| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 1 实验材料 | 第11-16页 |
| ·主要仪器 | 第11页 |
| ·质粒 | 第11-12页 |
| ·细胞株与菌株 | 第12页 |
| ·培养基 | 第12-13页 |
| ·E.coli培养基 | 第12页 |
| ·微生物样品发酵培养基 | 第12-13页 |
| ·细胞培养基 | 第13页 |
| ·试剂盒 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13-15页 |
| ·有机溶剂 | 第15页 |
| ·其他耗材 | 第15-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-32页 |
| ·细胞培养 | 第16页 |
| ·细胞的复苏 | 第16页 |
| ·贴壁细胞的传代 | 第16页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
| ·质粒中提 | 第17页 |
| ·药物筛选流程 | 第17-19页 |
| ·抗病毒活性检测 | 第19-21页 |
| ·稳定表达细胞模型的建立 | 第21-28页 |
| ·pIRES-hVif-hA3G真核表达质粒构建 | 第21-26页 |
| ·挑选单克隆 | 第26-28页 |
| ·Western Blot模型流程 | 第28-30页 |
| ·微生物来源活性成分的分离纯化方法 | 第30-32页 |
| ·菌株发酵 | 第30页 |
| ·发酵液上清的分离纯化 | 第30页 |
| ·菌丝体活性成份的提取 | 第30-32页 |
| 3. 实验结果 | 第32-50页 |
| ·Vif-hA3G药物筛选模型的优化 | 第32-33页 |
| ·瞬时转染模型的优化 | 第32页 |
| ·样品溶剂的摸索 | 第32-33页 |
| ·稳定表达细胞模型的建立 | 第33-37页 |
| ·构建pIRES-hVif-hA3G,质粒 | 第33-37页 |
| ·pIRES-hVif-hA3G质粒稳定转染单克隆的筛选 | 第37页 |
| ·化合物库的筛选 | 第37-39页 |
| ·四个阳性化合物的抗病毒活性的检测 | 第39-41页 |
| ·抗病毒活性菌株的确定 | 第41-44页 |
| ·发酵液样品对hA3G上调作用的检测 | 第41-43页 |
| ·I06A-02292、I06A-02348、I06A-02436分离纯化预实验 | 第43-44页 |
| ·I06A-02348菌株发酵产物的分离纯化 | 第44-46页 |
| ·I06-02348菌丝体活性成份的分离纯化 | 第46-50页 |
| ·菌丝体中活性成份的检测 | 第46-47页 |
| ·活性成份的硅胶柱分离 | 第47-50页 |
| 讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 综述 | 第55-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |