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水稻花粉半不育基因PSS1的图位克隆与功能研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
第一章 文献综述第12-32页
 1. 水稻半不育现象及其研究进展第12-18页
   ·籼粳亚种间杂种半不育第12-17页
   ·水稻品种内的半不育第17-18页
 2. 水稻花粉发育的研究进展第18-26页
   ·水稻花粉发育的过程第18-20页
   ·水稻花粉败育的途径第20-21页
   ·控制水稻及其他高等植物花粉发育过程的关键基因第21-26页
 3 驱动蛋白第26-31页
   ·驱动蛋白结构和生化特性第26-28页
   ·驱动蛋白超级家族的统一分类和命名第28页
   ·驱动蛋白的功能第28-30页
   ·驱动蛋白与植物雄性不育第30-31页
 4 本研究的目的与意义第31-32页
第二章 水稻花粉半不育突变体的形态和细胞学观察第32-52页
 1 材料与方法第33-36页
   ·植物材料分离第33-34页
   ·田间种植第34页
   ·育性调查第34页
   ·扫描和透射电镜观察第34-35页
   ·每个花药花粉粒总数计数第35页
   ·裂药性观察与柱头花粉数目观察第35页
   ·小孢子DAPI染色分析第35-36页
   ·花药的半薄切片观察第36页
   ·减数分裂染色体压片观察第36页
 2 结果与分析第36-48页
   ·w207-2的主要表型特点第36-39页
   ·w207-2半不育形成的原因分析第39-42页
   ·w207-2雄配子发育过程分析第42-48页
 3. 讨论第48-52页
   ·水稻半不育突变体的研究意义第48页
   ·w207-2半不育发生的原因分析第48-49页
   ·w20-2雄配子败育的时期和原因分析第49-52页
第三章 水稻花粉半不育基因的图位克隆与功能分析第52-80页
 1. 材料与方法第53-59页
   ·材料种植第53页
   ·表型鉴定第53页
   ·DNA样品制备第53页
   ·SSR和CAPS(dCAPS)标记开发第53-54页
   ·标记分析第54-55页
   ·花粉半不育基因pssl的精细定位第55页
   ·目标区域基因的功能预测和序列测定第55页
   ·转基因功能互补载体构建第55-56页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第56页
   ·转基因植株PCR鉴定第56页
   ·半定量RT-PCR和RACE第56-57页
   ·GUS活性的组织化学染色分析第57页
   ·亚细胞定位第57-58页
   ·原核表达第58-59页
   ·微管结合活性测定第59页
   ·生物信息学分析第59页
 2. 结果与分析第59-75页
   ·PSS1基因的进一步精细定位第59-61页
   ·候选区域测序、基因的功能预测及筛选第61-65页
   ·OsKINESIN1全长cDNA的克隆和序列分析第65-69页
   ·转基因功能互补试验第69-71页
   ·OsKINESIN1的表达模式分析第71-72页
   ·OsKINESINl蛋白的亚细胞定位第72-74页
   ·OsKINESIN1蛋白的微管结合活性测定第74-75页
 3. 讨论第75-80页
   ·半不育基因的图位克隆第75-76页
   ·OsKINESIN1是一个新的Kinesin-1家族的成员第76-77页
   ·OsKINESIN1中的R289对驱动蛋白中的微管结合活性非常重要第77-78页
   ·OsKINESIN1可能参与了减数分裂过程中的染色体移动第78-80页
第四章 全文总结第80-83页
 1. 全文结论第80-82页
   ·花粉半不育和裂药性差是w207-2结实率低的原因第80页
   ·w207-2减数分裂异常时造成花粉半不育的重要原因第80-81页
   ·PSS1中的一个关键氨基酸突变造成了w207-2半不育第81页
   ·OsKINESINl是一个定位在细胞核内的驱动蛋白,在减数分裂时期高表达第81页
   ·w207-2中的R289突变造成驱动蛋白微管结合活性部分丧失第81-82页
 2. 本研究创新之处第82-83页
参考文献第83-100页
附录第100-107页
在读期间发表的论文第107-108页
致谢第108页

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