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以Vif降解hA3G为靶点的抗HIV-1药物筛选模型应用

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
缩略语表第7-9页
前言第9-11页
1 实验材料第11-16页
     ·主要仪器第11页
     ·质粒第11-12页
     ·细胞株与菌株第12页
     ·培养基第12-13页
       ·E.coli培养基第12页
       ·微生物样品发酵培养基第12-13页
     ·细胞培养基第13页
     ·试剂盒第13页
     ·试剂第13-15页
     ·有机溶剂第15页
     ·其他耗材第15-16页
2 实验方法第16-32页
     ·细胞培养第16页
       ·细胞的复苏第16页
       ·贴壁细胞的传代第16页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第16-17页
     ·质粒中提第17页
     ·药物筛选流程第17-19页
     ·抗病毒活性检测第19-21页
     ·稳定表达细胞模型的建立第21-28页
       ·pIRES-hVif-hA3G真核表达质粒构建第21-26页
       ·挑选单克隆第26-28页
     ·Western Blot模型流程第28-30页
     ·微生物来源活性成分的分离纯化方法第30-32页
       ·菌株发酵第30页
       ·发酵液上清的分离纯化第30页
       ·菌丝体活性成份的提取第30-32页
3. 实验结果第32-50页
     ·Vif-hA3G药物筛选模型的优化第32-33页
       ·瞬时转染模型的优化第32页
       ·样品溶剂的摸索第32-33页
     ·稳定表达细胞模型的建立第33-37页
       ·构建pIRES-hVif-hA3G,质粒第33-37页
       ·pIRES-hVif-hA3G质粒稳定转染单克隆的筛选第37页
     ·化合物库的筛选第37-39页
     ·四个阳性化合物的抗病毒活性的检测第39-41页
     ·抗病毒活性菌株的确定第41-44页
       ·发酵液样品对hA3G上调作用的检测第41-43页
       ·I06A-02292、I06A-02348、I06A-02436分离纯化预实验第43-44页
     ·I06A-02348菌株发酵产物的分离纯化第44-46页
     ·I06-02348菌丝体活性成份的分离纯化第46-50页
       ·菌丝体中活性成份的检测第46-47页
       ·活性成份的硅胶柱分离第47-50页
讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-55页
综述第55-64页
致谢第64-65页

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