| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-27页 |
| 1.1 植物中ROS研究进展 | 第15-22页 |
| 1.1.1 植物ROS来源 | 第15页 |
| 1.1.2 植物ROS清除 | 第15-16页 |
| 1.1.3 ROS在植物中的作用 | 第16-22页 |
| 1.1.3.1 叶绿体与ROS的关系 | 第17-18页 |
| 1.1.3.2 线粒体与ROS的关系 | 第18-19页 |
| 1.1.3.3 过氧化物酶体与ROS的作用 | 第19页 |
| 1.1.3.4 氧化还原平衡和ROS对植物的影响 | 第19-22页 |
| 1.2 槲皮素研究进展概述 | 第22-23页 |
| 1.3 PIRIN研究概述 | 第23-26页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-45页 |
| 2.1 材料 | 第27页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第27页 |
| 2.1.2 载体及菌株 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-45页 |
| 2.2.1 载体构建 | 第27-29页 |
| 2.2.2 实验所用引物 | 第29页 |
| 2.2.3 生物信息学分析 | 第29页 |
| 2.2.4 水稻的田间种植及管理 | 第29页 |
| 2.2.5 转基因材料鉴定 | 第29-31页 |
| 2.2.6 水稻苗期的干旱及盐处理 | 第31页 |
| 2.2.7 组织表达特异性检测 | 第31页 |
| 2.2.8 DAB染色 | 第31页 |
| 2.2.9 NBT染色 | 第31-32页 |
| 2.2.10 Trypan Blue染色(台盼蓝) | 第32页 |
| 2.2.11 H2DCF-DA染色 | 第32页 |
| 2.2.12 水稻原生质体的制备及亚细胞定位 | 第32-34页 |
| 2.2.13 原核表达和蛋白纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.14 蛋白离子结合试验 | 第35页 |
| 2.2.15 蛋白酶学实验设计 | 第35页 |
| 2.2.16 酵母双杂交实验(Y2H) | 第35-39页 |
| 2.2.16.1 酵母双杂交文库构建 | 第36-37页 |
| 2.2.16.2 酵母感受态的制备 | 第37页 |
| 2.2.16.3 酵母快速转化 | 第37页 |
| 2.2.16.4 诱饵蛋白(Bait)自激活检测 | 第37页 |
| 2.2.16.5 诱饵蛋白(Bait)毒性检测 | 第37-38页 |
| 2.2.16.6 Mating实验步骤 | 第38页 |
| 2.2.16.7 Mating效率的测定 | 第38页 |
| 2.2.16.8 酵母质粒的提取 | 第38-39页 |
| 2.2.17 免疫共沉淀实验(CoIP) | 第39-43页 |
| 2.2.17.1 总蛋白的提取 | 第39页 |
| 2.2.17.2 蛋白含量的测定 | 第39页 |
| 2.2.17.3 免疫沉淀步骤 | 第39-40页 |
| 2.2.17.4 Western blot | 第40-43页 |
| 2.2.18 荧光双分子互补实验(Bi FC) | 第43页 |
| 2.2.19 ro GFP1-Bi FC 体系的建成与体内 ROS 影响互作实验 | 第43-44页 |
| 2.2.20 SOD、CAT和 POD酶活测定以及MDA含量检测 | 第44页 |
| 2.2.21 线粒体的提取及相关复合体特异性活性测定 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第45-84页 |
| 3.1 结果 | 第45-80页 |
| 3.1.1 Os PIR3 转基因突变体材料的获取 | 第45页 |
| 3.1.2 Os PIR3 的生物信息学分析 | 第45-49页 |
| 3.1.3 Os PIR3 转基因植株基因表达分析及农艺性状调查 | 第49-52页 |
| 3.1.4 Os PIR3 转基因植株苗期表型分析 | 第52-54页 |
| 3.1.5 Os PIR3 转基因植株苗期的ROS水平检测 | 第54-56页 |
| 3.1.6 OsPIR3 的亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 3.1.7 Os PIR3 的组织表达特异性分析 | 第57-58页 |
| 3.1.8 Os PIR3 蛋白的表达纯化及离子结合实验 | 第58-61页 |
| 3.1.9 Os PIR3 蛋白的酶学功能实验 | 第61页 |
| 3.1.10 水稻c DNA酵母文库的构建及Os PIR3 对酵母文库的筛选 | 第61-62页 |
| 3.1.11 OsMAPK14和Os ND-23 的亚细胞定位 | 第62-63页 |
| 3.1.12 OsPIR3与Os MAPK14和Os ND-23 互作验证 | 第63-65页 |
| 3.1.13 ROS 水平变化影响 Os PIR3 与 Os MAPK14 互作的体内体外实验 | 第65-70页 |
| 3.1.14 Os PIR3 转基因植株苗期线粒体活性检测 | 第70-71页 |
| 3.1.15 Os PIR3 转基因植株苗期的干旱及盐胁迫实验 | 第71-74页 |
| 3.1.16 Os PIR3 转基因植株苗期的转录组学结果分析 | 第74-78页 |
| 3.1.17 Os PIR3 转基因植株苗期的SOD、CAT、POD酶活及MDA含量测定 | 第78-79页 |
| 3.1.18 OsPIR3 感受ROS变化调控植物应答模型的建立 | 第79-80页 |
| 3.2 讨论 | 第80-84页 |
| 3.2.1 OsPIR3 蛋白及其家族的结构特征 | 第80-81页 |
| 3.2.2 Os PIR3 在转录水平调控植物的生长发育及抗性 | 第81-82页 |
| 3.2.3 OsPIR3 蛋白可能是细胞内ROS信号转导的感受器 | 第82-84页 |
| 第四章 全文结论 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-98页 |
| 附录 | 第98-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简历 | 第103页 |
