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时空特异表达番茄Sly-miR164对果实发育与成熟的调控研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第11-18页
    1.1 MicroRNA(miRNA)的研究概述第11-14页
        1.1.1 miRNA的形成第11-12页
        1.1.2 miRNA的特点第12页
        1.1.3 植物miRNA的功能第12-14页
    1.2 miR164的研究概述第14-15页
        1.2.1 miR164家族成员的概况第14-15页
        1.2.2 miR164的研究进展第15页
    1.3 NAC家族的研究概述第15-16页
        1.3.1 NAC家族的概况和研究进展第15-16页
    1.4 研究内容、总体研究路线第16-17页
        1.4.1 研究内容第16-17页
        1.4.2 总体研究路线第17页
    1.5 研究目的及意义第17-18页
第二章 材料与方法第18-40页
    2.1 实验材料第18-19页
        2.1.1 植物材料第18页
        2.1.2 菌种及载体第18页
        2.1.3 引物第18页
        2.1.4 试剂盒及试剂第18页
        2.1.5 实验仪器第18-19页
        2.1.6 培养基和抗生素以及各种常用溶液第19页
        2.1.7 数据库及生物软件第19页
    2.2 实验方法第19-40页
        2.2.1 载体构建第19-29页
        2.2.2 植物转基因构建与鉴定第29-30页
        2.2.3 番茄植物基因组DNA提取第30页
        2.2.4 转基因植物的阳性鉴定第30-31页
        2.2.5 植物总RNA的提取第31-32页
        2.2.6 反转录第32-34页
        2.2.7 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第34-35页
        2.2.8 Northern Blot印迹杂交第35-37页
        2.2.9 GUS组织化学染色第37-39页
        2.2.10 转基因表型分析第39-40页
第三章 结果与分析第40-63页
    3.1 Sly-miR164表达模式的分析第40-45页
        3.1.1 Northern Blot印迹杂交检测第40-41页
        3.1.2 靶基因的qPCR检测第41-43页
        3.1.3 GUS转基因植株染色第43-45页
    3.2 载体构建第45-52页
        3.2.1 过表达载体构建第45-47页
        3.2.2 沉默载体构建第47-49页
        3.2.3 Crispr/cas9敲除载体的构建第49-50页
        3.2.4 GUS融合载体的构建第50页
        3.2.5 转基因植株的鉴定第50-52页
    3.3 Sly-miR164对果实成熟发育时间的影响第52-55页
    3.4 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164b影响成熟Sly-miR164的积累第55页
    3.5 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164a/b影响植物的形态第55-56页
    3.6 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164b导致叶片形态改变第56-57页
    3.7 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164b改变花器官形态第57-59页
    3.8 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164a/b改变果实发育第59-61页
    3.9 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164b改变靶基因表达第61-63页
第四章 讨论第63-66页
    4.1 Sly-miR164及靶基因的时空特异表达模式第63-64页
    4.2 Sly-miR164影响果实发育和成熟的时间第64页
    4.3 Crispr/cas9敲除pri-Sly-miR164a/b改变番茄植株的形态第64-66页
第五章 结论第66-67页
    5.1 本文结论第66-67页
参考文献第67-71页
附录 1第71-73页
附录 2第73-74页
附录 3第74-77页
附录 4第77-78页
攻读硕士学位期间的研究成果第78-79页
致谢第79页

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