| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1 材料 | 第12-14页 |
| 1.1 实验动物 | 第12页 |
| 1.2 主要药物及试剂 | 第12页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第12-13页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第13-14页 |
| 2 方法 | 第14-20页 |
| 2.1 ELISA法检测LPS致小鼠MECs分泌的炎性因子 | 第14页 |
| 2.2 RNA-seq筛选LPS作用小鼠MECs前后差异表达基因 | 第14页 |
| 2.2.1 细胞总RNA提取及质检 | 第14页 |
| 2.2.2 RNA-seq检测 | 第14页 |
| 2.2.3 上调差异基因数据分析 | 第14页 |
| 2.3 GO和Pathway分析筛选与炎症免疫相关的基因 | 第14-15页 |
| 2.4 部分差异表达基因的qPCR验证 | 第15-16页 |
| 2.5 Cxcl1和Ccl2在小鼠MECsLPS炎症免疫信号通路中作用地位的分析 | 第16-18页 |
| 2.5.1 转染片段设计及最佳转染条件筛选 | 第16-17页 |
| 2.5.2 实时荧光定量PCR检测Cxcl1、Ccl2沉默后对LPS信号通路中NF-κBp65的影响 | 第17-18页 |
| 2.5.3 ELISA法检测Cxcl1、Ccl2沉默后对LPS致细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6的影响 | 第18页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR检测金英汤对Cxcl1、Csf2、Csf3、Ccl2、Met、Birc3、Icam1、Cav1mRNA的影响 | 第18-19页 |
| 2.7 统计学处理 | 第19-20页 |
| 3 结果 | 第20-34页 |
| 3.1 LPS对MECs分泌炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6的影响 | 第20页 |
| 3.2 LPS刺激后小鼠MECs差异表达基因 | 第20-22页 |
| 3.2.1 RNA提取及质检结果 | 第20-21页 |
| 3.2.2 转录组测序分析结果 | 第21-22页 |
| 3.3 小鼠MECs与炎症免疫相关的差异表达基因 | 第22-26页 |
| 3.3.1 基因功能及GO分析 | 第22页 |
| 3.3.2 LPS信号通路相关Pathway分析 | 第22-24页 |
| 3.3.3 部分差异表达基因的RT-qPCR验证 | 第24-26页 |
| 3.4 Cxcl1、Ccl2在LPS炎症信号通路中的作用地位 | 第26-29页 |
| 3.4.1 Cxcl1、Ccl2的siRNA最佳转染条件 | 第26-27页 |
| 3.4.2 Cxcl1、Ccl2基因沉默后对LPS信号通路中NF-κBp65的影响 | 第27-28页 |
| 3.4.3 Cxcl1、Ccl2基因沉默后对LPS致细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-及IL-1β量的影响 | 第28-29页 |
| 3.5 金英汤对MECs中8个差异基因的影响 | 第29-34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| 4.1 LPS刺激小鼠MECs建立炎症模型 | 第34页 |
| 4.2 LPS刺激后小鼠MECs中差异表达基因 | 第34-35页 |
| 4.3 小鼠MECs中与LPS信号通路相关的上调差异基因 | 第35页 |
| 4.4 Cxcl1、Ccl2与LPS信号通路的关系 | 第35-37页 |
| 4.5 金英汤对LPS信号通路相关因子的影响 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 文献综述 | 第39-52页 |
| 1 炎症与LPS及其信号通路 | 第39-41页 |
| 1.1 炎症的概述 | 第39-40页 |
| 1.2 LPS概述 | 第40页 |
| 1.3 LPS信号通路 | 第40-41页 |
| 2 RNA-seq研究进展 | 第41-45页 |
| 2.1 转录组测序基础分析示意图 | 第41页 |
| 2.2 测序基础分析方法 | 第41-43页 |
| 2.3 RNA-seq在转录组学中的优势 | 第43页 |
| 2.4 转录组技术的应用 | 第43-44页 |
| 2.4.1 基因功能注释及获取新转录本 | 第43-44页 |
| 2.4.2 进行基因转录水平研究 | 第44页 |
| 2.4.3 非转录RNA功能研究 | 第44页 |
| 2.4.4 转录本结构变异研究 | 第44页 |
| 2.4.5 分子标记的开发 | 第44页 |
| 2.4.6 新基因的挖掘及其功能预测 | 第44页 |
| 2.5 RNA-seq的研究展望 | 第44-45页 |
| 3 Cxcl1和Ccl2的生物学特性及功能 | 第45-46页 |
| 3.1 Cxcl1的生物学特性及功能 | 第45-46页 |
| 3.2 Ccl2的生物学特性及功能 | 第46页 |
| 4 siRNA研究进展 | 第46-48页 |
| 4.1 siRNA的作用机制 | 第47-48页 |
| 4.2 siRNA技术的特征 | 第48页 |
| 4.3 siRNA的应用 | 第48页 |
| 5 中药的抗炎免疫及其机制研究 | 第48-52页 |
| 参考文献 | 第52-65页 |
| 附录一 在读硕士期间发表论文情况 | 第65-66页 |
| 附录二 在读期间参与的科研项目 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
