摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-16页 |
·5,10-亚甲基四氢叶酸脱氢酶分类及其特点 | 第9-11页 |
·5,10-亚甲基四氢叶酸脱氢酶的纯化及其性质 | 第11-12页 |
·5,10-亚甲基四氢叶酸脱氢酶基因及其表达和调控 | 第12-15页 |
·本文的研究目标 | 第15-16页 |
第二章 拟南芥DHY/CYC基因的克隆 | 第16-27页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·实验样品 | 第16页 |
·菌种 | 第16页 |
·载体 | 第16页 |
·工具酶 | 第16页 |
·测序及引物合成 | 第16页 |
·化学试剂 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-22页 |
·拟南芥的栽培 | 第17页 |
·CTAB法提取基因组DNA | 第17页 |
·拟南芥RNA提取 | 第17-19页 |
·反转录 | 第19-20页 |
·拟南芥DHY/CYC基因编码区的克隆 | 第20-22页 |
·结果与讨论 | 第22-27页 |
·DHY/CYC的cDNA克隆 | 第22-23页 |
·DHY/CYC cDNA克隆的序列分析 | 第23-27页 |
第三章 拟南芥DHY/CYC基因的过表达研究 | 第27-33页 |
·实验材料 | 第27页 |
·方法 | 第27-30页 |
·入门载体构建 | 第27页 |
·表达载体构建 | 第27-28页 |
·农杆菌LBA 4404电击感受态细胞的制备和农杆菌转化 | 第28-29页 |
·拟南芥转化(Floral Dipping法) | 第29页 |
·转基因植株的筛选和鉴定 | 第29-30页 |
·结果与讨论 | 第30-33页 |
·FL1、FL2和FL3过量表达载体的构建 | 第30-31页 |
·抗性筛选阳性幼苗 | 第31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第四章 DHY/CYC基因的原核表达 | 第33-44页 |
·实验材料 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·原核表达载体构建 | 第33-34页 |
·含靶基因的质粒在大肠杆菌中的诱导表达及电泳检测 | 第34-37页 |
·结果与讨论 | 第37-44页 |
·原核表达载体构建 | 第37-39页 |
·蛋白质序列分析 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-44页 |
展望 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |