| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 绪论 | 第11-15页 |
| 1.1 研究恶性黑色素瘤的必要性 | 第11页 |
| 1.2 目前的治疗方法 | 第11-12页 |
| 1.2.1 手术切除 | 第11-12页 |
| 1.2.2 淋巴结清扫 | 第12页 |
| 1.2.3 放疗 | 第12页 |
| 1.2.4 化疗 | 第12页 |
| 1.3 靶向治疗 | 第12-15页 |
| 1.3.1 嵌合抗原受体修饰的T细胞(CAR-T)及相关作用靶点 | 第12-14页 |
| 1.3.2 外泌体 | 第14页 |
| 1.3.3 Toll样受体激动剂 | 第14-15页 |
| 1.3.4 干扰素 | 第15页 |
| 1.3.5 佐剂免疫治疗 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-26页 |
| 2.1 主要实验材料与主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第16页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第16-17页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第17页 |
| 2.3 构建iRGD-Lamp2b质粒 | 第17-18页 |
| 2.3.1 配置转染试剂 | 第17页 |
| 2.3.2 293T细胞转染 | 第17-18页 |
| 2.3.3 提取外泌体 | 第18页 |
| 2.4 药物装载 | 第18-19页 |
| 2.4.1 阿霉素(Dox)的稀释 | 第18页 |
| 2.4.2 电穿孔 | 第18-19页 |
| 2.5 Lamp2b-iRGD的 RT-PCR检测 | 第19-23页 |
| 2.5.1 样品RNA的抽提 | 第19-20页 |
| 2.5.2 RNA质量检测 | 第20-21页 |
| 2.5.3 样品c DNA合成 | 第21-22页 |
| 2.5.4 待测样品iRGD和管家基因(GAPDH)PCR | 第22-23页 |
| 2.6 A375 细胞的培养和染色 | 第23-24页 |
| 2.6.1 A375 细胞的培养 | 第23页 |
| 2.6.2 A375 细胞的传代与冻存 | 第23-24页 |
| 2.6.3 荧光染剂Dio的稀释 | 第24页 |
| 2.6.4 A375 细胞染色 | 第24页 |
| 2.7 染色A375 细胞与外泌体结合 | 第24-25页 |
| 2.8 流式细胞仪检测与细胞增殖检测 | 第25-26页 |
| 2.8.1 流式细胞仪检测 | 第25页 |
| 2.8.2 细胞增殖计数 | 第25-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-31页 |
| 3.1 RT-PCR检测iRGD-LAMP2b的蛋白表达 | 第26-27页 |
| 3.2 Blank-Exo-Dox和 iRGD-Exo-Dox与染色A375 细胞的结合 | 第27-29页 |
| 3.3 A375 细胞增殖曲线 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-35页 |
| 4.1 恶性黑色素瘤传统治疗方法及其局限性 | 第32页 |
| 4.2 外泌体的优势及应用 | 第32-33页 |
| 4.3 iRGD-外泌体-阿霉素对A375 的增殖抑制 | 第33-34页 |
| 4.4 iRGD-外泌体治疗恶性黑色素瘤的应用前景 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35页 |
| 6 展望 | 第35-36页 |
| 7 参考文献 | 第36-40页 |
| 8 致谢 | 第40-42页 |
| 9 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第42-44页 |
