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僵蚕药材商品规格等级标准及ACE抑制肽的研究

摘要第4-6页
abstract第6-8页
缩略词英汉注释表第9-15页
第一章 绪论第15-25页
    1.1 僵蚕研究进展第15-18页
        1.1.1 僵蚕的基原第15-16页
        1.1.2 僵蚕的药理作用第16-18页
        1.1.3 僵蚕的临床疗效第18页
    1.2 僵蚕有效活性成分研究进展第18-20页
        1.2.1 蛋白质第18-19页
        1.2.2 核苷、碱基类第19页
        1.2.3 草酸铵第19页
        1.2.4 氨基酸及微量元素第19页
        1.2.5 白僵菌素第19-20页
    1.3 僵蚕源功能肽第20-21页
        1.3.1 ACE抑制肽第20-21页
        1.3.2 抗菌蛋白和抗菌肽第21页
        1.3.3 家蚕瘫痪肽第21页
    1.4 ACE抑制肽的制备第21-23页
        1.4.1 合成法制备ACE抑制肽第21-22页
        1.4.2 酶解法制备ACE抑制肽第22-23页
        1.4.3 辅助酶法制备ACE抑制肽第23页
    1.5 本课题的立项背景和意义第23-24页
    1.6 本论文主要研究内容第24-25页
第二章 僵蚕药材商品规格等级标准的研制第25-39页
    2.1 主要仪器与材料第25页
        2.1.1 主要仪器设备第25页
        2.1.2 主要材料第25页
    2.2 实验方法第25-26页
        2.2.1 文献沿革第25-26页
        2.2.2 形态指标测定及统计分析第26页
        2.2.3 数据处理与分析第26页
    2.3 结果与讨论第26-38页
        2.3.1 文献沿革第26-31页
            2.3.1.1 基原变迁第26-28页
            2.3.1.2 产地变迁第28-29页
            2.3.1.3 规格修治第29-31页
        2.3.2 僵蚕市场调查结果第31-34页
            2.3.2.1 僵蚕形态参数分析第31-33页
            2.3.2.2 僵蚕断面相关性分析第33-34页
        2.3.3 僵蚕产地调查结果第34-36页
        2.3.4 僵蚕药材标准草案制定第36-38页
    2.4 本章小结第38-39页
第三章 不同等级僵蚕化学成分分析第39-54页
    3.1 主要仪器与材料第39-41页
        3.1.1 主要仪器设备第39-40页
        3.1.2 主要材料第40-41页
        3.1.3 主要试剂配制第41页
    3.2 实验方法第41-44页
        3.2.1 僵蚕样品准备第41页
        3.2.2 草酸铵含量测定第41-42页
        3.2.3 白僵菌素含量测定第42页
        3.2.4 氨基酸含量测定第42页
        3.2.5 蛋白质提取第42页
        3.2.6 蛋白质分部盐析第42-43页
        3.2.7 TCA/丙酮法沉淀蛋白第43页
        3.2.8 蛋白质电泳(Tricine-SDS-PAGE)及凝胶分析第43页
        3.2.9 反向高效液相色谱(RP-HPLC)分析第43页
        3.2.10 傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析第43-44页
        3.2.11 数据统计及分析第44页
    3.3 结果与分析第44-53页
        3.3.1 僵蚕草酸铵含量测定第44页
        3.3.2 僵蚕白僵菌素含量测定第44-45页
        3.3.3 僵蚕氨基酸含量分布第45-46页
        3.3.4 僵蚕蛋白质Tricine-SDS-PAGE分析第46-48页
        3.3.5 僵蚕蛋白质HPLC分析第48-51页
        3.3.6 僵蚕蛋白质FTIR分析第51-53页
    3.4 本章小结第53-54页
第四章 僵蚕ACE抑制肽的研究第54-72页
    4.1 主要仪器与材料第54-55页
        4.1.1 主要仪器设备第54页
        4.1.2 主要试剂第54-55页
        4.1.3 主要溶液配制第55页
    4.2 实验方法第55-59页
        4.2.1 僵蚕蛋白质提取第55页
        4.2.2 僵蚕蛋白酶解物的制备第55-56页
        4.2.3 ACE的制备及酶活测定第56-57页
        4.2.4 Bradford法定蛋白质含量第57页
        4.2.5 ACE体外抑制活性的测定第57页
        4.2.6 马尿酸(HA)HPLC测定方法的建立第57-58页
            4.2.6.1 HA标准溶液的配制第57页
            4.2.6.2 精密度第57页
            4.2.6.3 加样回收率第57-58页
            4.2.6.4 色谱条件第58页
        4.2.7 响应面法设计第58页
        4.2.8 蛋白质电泳(Tricine-SDS-PAGE)及凝胶分析第58页
        4.2.9 ACE抑制肽的制备第58-59页
        4.2.10 反向高效液相色谱(RP-HPLC)分析第59页
        4.2.11 傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析第59页
        4.2.12 数据统计及分析第59页
    4.3 结果与分析第59-71页
        4.3.1 蛋白质的标准曲线第59-60页
        4.3.2 色谱行为第60-62页
            4.3.2.1 标准曲线与检测限第61页
            4.3.2.2 HA精密度实验第61页
            4.3.2.3 HA加样回收率试验第61-62页
        4.3.3 单因素分析第62-64页
            4.3.3.1 酶解时间对ACE抑制率的影响第62-63页
            4.3.3.2 酶底比([E]/[S])对ACE抑制率的影响第63页
            4.3.3.3 pH对ACE抑制率的影响第63-64页
        4.3.4 响应面法条件优化第64-67页
        4.3.5 验证试验第67-68页
        4.3.6 酶解样品的Tricine-SDS-PAGE分析第68页
        4.3.7 酶解样品的FTIR分析第68-69页
        4.3.8 ACE抑制肽的FTIR分析第69-70页
        4.3.9 ACE抑制肽的HPLC分析第70-71页
    4.4 本章小结第71-72页
第五章 结论与展望第72-74页
    5.1 结论第72-73页
    5.2 本课题创新点第73页
    5.3 工作展望第73-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
攻读硕士学位期间发表论文第82-83页
附录一 僵蚕商品规格标准草案第83-88页
附录二 四个市场市售僵蚕形态指标数据表第88-102页
附录三 四个产区僵蚕形态指标数据表第102-105页

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