| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第15-23页 |
| 1.1 犬乳腺肿概述 | 第15-17页 |
| 1.1.1 犬乳腺肿瘤概况 | 第15页 |
| 1.1.2 犬乳腺肿瘤的临床治疗现状 | 第15-16页 |
| 1.1.3 犬乳腺肿瘤的研究进展及前景 | 第16页 |
| 1.1.4 犬乳腺肿瘤研究意义 | 第16页 |
| 1.1.5 犬乳腺肿瘤细胞的分离鉴定 | 第16-17页 |
| 1.2 青蒿素概述 | 第17-20页 |
| 1.2.1 青蒿素理化性质 | 第17页 |
| 1.2.2 青蒿素的生物学活性 | 第17页 |
| 1.2.3 青蒿素的抗肿瘤机制 | 第17-20页 |
| 1.3 血管生成与Notch1信号通路 | 第20-21页 |
| 1.4 本试验的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-31页 |
| 2.1 试验动物及细胞系 | 第23页 |
| 2.2 试验药品及试剂 | 第23页 |
| 2.3 主要仪器设备及耗材 | 第23-24页 |
| 2.4 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.4.1 青蒿素油悬液的配制 | 第24页 |
| 2.4.2 细胞培养液的配制 | 第24页 |
| 2.4.3 细胞冻存液的配制 | 第24-25页 |
| 2.5 细胞的复苏、培养、传代、冻存 | 第25页 |
| 2.5.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 2.5.2 细胞培养 | 第25页 |
| 2.5.3 细胞传代 | 第25页 |
| 2.5.4 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.6 CHMm小鼠移植瘤模型的建立及实验分组 | 第25-26页 |
| 2.6.1 CHMm小鼠移植瘤模型的建立 | 第25-26页 |
| 2.6.2 给药方法、剂量、时间及观察指标 | 第26页 |
| 2.6.3 收集肿瘤样品及血清 | 第26页 |
| 2.7 肿瘤组织病理切片及微血管密度测定 | 第26页 |
| 2.7.1 石蜡切片制作 | 第26页 |
| 2.7.2 HE染色及观片 | 第26页 |
| 2.7.3免疫组化标记肿瘤组织CD31 | 第26页 |
| 2.7.4 肿瘤微血管密度(mvd) | 第26页 |
| 2.8 ELISA法检测血管生成相关因子 | 第26-27页 |
| 2.9 实时荧光定量PCR | 第27-30页 |
| 2.9.1 移植瘤组织RNA提取 | 第27页 |
| 2.9.2 移植瘤组织RNA的检测 | 第27页 |
| 2.9.3 测定RNA是否可用 | 第27页 |
| 2.9.4 移植瘤组织总RNA反转录 | 第27-28页 |
| 2.9.5 引物的设计与检测 | 第28-29页 |
| 2.9.6 qPCR反应 | 第29-30页 |
| 2.9.7 结果计算 | 第30页 |
| 2.10 数据的统计与分析 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.1 各组裸鼠生长状况 | 第31页 |
| 3.2 各组裸鼠体质量变化 | 第31-32页 |
| 3.3 青蒿素对移植瘤的抑制作用 | 第32-34页 |
| 3.3.1 裸鼠移植瘤体积 | 第32-33页 |
| 3.3.2 裸鼠移植瘤质量及抑制率 | 第33-34页 |
| 3.4 移植瘤组织肉眼及镜下病理观察 | 第34-35页 |
| 3.5 裸鼠移植瘤微血管密度测定 | 第35-36页 |
| 3.6 裸鼠血清中VEGF含量测定 | 第36-37页 |
| 3.7 裸鼠血清中HIF-1α含量测定 | 第37-38页 |
| 3.8 qpcr测定目的基因表达量 | 第38-40页 |
| 3.8.1 目的基因Notch1相对表达量 | 第38-39页 |
| 3.8.2 目的基因DLL4相对表达量 | 第39页 |
| 3.8.3 目的基因Jagged1相对表达量 | 第39-40页 |
| 4.讨论 | 第40-44页 |
| 4.1 犬乳腺肿瘤细胞系CHMm裸鼠移植瘤模型的应用及建立方法 | 第40页 |
| 4.2 不同用药组对CHMm细胞裸鼠移植瘤的抑制作用 | 第40-41页 |
| 4.3 不同用药组对裸鼠体质量的影响 | 第41-42页 |
| 4.4 青蒿素与抗血管生成相关因子 | 第42页 |
| 4.5 青蒿素对Notch1信号通路的作用 | 第42-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 主要英文缩略语 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |