 | 第52-80页 |
1. 材料与方法 | 第53-59页 |
·材料种植 | 第53页 |
·表型鉴定 | 第53页 |
·DNA样品制备 | 第53页 |
·SSR和CAPS(dCAPS)标记开发 | 第53-54页 |
·标记分析 | 第54-55页 |
·花粉半不育基因pssl的精细定位 | 第55页 |
·目标区域基因的功能预测和序列测定 | 第55页 |
·转基因功能互补载体构建 | 第55-56页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第56页 |
·转基因植株PCR鉴定 | 第56页 |
·半定量RT-PCR和RACE | 第56-57页 |
·GUS活性的组织化学染色分析 | 第57页 |
·亚细胞定位 | 第57-58页 |
·原核表达 | 第58-59页 |
·微管结合活性测定 | 第59页 |
·生物信息学分析 | 第59页 |
2. 结果与分析 | 第59-75页 |
·PSS1基因的进一步精细定位 | 第59-61页 |
·候选区域测序、基因的功能预测及筛选 | 第61-65页 |
·OsKINESIN1全长cDNA的克隆和序列分析 | 第65-69页 |
·转基因功能互补试验 | 第69-71页 |
·OsKINESIN1的表达模式分析 | 第71-72页 |
·OsKINESINl蛋白的亚细胞定位 | 第72-74页 |
·OsKINESIN1蛋白的微管结合活性测定 | 第74-75页 |
3. 讨论 | 第75-80页 |
·半不育基因的图位克隆 | 第75-76页 |
·OsKINESIN1是一个新的Kinesin-1家族的成员 | 第76-77页 |
·OsKINESIN1中的R289对驱动蛋白中的微管结合活性非常重要 | 第77-78页 |
·OsKINESIN1可能参与了减数分裂过程中的染色体移动 | 第78-80页 |
第四章 全文总结 | 第80-83页 |
1. 全文结论 | 第80-82页 |
·花粉半不育和裂药性差是w207-2结实率低的原因 | 第80页 |
·w207-2减数分裂异常时造成花粉半不育的重要原因 | 第80-81页 |
·PSS1中的一个关键氨基酸突变造成了w207-2半不育 | 第81页 |
·OsKINESINl是一个定位在细胞核内的驱动蛋白,在减数分裂时期高表达 | 第81页 |
·w207-2中的R289突变造成驱动蛋白微管结合活性部分丧失 | 第81-82页 |
2. 本研究创新之处 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-100页 |
附录 | 第100-107页 |
在读期间发表的论文 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |