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EGCG对山羊卵母细胞IVM,IVF的影响以及BMP15基因在山羊卵母细胞成熟过程的表达

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
符号说明第11-12页
第一章 文献综述第12-26页
 1. EGCG 的生物学功能以及其在细胞中的作用第12-15页
     ·EGCG 的生物学活性和药理作用第12页
     ·EGCG 与癌症治疗第12-14页
     ·抗衰老作用第14页
     ·EGCG 与细胞培养第14-15页
 2. BMP15 的生物学功能及其在动物生殖中的作用第15-21页
   ·BMP15 的生物学作用第15-18页
   ·BMP15 的信号通道第18页
   ·BMP15 在雌性动物生殖中的作用第18-21页
     ·绵羊第18-20页
     ·小鼠第20-21页
     ·人第21页
 3. 本研究的目的意义第21-22页
 参考文献第22-26页
第二章 EGCG 对山羊卵母细胞IVM,IVF 的影响第26-38页
 1. 实验材料第26-29页
   ·实验动物卵巢第26页
   ·主要试剂第26页
   ·主要仪器第26-27页
   ·实验器材的准备第27页
     ·玻璃器皿的准备第27页
     ·手术器械的准备第27页
     ·橡胶塞的处理第27页
   ·操作液配方第27-29页
     ·洗卵液配方(PBS)第27-28页
     ·胎牛血清的灭活分装第28页
     ·EGCG 浓储的配制第28页
     ·丙酮酸钠浓储的配制第28页
     ·FSH 浓储的配制第28页
     ·LH 浓储的配制第28-29页
     ·E_2浓储的配制第29页
     ·0.1%透明质酸酶的配制第29页
 2. 实验方法第29-32页
   ·实验分组第29-30页
   ·实验内容第30页
   ·卵巢的处理第30-31页
   ·山羊卵母细胞体外培养环境的控制第31页
   ·卵母细胞的选择与获取第31页
   ·精子的获能、受精和胚胎发育第31页
   ·统计处理第31-32页
 3 结果与分析第32-33页
   ·不同浓度EGCG 对山羊卵母细胞成熟的影响第32页
   ·不同浓度EGCG 对山羊卵母细胞受精的影响第32-33页
 4 讨论第33-36页
   ·体外成熟培养的主要影响因素第33-34页
   ·EGCG 在培养过程中的作用第34-36页
 5 结论第36页
 参考文献第36-38页
第三章 不同成熟阶段山羊卵母细胞BMP15 基因的表达与免疫蛋白定位第38-59页
 1 实验材料第38-41页
   ·菌株和克隆载体第38页
   ·主要试剂第38-39页
   ·主要仪器第39页
   ·主要溶液的配制第39-41页
 2 实验方法第41-47页
   ·山羊卵母细胞总RNA 的提取及纯化第41-42页
   ·反转录—cDNA 链的获得第42页
   ·山羊卵母细胞BMP15 基因PCR 扩增第42-43页
   ·目的片段的纯化回收第43-44页
   ·PCR 产物与克隆载体的连接第44页
   ·感受态细胞的制备第44页
   ·质粒的转化第44-45页
   ·阳性克隆的PCR 鉴定第45页
   ·序列测定与分析第45页
   ·山羊卵母细胞的收集和体外成熟第45-46页
   ·不同成熟山羊卵母细胞选择标准第46页
   ·荧光定量PCR第46页
   ·统计原理第46-47页
   ·BMP15 在山羊卵巢中的免疫组化定位第47页
 3 结果与分析第47-52页
   ·山羊卵母细胞总RNA 的检测第47-48页
   ·阳性克隆的PCR 鉴定第48页
   ·山羊卵母细胞BMP15 基因测序及比对第48-49页
   ·山羊BMP15 基因的标准曲线第49页
   ·山羊BMP15 基因的溶解曲线第49-50页
   ·山羊卵母细胞体外成熟过程中BMP15mRNA 的表达第50页
   ·BMP15 在卵巢中的免疫组化定位第50-52页
 4 讨论第52-56页
   ·BMP15 基因的分析第52-53页
   ·BMP15 的调控机制第53-54页
   ·BMP15 在山羊卵巢中免疫蛋白定位第54-56页
 5 结论第56-57页
 参考文献第57-59页
附录第59-61页
致谢第61-62页
硕士期间发表的论文第62页

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