中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1. EGCG 的生物学功能以及其在细胞中的作用 | 第12-15页 |
·EGCG 的生物学活性和药理作用 | 第12页 |
·EGCG 与癌症治疗 | 第12-14页 |
·抗衰老作用 | 第14页 |
·EGCG 与细胞培养 | 第14-15页 |
2. BMP15 的生物学功能及其在动物生殖中的作用 | 第15-21页 |
·BMP15 的生物学作用 | 第15-18页 |
·BMP15 的信号通道 | 第18页 |
·BMP15 在雌性动物生殖中的作用 | 第18-21页 |
·绵羊 | 第18-20页 |
·小鼠 | 第20-21页 |
·人 | 第21页 |
3. 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
参考文献 | 第22-26页 |
第二章 EGCG 对山羊卵母细胞IVM,IVF 的影响 | 第26-38页 |
1. 实验材料 | 第26-29页 |
·实验动物卵巢 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·实验器材的准备 | 第27页 |
·玻璃器皿的准备 | 第27页 |
·手术器械的准备 | 第27页 |
·橡胶塞的处理 | 第27页 |
·操作液配方 | 第27-29页 |
·洗卵液配方(PBS) | 第27-28页 |
·胎牛血清的灭活分装 | 第28页 |
·EGCG 浓储的配制 | 第28页 |
·丙酮酸钠浓储的配制 | 第28页 |
·FSH 浓储的配制 | 第28页 |
·LH 浓储的配制 | 第28-29页 |
·E_2浓储的配制 | 第29页 |
·0.1%透明质酸酶的配制 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-32页 |
·实验分组 | 第29-30页 |
·实验内容 | 第30页 |
·卵巢的处理 | 第30-31页 |
·山羊卵母细胞体外培养环境的控制 | 第31页 |
·卵母细胞的选择与获取 | 第31页 |
·精子的获能、受精和胚胎发育 | 第31页 |
·统计处理 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-33页 |
·不同浓度EGCG 对山羊卵母细胞成熟的影响 | 第32页 |
·不同浓度EGCG 对山羊卵母细胞受精的影响 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-36页 |
·体外成熟培养的主要影响因素 | 第33-34页 |
·EGCG 在培养过程中的作用 | 第34-36页 |
5 结论 | 第36页 |
参考文献 | 第36-38页 |
第三章 不同成熟阶段山羊卵母细胞BMP15 基因的表达与免疫蛋白定位 | 第38-59页 |
1 实验材料 | 第38-41页 |
·菌株和克隆载体 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第39页 |
·主要溶液的配制 | 第39-41页 |
2 实验方法 | 第41-47页 |
·山羊卵母细胞总RNA 的提取及纯化 | 第41-42页 |
·反转录—cDNA 链的获得 | 第42页 |
·山羊卵母细胞BMP15 基因PCR 扩增 | 第42-43页 |
·目的片段的纯化回收 | 第43-44页 |
·PCR 产物与克隆载体的连接 | 第44页 |
·感受态细胞的制备 | 第44页 |
·质粒的转化 | 第44-45页 |
·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第45页 |
·序列测定与分析 | 第45页 |
·山羊卵母细胞的收集和体外成熟 | 第45-46页 |
·不同成熟山羊卵母细胞选择标准 | 第46页 |
·荧光定量PCR | 第46页 |
·统计原理 | 第46-47页 |
·BMP15 在山羊卵巢中的免疫组化定位 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-52页 |
·山羊卵母细胞总RNA 的检测 | 第47-48页 |
·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第48页 |
·山羊卵母细胞BMP15 基因测序及比对 | 第48-49页 |
·山羊BMP15 基因的标准曲线 | 第49页 |
·山羊BMP15 基因的溶解曲线 | 第49-50页 |
·山羊卵母细胞体外成熟过程中BMP15mRNA 的表达 | 第50页 |
·BMP15 在卵巢中的免疫组化定位 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
·BMP15 基因的分析 | 第52-53页 |
·BMP15 的调控机制 | 第53-54页 |
·BMP15 在山羊卵巢中免疫蛋白定位 | 第54-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
附录 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
硕士期间发表的论文 | 第62页 |