中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-23页 |
一 雌性蜜蜂孵育条件研究进展 | 第10-14页 |
1 温度对雌性蜜蜂孵育的影响 | 第10-11页 |
2 营养对雌性蜜蜂孵育的影响 | 第11-14页 |
二 蜜蜂级型分化研究进展 | 第14-23页 |
1 营养与级型分化 | 第14-17页 |
2 激素与级型分化 | 第17-19页 |
3 基因调控与级型分化 | 第19-23页 |
实验部分 | 第23-37页 |
1 实验材料 | 第23-25页 |
2 实验方法 | 第25-37页 |
·实验用蜂幼虫的采集 | 第25-26页 |
·幼虫的分组处理 | 第26页 |
·幼虫每日龄体重和初生重的记录 | 第26-27页 |
·胚后发育历期的记录 | 第27页 |
·统计每组意蜂幼虫和蛹的每日死亡只数,并计算最终的出房率 | 第27页 |
·出房后成蜂外部级型特征观察 | 第27页 |
·出房后成蜂卵巢的冰冻切片 | 第27-28页 |
·幼虫整体总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
·RT-PCR | 第29-31页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第31-32页 |
·切胶回收和 PCR 二次扩增及纯化 | 第32页 |
·差异片段的克隆 | 第32-34页 |
·序列的测定与分析 | 第34-35页 |
·Dot-blot杂交重复鉴定序列的阳性 | 第35-37页 |
实验结果与分析 | 第37-51页 |
1 人工条件下培育蜂王和工蜂幼虫的最佳食粮组分配比 | 第37页 |
2 自然条件与人工条件下蜂王幼虫与工蜂幼虫发育情况比较 | 第37-41页 |
3 胚后的发育历期比较 | 第41-42页 |
4 幼虫出房率与死亡高峰 | 第42页 |
5 出房成蜂外部级型特征观察与比较 | 第42-43页 |
6 出房后成蜂卵巢的冰冻切片 | 第43-44页 |
7 总 RNA 完整性检测结果 | 第44-45页 |
8 RT-PCR 后差异表达条带的筛选结果 | 第45-46页 |
9 差异片段的二次扩增及回收、纯化结果 | 第46页 |
10 克隆结束后 PCR 检测克隆阳性的结果 | 第46-47页 |
11 Dot-blot 检测测序结果阳性的结果 | 第47-49页 |
12 序列的比对与分析结果 | 第49-51页 |
讨论部分 | 第51-64页 |
实验一 意蜂幼虫培养实验 | 第51-58页 |
1 配制幼虫食粮所需遵循的原则 | 第51-52页 |
2 幼虫体重偏轻和封盖后 2~3 日出现死亡高峰的原因 | 第52-55页 |
3 茶花粉水提物与意蜂的级型分化 | 第55-58页 |
实验二 分子生物学实验 | 第58-64页 |
1 mRNA 差异显示的技术要求和保证 | 第58-60页 |
2 序列比对结果的讨论 | 第60-63页 |
3 茶花粉水提物与基因差异表达的关系 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75页 |