水稻矮秆基因d62和光叶基因gl1的图位克隆及功能研究
| 致谢 | 第1-9页 |
| 术语表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-16页 |
| 2 文献综述 | 第16-38页 |
| ·植物矮化的意义及其与GA的关系 | 第16-17页 |
| ·植物GA的生物合成与代谢 | 第17-24页 |
| ·GA生物合成的基本过程 | 第17-19页 |
| ·GA合成代谢的关键酶与基因 | 第19-21页 |
| ·GA缺陷型突变体 | 第21-23页 |
| ·GA合成代谢的调控 | 第23-24页 |
| ·植物GA的信号传导 | 第24-29页 |
| ·GA信号传导的主要元件 | 第24-28页 |
| ·GA信号传导的分子模型 | 第28-29页 |
| ·GA信号的调控网络 | 第29页 |
| ·水稻光叶及其与表皮毛的关系 | 第29-31页 |
| ·表皮毛的发育及其调控 | 第31-38页 |
| ·表皮毛的发育进程 | 第31-32页 |
| ·表皮毛发育的关键基因及其作用机制 | 第32-34页 |
| ·表皮毛的发育起始及细胞命运决定 | 第34-35页 |
| ·表皮毛的形态建成 | 第35-38页 |
| 3 材料与方法 | 第38-54页 |
| ·水稻材料 | 第38页 |
| ·扫描电镜观察 | 第38-39页 |
| ·生理学分析方法 | 第39-40页 |
| ·GA诱导α-淀粉酶活性检测 | 第39页 |
| ·GA诱导茎伸长测定 | 第39页 |
| ·内源GA含量的ELISA测定 | 第39-40页 |
| ·基因图位克隆程序 | 第40-43页 |
| ·DNA提取方法 | 第40页 |
| ·SSR分析方法 | 第40页 |
| ·基因定位方法 | 第40-41页 |
| ·连锁分析 | 第40-41页 |
| ·基因定位及数据分析 | 第41页 |
| ·InDel标记开发 | 第41页 |
| ·侯选基因预测及测序方法 | 第41-43页 |
| ·RT-PCR及Real-time qPCR程序 | 第43-45页 |
| ·总RNA提取方法 | 第43页 |
| ·RNA的逆转录程序 | 第43页 |
| ·半定量RT-PCR方法 | 第43-45页 |
| ·Real-time qPCR方法 | 第45页 |
| ·转基因实验程序 | 第45-53页 |
| ·D62基因启动子分析方法 | 第45-47页 |
| ·启动子融合GUS载体的构建 | 第45-47页 |
| ·GUS染色及观察 | 第47页 |
| ·D62基因功能互补实验程序 | 第47-49页 |
| ·功能互补载体的构建 | 第47-48页 |
| ·遗传转化及转基因植株检测 | 第48-49页 |
| ·D62基因的亚细胞定位方法 | 第49-50页 |
| ·D62基因融合GFP载体的构建 | 第49页 |
| ·D62的瞬时表达及GFP荧光的观察 | 第49-50页 |
| ·D62基因RNA干扰载体的构建 | 第50-51页 |
| ·水稻转基因操作程序 | 第51-53页 |
| ·生物信息学分析方法 | 第53-54页 |
| ·RNA二级结构预测 | 第53页 |
| ·蛋白多序列比对与进化分析 | 第53页 |
| ·序列登陆号 | 第53-54页 |
| 4 结果与分析 | 第54-84页 |
| ·d62突变体的形态学特征 | 第54-55页 |
| ·d62突变体对GA的反应及内源GA含量 | 第55-58页 |
| ·GA诱导的α-淀粉酶活性 | 第55页 |
| ·GA诱导的茎伸长 | 第55-56页 |
| ·d62突变体内源GA含量 | 第56-58页 |
| ·D62基因的图位克隆 | 第58-67页 |
| ·遗传分析 | 第58页 |
| ·d62基因的染色体定位 | 第58-59页 |
| ·d62基因的初定位 | 第59-60页 |
| ·d62基因的精细定位 | 第60-61页 |
| ·侯选基因的注解与分析 | 第61-63页 |
| ·d62基因突变位点的确定 | 第63页 |
| ·D62基因序列及结构特征 | 第63-65页 |
| ·D62基因功能互补验证 | 第65-67页 |
| ·D62蛋白序列与进化分析 | 第67-70页 |
| ·D62蛋白与GRAS家族成员的多序列比对 | 第67-69页 |
| ·D62蛋白在GRAS家族中的系统进化分析 | 第69-70页 |
| ·D62基因的表达模式分析 | 第70-71页 |
| ·半定量RT-PCR分析D62基因的组织表达 | 第70页 |
| ·D62基因启动子驱动GUS基因的表达 | 第70-71页 |
| ·GA代谢相关基因的表达分析 | 第71-74页 |
| ·RT-PCR分析 | 第71-73页 |
| ·Real-time qPCR分析 | 第73-74页 |
| ·gl1突变体的形态学特征 | 第74-75页 |
| ·gl1突变体的表型 | 第74-75页 |
| ·gl1突变体叶片的扫描电镜观察 | 第75页 |
| ·GL1基因的图位克隆 | 第75-81页 |
| ·gl1基因的遗传分析 | 第75-76页 |
| ·gl1基因的初定位 | 第76-77页 |
| ·gl1基因的精细定位 | 第77-79页 |
| ·候选基因预测及突变位点分析 | 第79-81页 |
| ·GL1基因的表达分析及mRNA二级结构 | 第81-84页 |
| ·GL1基因的表达特征 | 第81页 |
| ·GL1基因的mRNA二级结构 | 第81-84页 |
| 5 讨论 | 第84-91页 |
| ·D62基因 | 第84-87页 |
| ·D62基因编码GRAS蛋白 | 第85页 |
| ·D62基因调控GA代谢途径 | 第85-86页 |
| ·D62基因影响植株生长发育的多个性状 | 第86-87页 |
| ·GL1基因 | 第87-91页 |
| ·gl1突变导致表皮毛缺失 | 第88-89页 |
| ·gl1基因的定位 | 第89页 |
| ·gl1基因的突变位点 | 第89-91页 |
| 6 研究展望 | 第91-93页 |
| ·D62基因的研究展望 | 第91-92页 |
| ·GL1基因的研究展望 | 第92-93页 |
| 7 参考文献 | 第93-108页 |
| 附录Ⅰ:与博士论文研究有关的论文 | 第108-109页 |
| 附录Ⅱ:作者简介 | 第109页 |
