| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-28页 |
| ·海藻糖 | 第14-23页 |
| ·海藻糖的理化性质 | 第14-15页 |
| ·海藻糖的生物合成途径 | 第15-18页 |
| ·海藻糖的功能 | 第18-19页 |
| ·海藻糖保护生物体的机理 | 第19-21页 |
| ·高等植物海藻糖-6-磷酸合成酶基因的研究进展 | 第21-22页 |
| ·海藻糖合成相关基因转化高等植物的研究进展 | 第22-23页 |
| ·可变剪接 | 第23-27页 |
| ·研究可变剪接的方法 | 第23-24页 |
| ·可变剪接的方式 | 第24页 |
| ·剪接位点识别的机制 | 第24-26页 |
| ·植物中的可变剪接 | 第26-27页 |
| ·逆境下植物基因的可变剪接 | 第27页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-45页 |
| ·玉米海藻糖-6-磷酸合成酶基因家族的克隆 | 第28-34页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·主要药品和试剂 | 第28页 |
| ·TPS基因家族序列的生物信息学分析 | 第28页 |
| ·总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第29-30页 |
| ·开放阅读框的PCR扩增 | 第30-31页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第31-32页 |
| ·目的片段与克隆载体的连接 | 第32页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第32页 |
| ·质粒DNA的转化(热击法) | 第32页 |
| ·重组菌落的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·质粒提取 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆的测序以及测序结果的生物信息学分析 | 第34页 |
| ·玉米海藻糖-6-磷酸合成酶基因家族的功能验证 | 第34-39页 |
| ·酵母表达载体载体与酵母菌株 | 第34页 |
| ·主要试剂及配制 | 第34页 |
| ·玉米TPS基因酵母表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·酵母感受态细胞的转化 | 第37页 |
| ·酵母质粒提取 | 第37-38页 |
| ·酵母转化子的PCR检测 | 第38页 |
| ·玉米TPS基因家族功能的初步验证 | 第38-39页 |
| ·玉米TPS基因编码蛋白功能的验证 | 第39页 |
| ·玉米TPS基因编码蛋白的保守结构域分析 | 第39页 |
| ·玉米海藻糖-6-磷酸合成酶基因家族在逆境下的表达研究 | 第39-42页 |
| ·玉米幼苗的逆境胁迫处理与cDNA样品制备 | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·RT-PCR分析基因表达 | 第40-41页 |
| ·qRT-PCR分析基因表达 | 第41-42页 |
| ·玉米TPS1基因的可变剪接研究 | 第42-45页 |
| ·TPS1基因可变剪接体开放阅读框的克隆 | 第42页 |
| ·TPS1基因基因组DNA序列的克隆 | 第42-44页 |
| ·TPS1基因选择性剪的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-95页 |
| ·玉米的TPS基因家族 | 第45-60页 |
| ·玉米TPS基因家族生物信息学预测结果 | 第45-48页 |
| ·总RNA质量 | 第48页 |
| ·9个TPS基因ORF扩增片段长度 | 第48-49页 |
| ·9个TPS基因的碱基序列及推导氨基酸序列 | 第49-60页 |
| ·9个TPS基因的功能 | 第60-72页 |
| ·TPS基因酵母表达载体的PCR扩增结果 | 第60-61页 |
| ·TPS基因的海藻糖-6-磷酸合成酶的活性 | 第61-63页 |
| ·TPS基因的海藻糖-6-磷酸磷酸酶的活性 | 第63-66页 |
| ·TPS基因编码蛋白的保守结构域 | 第66-72页 |
| ·玉米TPS基因在逆境胁迫下的差异表达 | 第72-83页 |
| ·RNA质量 | 第72-73页 |
| ·RT-PCR检测的TPS1基因在盐胁迫和低温胁迫下的表达模式 | 第73-74页 |
| ·看家基因和TPS基因引物的特异性 | 第74-75页 |
| ·看家基因和TPS基因的标准曲线 | 第75-77页 |
| ·qRT-PCR检测9个TPS基因在胁迫下的表达模式 | 第77-83页 |
| ·TPS1基因的可变剪接 | 第83-95页 |
| ·TPS1基因可变剪接体碱基序列及其编码的蛋白 | 第83-90页 |
| ·玉米TPS1基因可变剪接模式 | 第90-95页 |
| 4 讨论 | 第95-106页 |
| ·玉米的TPS基因家族 | 第95-98页 |
| ·TPS基因在盐胁迫和低温胁迫下的差异表达 | 第98-99页 |
| ·TPS1基因的可变剪接 | 第99-100页 |
| ·高等植物的TPS基因家族 | 第100-102页 |
| ·海藻糖和海藻糖-6-磷酸在高等植物中可能起着不同的作用 | 第102-106页 |
| 5 今后的研究方向 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 附录 | 第120-123页 |
| 攻读学位期间发表和拟发表的学术论文 | 第123页 |
