致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-16页 |
·紫茎泽兰的生物学特性 | 第9页 |
·紫茎泽兰的分布 | 第9-10页 |
·紫茎泽兰在世界的分布范围 | 第9-10页 |
·紫茎泽兰在中国的分布范围 | 第10页 |
·紫茎泽兰的危害 | 第10-11页 |
·紫茎泽兰的研究进展 | 第11页 |
·类黄酮3'-羟化酶(F3'H) | 第11-14页 |
·F3'H 基因的分离及细胞定位 | 第11-12页 |
·F3'H 基因的表达特性 | 第12页 |
·F3'H 基因的代谢途径及功能 | 第12-14页 |
·生理指标的选择 | 第14-15页 |
·过氧化物酶(POD) | 第14-15页 |
·苯丙氨酸解氨酶(PAL) | 第15页 |
·RNA 干扰 | 第15-16页 |
·RNA 干扰的发现及定义 | 第16页 |
·RNA 干扰技术的应用 | 第16页 |
2 引言 | 第16-19页 |
·研究目的、意义及内容 | 第16-18页 |
·本研究的技术路线 | 第18-19页 |
·植物过表达载体121-F3'H 的构建及对烟草的转化 | 第18页 |
·RNA 干扰载体的构建 | 第18-19页 |
3 材料和方法 | 第19-36页 |
·试验材料 | 第19-20页 |
·基因及转基因植物材料 | 第19页 |
·引物和测序 | 第19页 |
·试验菌株和载体 | 第19-20页 |
·主要试剂及耗材 | 第20页 |
·仪器设备 | 第20页 |
·试验方法 | 第20-36页 |
·常用分子生物学试验方法 | 第20-27页 |
·转基因烟草的鉴定方法 | 第27-28页 |
·转基因烟草的生理检测方法 | 第28页 |
·植物过表达载体的构建与酶切鉴定 | 第28-30页 |
·RNA 干扰载体的构建及鉴定 | 第30-36页 |
4 结果与分析 | 第36-46页 |
·植物过表达载体的构建 | 第36-39页 |
·F3'H 基因和PBI121 载体片段的获得 | 第36-38页 |
·F3'H 基因和PBI121 载体片段的连接、转化 | 第38页 |
·F3'H 基因片段插入方向的鉴定 | 第38-39页 |
·烟草的遗传转化及PCR 鉴定 | 第39-40页 |
·转基因烟草与非转基因烟草的花色比较 | 第40页 |
·F3'H 基因在转基因烟草中的表达 | 第40-41页 |
·半定量RT-PCR 检测 | 第40-41页 |
·Real-time PCR 检测 | 第41页 |
·转基因烟草生理指标的检测 | 第41-43页 |
·过氧化物酶(POD)活性的检测 | 第41-42页 |
·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的检测 | 第42-43页 |
·RNA 干扰载体的构建 | 第43-46页 |
·核心片段的获得 | 第43页 |
·酶切鉴定插入方向 | 第43-44页 |
·PCR | 第44-45页 |
·Pst I 酶切鉴定重组质粒BP-F3'H | 第45-46页 |
·PCR 鉴定重组质粒LR- F3'H | 第46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
·构建紫茎泽兰F3'H 基因正向植物过量表达载体 | 第46页 |
·转基因烟草的PCR 检测 | 第46页 |
·转基因烟草花色观察 | 第46-47页 |
·转基因烟草POD 和PAL 的活性变化 | 第47页 |
·RNA 干扰载体的构建与烟草转化 | 第47页 |
6 讨论 | 第47-49页 |
·转基因烟草POD 和PAL 活性变化 | 第47-48页 |
·转基因烟草花色变浅分析 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
Abstract | 第55-57页 |
附录一:植物表达载体PBI121 | 第57页 |
附录二:紫茎泽兰F3'H 基因片段(含Xba I 位点) | 第57-58页 |