| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)概述 | 第10-11页 |
| 2 PRRSV的主要结构蛋白 | 第11-13页 |
| ·GP5蛋白 | 第11-12页 |
| ·M蛋白 | 第12页 |
| ·N蛋白 | 第12-13页 |
| 3 PRRSV免疫学研究进展 | 第13-15页 |
| ·体液免疫 | 第13-14页 |
| ·细胞免疫 | 第14页 |
| ·免疫抑制 | 第14-15页 |
| 4 PRRS疫苗研究进展 | 第15-19页 |
| ·PRRS灭活疫苗 | 第15页 |
| ·PRRS弱毒疫苗 | 第15页 |
| ·PRRS亚单位疫苗 | 第15-16页 |
| ·PRRS活病毒载体疫苗 | 第16-18页 |
| ·PRRS核酸疫苗 | 第18-19页 |
| 5 Prime boost免疫策略 | 第19-20页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 试验研究 | 第21-49页 |
| 1 试验材料 | 第21-25页 |
| ·病毒和细胞 | 第21页 |
| ·质粒、菌种与实验动物 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液及培养基的配置方法 | 第21-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
| 2 试验方法 | 第25-38页 |
| ·GP5基因的克隆 | 第25-27页 |
| ·GP5蛋白的原核表达 | 第27-29页 |
| ·GP5蛋白的真核表达 | 第29-30页 |
| ·GP5基因重组牛痘病毒活载体的构建 | 第30-34页 |
| ·应用Prime boost策略免疫Babl/c小鼠 | 第34-38页 |
| 3 试验结果 | 第38-45页 |
| ·GP5基因克隆载体的构建 | 第38-39页 |
| ·原核表达质粒pGEX-GP5的鉴定 | 第39页 |
| ·原核表达质粒pGEX-GP5的表达与纯化 | 第39-40页 |
| ·GP5蛋白的Western blot鉴定 | 第40-41页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1-GP5的鉴定 | 第41页 |
| ·真核表达GP5蛋白的间接免疫荧光鉴定 | 第41-42页 |
| ·pSC11-GP5的构建与正反向鉴定 | 第42页 |
| ·rWR-PRRSV-GP5的筛选 | 第42-43页 |
| ·rWR-PRRSV-GP5的PCR鉴定 | 第43页 |
| ·rWR-PRRSV-GP5的IFA鉴定 | 第43-44页 |
| ·rWR-PRRSV-GP5的Western blot鉴定 | 第44页 |
| ·ELISA抗体检测结果 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |