| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-20页 |
| ·钾概况 | 第12-14页 |
| ·钾素作用 | 第12-13页 |
| ·植物钾素营养研究进程 | 第13页 |
| ·我国土壤缺钾及钾矿情况 | 第13-14页 |
| ·钾离子转运蛋白研究 | 第14-16页 |
| ·HAK/KUP/KT转运蛋白 | 第15-16页 |
| ·钾离子转运蛋白的表达调控 | 第16-17页 |
| ·植物启动子的研究现状 | 第17-18页 |
| ·獐茅及其耐盐机理研究 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 AlHAK1实时定量方法的建立 | 第20-28页 |
| ·实验材料与仪器 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·管家基因β-actin部分片段的获得 | 第20页 |
| ·Real-time PCR引物 | 第20-21页 |
| ·RNA提取 | 第21页 |
| ·实时定量PCR反应体系的优化 | 第21页 |
| ·标准品的制备及扩增效率评价 | 第21页 |
| ·稳定性评价 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-25页 |
| ·獐茅β-actin部分片段的获得 | 第21-22页 |
| ·Real-time PCR引物 | 第22页 |
| ·RNA纯度和完整性分析 | 第22页 |
| ·实时定量PCR反应体系的优化 | 第22-24页 |
| ·熔解曲线分析 | 第24页 |
| ·标准曲线扩增效率评价 | 第24-25页 |
| ·反应体系的稳定性评价 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-28页 |
| 3 AlHAK1的表达调控分析 | 第28-36页 |
| ·实验材料和仪器 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-33页 |
| ·AlHAK1在不同的组织和发育期的表达分析 | 第29-30页 |
| ·缺钾处理时AlHAK1的表达分析 | 第30页 |
| ·NaCl处理时AlHAK1的表达分析 | 第30-32页 |
| ·激素和其他非生物胁迫处理时AlHAK1的表达分析 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 4 AlHAK1上游启动子的克隆及序列分析 | 第36-48页 |
| ·实验材料与仪器 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·锚定PCR法克隆AlHAK1启动子序列 | 第37-43页 |
| ·AlHAK1启动子序列分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·AlHAK1 5’侧翼序列的克隆 | 第43-44页 |
| ·AlHAK1启动子序列分析 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 5 AlHAK1启动子植物表达载体的构建及表达 | 第48-61页 |
| ·实验材料和仪器 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48页 |
| ·实验试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·AlHAK1启动子植物表达载体的构建 | 第48-51页 |
| ·工程菌的获得 | 第51-52页 |
| ·AlHAK1启动子转化烟草 | 第52页 |
| ·转化烟草的分子检测 | 第52-53页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第53页 |
| ·转基因烟草的GUS荧光定量分析 | 第53-54页 |
| ·AlHAK1启动子在洋葱表皮中的瞬时表达 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·植物表达载体的构建及转化 | 第54-56页 |
| ·转基因烟草的GUS组织化学染色 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草的GUS荧光定量检测 | 第57-58页 |
| ·洋葱表皮瞬时表达 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录A 缩略语及培养基配方 | 第67-69页 |
| 附录B 电泳用DNA Marker | 第69-70页 |
| 附录C 论文中所用的质粒图谱 | 第70-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |