| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第19-31页 |
| 1.1 昆虫触角感器和化学感受机制 | 第19-21页 |
| 1.2 产卵器的化学感受基因功能研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 昆虫化学感受基因的研究进展 | 第22-26页 |
| 1.3.1 气味结合蛋白(Odorant binding proteins,OBPs)的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.3.2 化学感受系统中其他主要的化学感受基因 | 第23-26页 |
| 1.4 气味降解酶(ODEs) | 第26-28页 |
| 1.4.1 羧酸酯酶(Carboxylesterases, CXEs) | 第26-27页 |
| 1.4.2 谷胱甘肽S转移酶(Glutathione S transferases,GSTs) | 第27-28页 |
| 1.5 研究对象 | 第28页 |
| 1.6 研究目的和主要内容 | 第28-31页 |
| 1.6.1 研究目的和意义 | 第28-29页 |
| 1.6.2 研究内容和技术路线 | 第29-31页 |
| 第2章 斑痣悬茧蜂触角化学感受基因及气味降解酶基因的鉴定、序列分析及表达谱 | 第31-81页 |
| 2.1 斑痣悬茧蜂触角化学感受基因的鉴定和同源性分析 | 第31-38页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂和设备 | 第31-32页 |
| 2.1.3 总RNA的提取 | 第32页 |
| 2.1.4 触角cDNA文库的构建和Illumina测序 | 第32-33页 |
| 2.1.5 触角序列的组装和功能注释 | 第33页 |
| 2.1.6 斑痣悬茧蜂化学感受基因及气味降解酶基因的鉴定 | 第33页 |
| 2.1.7 触角化学感受基因及气味降解酶基因的序列比对和系统进化树分析 | 第33页 |
| 2.1.8 触角MpulOBPs,MpulGRs,MpulCXEs和MpulGSTs的组织表达谱分析 | 第33-38页 |
| 2.1.9 数据分析 | 第38页 |
| 2.2 结果 | 第38-75页 |
| 2.2.1 Illumina测序和转录组组装 | 第38-39页 |
| 2.2.2 触角unigenes的GO和KOG分类 | 第39页 |
| 2.2.3 触角气味结合蛋白(OBPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第39页 |
| 2.2.4 触角化学感受蛋白(CSPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第39-40页 |
| 2.2.5 触角化学感受受体的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第40-41页 |
| 2.2.6 触角感受神经元膜蛋白(SNMPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第41页 |
| 2.2.7 触角羧酸酯酶(CXEs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第41页 |
| 2.2.8 触角谷胱甘肽S转移酶(GSTs)的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第41-42页 |
| 2.2.9 触角MpulOBPs相对表达量分析 | 第42页 |
| 2.2.10 触角MpulGRs组织表达谱分析 | 第42页 |
| 2.2.11 触角MpulCXEs和MpulGSTs的组织表达谱分析 | 第42-75页 |
| 2.3 讨论 | 第75-80页 |
| 2.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第3章 斑痣悬茧蜂产卵器感器观测和化学感受基因的鉴定 | 第81-111页 |
| 3.1 材料和方法 | 第81页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第81页 |
| 3.1.2 主要试剂和设备 | 第81页 |
| 3.2 斑痣悬茧蜂产卵器形态和感器结构的观察 | 第81-82页 |
| 3.3 斑痣悬茧蜂产卵器化学感受基因的鉴定和序列分析 | 第82-84页 |
| 3.3.1 组织总RNA提取 | 第82页 |
| 3.3.2 产卵器cDNA文库的构建和Illumina测序 | 第82页 |
| 3.3.3 产卵器序列组装和功能注释 | 第82页 |
| 3.3.4 产卵器化学感受基因的鉴定 | 第82页 |
| 3.3.5 产卵器化学感受基因的同源性比对和系统进化分析 | 第82页 |
| 3.3.6 产卵器气味结合蛋白(OBPs)基因的组织表达谱分析 | 第82-84页 |
| 3.4 结果 | 第84-107页 |
| 3.4.1 产卵器的基本结构 | 第84页 |
| 3.4.2 产卵器Illumina测序和unigenes序列组装 | 第84页 |
| 3.4.3 产卵器unigenes功能注释 | 第84-85页 |
| 3.4.4 产卵器气味结合蛋白(OBPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第85页 |
| 3.4.5 产卵器化学感受蛋白(CSPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第85页 |
| 3.4.6 产卵器气味受体(ORs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第85-86页 |
| 3.4.7 产卵器离子受体(IRs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第86页 |
| 3.4.8 产卵器味觉受体(GRs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第86页 |
| 3.4.9 产卵器感觉神经元膜蛋白(SNMPs)基因的鉴定、序列特征及进化树分析 | 第86页 |
| 3.4.10 产卵器气味结合蛋白(OBPs)基因的组织表达谱分析 | 第86-107页 |
| 3.5 讨论 | 第107-109页 |
| 3.6 本章小结 | 第109-111页 |
| 第4章 MpulOBP9的原核表达及蛋白纯化 | 第111-121页 |
| 4.1 主要试剂和设备 | 第111页 |
| 4.2 MpulOBP9的体外表达和蛋白纯化 | 第111-114页 |
| 4.2.1 组织RNA提取和cDNA第一条链合成 | 第111-112页 |
| 4.2.2 引物设计和PCR扩增 | 第112-113页 |
| 4.2.3 重组表达载体的构建 | 第113页 |
| 4.2.4 重组质粒的转化和表达 | 第113-114页 |
| 4.2.5 重组蛋白的纯化和肠激酶酶切 | 第114页 |
| 4.3 结果 | 第114-120页 |
| 4.3.1 重组质粒的鉴定 | 第114页 |
| 4.3.2 目的蛋白的诱导表达和可溶性分析 | 第114-120页 |
| 4.4 讨论 | 第120页 |
| 4.5 本章小结 | 第120-121页 |
| 结论 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-129页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
