摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-14页 |
引言 | 第14-18页 |
第一部分 幽门螺杆菌ureB基因乳酸菌原核表达载体的构建 | 第18-45页 |
材料与方法 | 第18-33页 |
·实验材料 | 第18-24页 |
·实验方法 | 第24-33页 |
结果 | 第33-39页 |
·幽门螺杆菌ureB基因获取 | 第33-35页 |
·乳酸乳球菌表达载体pNZ8149酶切结果 | 第35页 |
·阳性克隆子NZ3900/pNZ8149-ureB的筛选鉴定 | 第35-39页 |
讨论 | 第39-44页 |
1 抗原基因的选择 | 第39-40页 |
2 原核表达系统的选择 | 第40-43页 |
3 目的蛋白对宿主菌生长的影响 | 第43-44页 |
小结 | 第44-45页 |
第二部分 幽门螺杆菌ureB基因乳球菌食品级表达系统中表达条件的优化 | 第45-61页 |
材料与方法 | 第45-53页 |
·实验材料 | 第45-48页 |
·实验方法 | 第48-53页 |
结果 | 第53-57页 |
1. Brandford法蛋白标准曲线 | 第53-54页 |
2. NZ3900/pNZ8149-ureB和对照NZ3900、NZ3900/pNZ8149-ureB诱导产物SDS-PAGE电泳结果 | 第54-55页 |
3. NZ3900/pNZ8149-ureB各样品诱导表达UreB蛋白占总蛋白的比例及浓度 | 第55-56页 |
4. 方差分析结果及表达条件优化分析 | 第56-57页 |
5. 根据优化条件表达目的蛋白SDS-PAGE电泳结果 | 第57页 |
讨论 | 第57-60页 |
小结 | 第60-61页 |
第三部分 乳酸乳球菌NZ3900表达UreB蛋白的鉴定和免疫反应性研究 | 第61-77页 |
材料与方法 | 第61-68页 |
·实验材料 | 第61-64页 |
·实验方法 | 第64-68页 |
结果 | 第68-70页 |
1. 工程菌TB_1/pMAL-C_2X-UreB诱导表达产物SDS-PAGE电泳 | 第68-69页 |
2. Bradford法测定目的蛋白含量 | 第69页 |
3. ELISA法测定小鼠血清抗体 | 第69页 |
4. 乳酸菌NZ3900表达UreB蛋白免疫反应性鉴定结果 | 第69-70页 |
讨论 | 第70-72页 |
小结 | 第72-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-77页 |
综述 乳酸菌作为外源蛋白表达载体的研究进展 | 第77-88页 |
1. 乳酸菌的生理功能 | 第77-78页 |
2. 乳酸菌与粘膜免疫系统 | 第78-80页 |
3. 乳酸菌作为黏膜免疫疫苗的活菌载体 | 第80-81页 |
4. 乳酸菌食品级表达载体 | 第81-82页 |
5. 研究的热点和展望 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-88页 |
个人简历 | 第88页 |
在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |