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猪瘟病毒E2蛋白结合细胞受体的鉴定

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-28页
   ·猪瘟及猪瘟病毒概述第12-14页
     ·猪瘟第12页
     ·猪瘟病毒及其基因组结构第12-13页
     ·猪瘟病毒结构蛋白的结构和功能第13-14页
   ·病毒细胞受体研究第14-20页
     ·病毒细胞受体概述第14-15页
     ·细胞受体在病毒感染过程中的作用第15-16页
     ·病毒细胞受体研究方法第16-20页
   ·猪瘟病毒及瘟病毒细胞受体的研究进展第20-23页
     ·硫酸乙酰肝素第20-21页
     ·低密度脂蛋白第21-22页
     ·CD46第22-23页
   ·抗独特型抗体概述第23-27页
     ·抗独特型抗体的定义第24-25页
     ·抗独特型抗体的制备第25-26页
     ·抗独特型抗体 Ab2β 的应用第26-27页
   ·本研究的目的与意义第27-28页
第二章 利用抗独特型抗体鉴定出一个54 kDa 的猪瘟病毒候选受体第28-34页
   ·材料与方法第28-30页
     ·病毒、细胞和实验动物第28页
     ·主要试剂第28页
     ·抗独特型多克隆抗体的制备第28-29页
     ·抗独特型多克隆抗体的鉴定第29页
     ·免疫组化试验第29页
     ·Western blot 分析第29-30页
     ·质谱分析第30页
   ·结果第30-32页
     ·兔anti-Id 的鉴定第30页
     ·PBMC 上存在一个54 kDa 的候选受体蛋白第30-31页
     ·p54 在猪只不同组织中的分布第31-32页
     ·p54 的质谱测序第32页
   ·讨论第32-34页
第三章 CD46 分子作为猪瘟病毒候选细胞受体的验证第34-48页
   ·材料与方法第34-38页
     ·病毒、细胞和质粒第34页
     ·主要试剂第34页
     ·CD46 基因的PCR 扩增与克隆第34-35页
     ·CD46 基因在大肠杆菌中的表达与鉴定第35页
     ·抗CD46 多克隆血清的制备与抗体效价检测第35页
     ·真核表达重组质粒的构建及鉴定第35页
     ·重组质粒的转染第35-36页
     ·CD46 蛋白在哺乳细胞BHK-21 中的表达与鉴定第36页
     ·抗体抑制试验第36-37页
     ·病毒感染试验第37页
     ·激光共聚焦试验第37页
     ·免疫共沉淀试验第37页
     ·p54 与CD46 二者之间关系的鉴定第37-38页
   ·结果第38-46页
     ·目的片段的获得第38页
     ·重组质粒p32a-CD46 与pcDNA-CD46 的获得及酶切鉴定第38-39页
     ·CD46 在大肠杆菌中的表达第39-40页
     ·CD46 在BHK-21 中的表达第40-42页
     ·兔抗CD46 血清对猪瘟病毒感染PK15 细胞的抑制作用第42-43页
     ·CD46 分子在猪瘟病毒感染宿主细胞中的功能第43-45页
     ·CD46 分子与 E2 蛋白之间相互作用第45页
     ·p54 与 CD46 二者之间的关系第45-46页
   ·讨论第46-48页
第四章 结论第48-51页
参考文献第51-56页
致谢第56-57页
作者简历第57页

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