| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 引言 | 第14页 |
| 1.1 绵羊肥尾的形成及分类 | 第14-15页 |
| 1.2 脂肪组织分类 | 第15页 |
| 1.3 脂肪细胞分化过程 | 第15-16页 |
| 1.4 调节脂肪细胞分化的转录因子 | 第16-19页 |
| 1.4.1 PPARγ | 第17页 |
| 1.4.2 C/EBPα | 第17页 |
| 1.4.3 SREBPs | 第17-18页 |
| 1.4.4 KLFs | 第18页 |
| 1.4.5 AP-1 | 第18页 |
| 1.4.6 LPL | 第18-19页 |
| 1.5 BMP2和PDGF-D基因的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.5.1 BMP2 基因研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5.2 PDGF-D基因研究进展 | 第20-22页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 绵羊BMP2和PDGF-D基因多态性与尾型的关联 | 第23-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂和使用设备 | 第23页 |
| 2.1.3 主要使用软件 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 绵羊的尾型性状数据收集 | 第23-24页 |
| 2.2.2 绵羊血液基因组DNA提取 | 第24页 |
| 2.2.3 引物设计及合成 | 第24-25页 |
| 2.2.4 DNA混合池构建及PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.5 位点筛选 | 第26页 |
| 2.2.6 飞行质谱基因分型 | 第26页 |
| 2.2.7 数据处理统计 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 DNA提取及PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.3.2 绵羊BMP2 基因多态位点筛选 | 第28页 |
| 2.3.3 绵羊BMP2 基因质谱分型结果 | 第28-29页 |
| 2.3.4 绵羊BMP2 基因群体遗传参数分析 | 第29页 |
| 2.3.5 绵羊BMP2 基因多态性与尾型关联 | 第29-30页 |
| 2.3.6 BMP2 突变位点连锁不平衡分析 | 第30页 |
| 2.3.7 BMP2 基因组合基因型与尾型关联分析 | 第30-31页 |
| 2.3.8 绵羊PDGF-D基因多态位点筛选 | 第31页 |
| 2.3.9 绵羊PDGF-D基因质谱分型结果 | 第31-32页 |
| 2.3.10 绵羊PDGF-D基因群体遗传参数分析 | 第32-33页 |
| 2.3.11 绵羊PDGF-D基因多态性与尾型关联分析 | 第33页 |
| 2.3.12 转录因子结合位点预测 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 2.4.1 群体遗传特征分析 | 第34-35页 |
| 2.4.2 多态性与尾型性状的关联分析 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 绵羊BMP2和PDGF-D基因细胞水平功能验证 | 第37-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 绵羊前体脂肪细胞 | 第37页 |
| 3.1.2 主要使用仪器 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试验试剂 | 第37-38页 |
| 3.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.1 原代前体脂肪细胞分离(胶原酶消化法) | 第38页 |
| 3.2.2 前体脂肪细胞的复苏、传代及冻存 | 第38页 |
| 3.2.3 前体脂肪细胞的诱导分化 | 第38页 |
| 3.2.4 前体脂肪细胞的转染 | 第38页 |
| 3.2.5 BMP2和PDGF-D基因功能研究 | 第38-39页 |
| 3.2.6 总RNA的提取及质量检测 | 第39页 |
| 3.2.7 cDNA的合成 | 第39页 |
| 3.2.8 荧光定量PCR | 第39-40页 |
| 3.2.9 油红O染色 | 第40页 |
| 3.2.10 总蛋白的提取、浓度检测及变性 | 第40页 |
| 3.2.11 绵羊脂肪细胞中相关蛋白的Western Blot检测 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-44页 |
| 3.3.1 绵羊前体脂肪细胞培养及形态学观察 | 第41页 |
| 3.3.2 慢病毒转染效率检测 | 第41-42页 |
| 3.3.3 BMP2、PDGF-D、PPARγ、LPL基因mRNA的表达分析 | 第42-43页 |
| 3.3.4 BMP2、PDGF-D、PPARγ蛋白表达分析 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-46页 |
| 3.4.1 绵羊前体脂肪细胞的分离培养与诱导分化 | 第44-45页 |
| 3.4.2 BMP2和PDGF-D基因对绵羊前体脂肪细胞分化的影响 | 第45-46页 |
| 3.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 全文结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-61页 |
| 附录 | 第61-64页 |
| 1.胶原酶消化法分离原代细胞 | 第61页 |
| 2.细胞复苏 | 第61页 |
| 3.细胞传代 | 第61页 |
| 4.细胞冻存 | 第61-62页 |
| 5.诱导分化 | 第62页 |
| 6.慢病毒转染 | 第62页 |
| 7.Trizol法提取RNA | 第62页 |
| 8.油红O染色 | 第62-63页 |
| 9.蛋白提取、浓度检测和变性 | 第63页 |
| 10.Western Blot | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
