摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-11页 |
1 实验材料 | 第11-16页 |
·主要仪器 | 第11页 |
·质粒 | 第11-12页 |
·细胞株与菌株 | 第12页 |
·培养基 | 第12-13页 |
·E.coli培养基 | 第12页 |
·微生物样品发酵培养基 | 第12-13页 |
·细胞培养基 | 第13页 |
·试剂盒 | 第13页 |
·试剂 | 第13-15页 |
·有机溶剂 | 第15页 |
·其他耗材 | 第15-16页 |
2 实验方法 | 第16-32页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·细胞的复苏 | 第16页 |
·贴壁细胞的传代 | 第16页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
·质粒中提 | 第17页 |
·药物筛选流程 | 第17-19页 |
·抗病毒活性检测 | 第19-21页 |
·稳定表达细胞模型的建立 | 第21-28页 |
·pIRES-hVif-hA3G真核表达质粒构建 | 第21-26页 |
·挑选单克隆 | 第26-28页 |
·Western Blot模型流程 | 第28-30页 |
·微生物来源活性成分的分离纯化方法 | 第30-32页 |
·菌株发酵 | 第30页 |
·发酵液上清的分离纯化 | 第30页 |
·菌丝体活性成份的提取 | 第30-32页 |
3. 实验结果 | 第32-50页 |
·Vif-hA3G药物筛选模型的优化 | 第32-33页 |
·瞬时转染模型的优化 | 第32页 |
·样品溶剂的摸索 | 第32-33页 |
·稳定表达细胞模型的建立 | 第33-37页 |
·构建pIRES-hVif-hA3G,质粒 | 第33-37页 |
·pIRES-hVif-hA3G质粒稳定转染单克隆的筛选 | 第37页 |
·化合物库的筛选 | 第37-39页 |
·四个阳性化合物的抗病毒活性的检测 | 第39-41页 |
·抗病毒活性菌株的确定 | 第41-44页 |
·发酵液样品对hA3G上调作用的检测 | 第41-43页 |
·I06A-02292、I06A-02348、I06A-02436分离纯化预实验 | 第43-44页 |
·I06A-02348菌株发酵产物的分离纯化 | 第44-46页 |
·I06-02348菌丝体活性成份的分离纯化 | 第46-50页 |
·菌丝体中活性成份的检测 | 第46-47页 |
·活性成份的硅胶柱分离 | 第47-50页 |
讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-55页 |
综述 | 第55-64页 |
致谢 | 第64-65页 |