| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 1 桉树组织培养研究进展 | 第12-14页 |
| ·桉树栽培史 | 第12-13页 |
| ·桉树组织培养研究进展 | 第13-14页 |
| 2 桉树基因工程策略 | 第14-18页 |
| ·转化方法与遗传稳定性 | 第14-15页 |
| ·桉树基因工程研究进展 | 第15-16页 |
| ·桉树基因工程中遇到的主要问题 | 第16-18页 |
| ·基础理论研究薄弱 | 第16页 |
| ·再生及移栽困难 | 第16-17页 |
| ·桉树抗病基因少，抗病谱窄 | 第17页 |
| ·外源基因易沉默 | 第17-18页 |
| 3 萝卜抗真菌蛋白基因在植物抗真菌病中的利用 | 第18-20页 |
| ·萝卜抗真菌蛋白(Rs-AFPs)抗真菌的分子机制 | 第18-19页 |
| ·在植物抗真菌中的利用 | 第19-20页 |
| 4 高等植物诱导性启动子的研究进展 | 第20-22页 |
| ·植物诱导性启动子研究进展 | 第20-21页 |
| ·植物诱导性启动子的应用前景 | 第21-22页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 尾叶桉再生体系的建立 | 第23-37页 |
| 1 材料 | 第23页 |
| 2 主要植物生长调节剂及培养基基本成分的配制 | 第23页 |
| ·主要植物生长调节剂的配制 | 第23页 |
| ·培养基基本成分的配制方法(见表2-1) | 第23页 |
| 3 实验方法 | 第23-26页 |
| ·无菌苗的获得 | 第23页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第23-25页 |
| ·不同激素组合对愈伤组织形成的影响 | 第24页 |
| ·基本培养基对愈伤组织形成的影响 | 第24-25页 |
| ·不同添加物对愈伤组织抗褐化的影响 | 第25页 |
| ·不定芽的诱导 | 第25页 |
| ·不同激素浓度组合对不定芽诱导的影响 | 第25页 |
| ·基本培养基对不定芽诱导的影响 | 第25页 |
| ·丛生芽的增殖 | 第25页 |
| ·不同激素浓度诱导丛生芽的增殖 | 第25页 |
| ·不定芽的伸长 | 第25-26页 |
| ·不同激素组合对不定芽伸长的影响 | 第25-26页 |
| ·再生苗的生根与移栽 | 第26页 |
| ·不同浓度激素对生根的影响 | 第26页 |
| ·移栽 | 第26页 |
| 4、结果与分析 | 第26-32页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第26-28页 |
| ·不同激素组合对愈伤组织形成的影响 | 第26页 |
| ·基本培养基对愈伤诱导的影响 | 第26-27页 |
| ·不同添加物对愈伤组织抗褐化的影响 | 第27-28页 |
| ·不定芽的诱导 | 第28-30页 |
| ·不同激素浓度组合对不定芽诱导的影响 | 第28-29页 |
| ·基本培养基对不定芽诱导的影响 | 第29-30页 |
| ·诱导丛生芽的增殖 | 第30-31页 |
| ·不同激素浓度诱导丛生芽的增殖 | 第30-31页 |
| ·不定芽的伸长 | 第31-32页 |
| ·再生苗的生根与移栽 | 第32页 |
| 5 讨论 | 第32-35页 |
| ·愈伤组织形态特征与不定芽发生的关系 | 第32-34页 |
| ·影响桉树再生的因素 | 第34-35页 |
| 6. 小结 | 第35-36页 |
| 7. 附图 | 第36-37页 |
| 第三章 RS-AFP2基因导入桉树的研究 | 第37-49页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌种与质粒 | 第37页 |
| ·试验用基本培养基 | 第37-38页 |
| ·农杆菌培养基 | 第37页 |
| ·遗传转化基本培养基 | 第37-38页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-41页 |
| ·抗生素浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·卡那霉素(Kan)选择压的确定 | 第38页 |
| ·头孢霉素(Cef)浓度的确定 | 第38-39页 |
| ·头孢霉素(Cef)对桉树下胚轴不定芽诱导的影响 | 第38-39页 |
| ·头孢霉素(Cef)抑制农杆菌实验 | 第39页 |
| ·农杆菌中目的基因的检测 | 第39-40页 |
| ·农杆菌质粒提取 | 第39页 |
| ·PCR检测菌种中的目的基因 | 第39-40页 |
| ·农杆菌介导的尾叶桉遗传转化体系的建立 | 第40-41页 |
| ·工程菌液的制备 | 第40页 |
| ·遗传转化参数的优化 | 第40-41页 |
| ·预培养时间的优化 | 第40页 |
| ·侵染液pH值的优化 | 第40页 |
| ·共培养时间的优化 | 第40页 |
| ·AS(乙酰丁香酮)浓度的优化 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·抗生素浓度的确定 | 第41-42页 |
| ·卡那霉素(Kan)选择压的确定 | 第41页 |
| ·头孢霉素(Cef)浓度的确定 | 第41-42页 |
| ·农杆菌中目的基因的检测 | 第42-43页 |
| ·遗传转化参数的优化 | 第43-45页 |
| ·预培养时间的优化 | 第43页 |
| ·侵染液pH值的优化 | 第43-44页 |
| ·共培养时间的优化 | 第44页 |
| ·AS(乙酰丁香酮)浓度的优化 | 第44-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-47页 |
| ·Kan与Cef在桉树遗传转化中的使用 | 第45-46页 |
| ·影响桉树遗传转化的因素 | 第46-47页 |
| 5. 小结 | 第47-48页 |
| 6. 附图 | 第48-49页 |
| 第四章 转基因尾叶桉的分子检测 | 第49-58页 |
| 1 材料 | 第49-50页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·菌种及质粒 | 第49页 |
| ·主要试剂及其配制 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-53页 |
| ·农杆菌质粒提取 | 第50页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第50页 |
| ·PCR检测目的基因 | 第50-51页 |
| ·RNA提取 | 第51-52页 |
| ·器材及试剂准备 | 第51页 |
| ·RNA的提取及检测 | 第51-52页 |
| ·RT-PCR | 第52-53页 |
| ·RT反应 | 第52页 |
| ·PCR反应 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-55页 |
| ·PCR检测目的基因 | 第53页 |
| ·RNA的提取及检测 | 第53-54页 |
| ·RT-PCR | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| ·假转化体的产生 | 第55页 |
| ·Prp1-1启动子的诱导模序 | 第55-56页 |
| 5. 小结 | 第56-58页 |
| 第五章 转基因尾叶桉的抗病性检测 | 第58-65页 |
| 1. 材料 | 第58页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·仪器 | 第58页 |
| 2 方法 | 第58-60页 |
| ·离体叶片抗病性调查 | 第58页 |
| ·酶粗提液的获取 | 第58-59页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)的提取 | 第59页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)的提取 | 第59页 |
| ·过氧化物酶(POD)的提取 | 第59页 |
| ·酶活测定 | 第59-60页 |
| ·PAL活性测定 | 第59页 |
| ·PPO活性测定 | 第59-60页 |
| ·POD活性测定 | 第60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-62页 |
| ·离体叶片抗病性调查 | 第60页 |
| ·酶活测定 | 第60-62页 |
| ·PAL活性测定 | 第60-61页 |
| ·PPO活性测定 | 第61页 |
| ·POD活性测定 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| ·PAL参与植物抗病的机制 | 第62-63页 |
| ·PAL参与植保素合成 | 第62页 |
| ·PAL参与木质素合成 | 第62-63页 |
| ·PAL参与酚类物质合成 | 第63页 |
| ·PPO在植物抗病中的作用 | 第63-64页 |
| ·植物体内POD活性与植物抗病性的关系 | 第64页 |
| 5 小结 | 第64-65页 |
| 本研究的主要创新点及下一步工作设想 | 第65-66页 |
| 1 本研究的主要创新点 | 第65页 |
| 2 下一步工作设想 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 缩略表 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |