| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第13-24页 |
| 1.1 克罗恩病的发病机制与现阶段研究进展 | 第13-19页 |
| 1.1.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 克罗恩病 | 第14页 |
| 1.1.3 克罗恩病与遗传学 | 第14-15页 |
| 1.1.4 克罗恩病与肠黏膜保护 | 第15-17页 |
| 1.1.5 克罗恩病与肠道微生态 | 第17-18页 |
| 1.1.6 克罗恩病与易感基因: | 第18页 |
| 1.1.7 克罗恩病与全基因测序 | 第18-19页 |
| 1.2 干扰素家族蛋白的研究 | 第19-21页 |
| 1.2.1 干扰素的分型 | 第19-20页 |
| 1.2.2 干扰素信号通路 | 第20页 |
| 1.2.3 干扰素蛋白功能 | 第20-21页 |
| 1.3 炎症性肠病实验动物模型 | 第21-23页 |
| 1.4 本课题研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-31页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第24页 |
| 2.1.2 克罗恩病患者组织、血液标本 | 第24页 |
| 2.1.3 实验小鼠 | 第24页 |
| 2.1.4 质粒载体 | 第24页 |
| 2.1.5 试剂与药品 | 第24-27页 |
| 2.1.6 主要设备与仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.7 实验室自行配置试剂: | 第28-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-43页 |
| 2.2.1 细胞培养与刺激 | 第31-33页 |
| 2.2.2 蛋白提取与Western blot | 第33-36页 |
| 2.2.3 HE染色 | 第36页 |
| 2.2.4 免疫组化 | 第36-37页 |
| 2.2.5 原位杂交: | 第37-38页 |
| 2.2.6 总RNA提取(Trizol法) | 第38-39页 |
| 2.2.7 逆转录RT-PCR | 第39-40页 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.2.9 DSS诱导小鼠急慢性肠炎模型 | 第41页 |
| 2.2.10 三硝基苯磺酸构建小鼠急性肠炎模型 | 第41-42页 |
| 2.2.11 小鼠肠道炎症评分 | 第42页 |
| 2.2.12 计学分析 | 第42-43页 |
| 第三章 结果与分析 | 第43-69页 |
| 3.1 临床患者标本测序和易感基因初步定位 | 第43-49页 |
| 3.1.1 测序发现57个候选基因中26个位点突变一致 | 第43-49页 |
| 3.1.2 初步鉴定IFNα4、IFNα10是中国CD目标易感基因 | 第49页 |
| 3.2 IFNα4和IFNα10突变后体外功能 | 第49-52页 |
| 3.2.1 转染了干扰IFN质粒的HuH7抑制HCV病毒复制能力减弱 | 第49-50页 |
| 3.2.2 IFNα4和IFNα10能够体外影响Treg细胞的成熟 | 第50-51页 |
| 3.2.3 突变或干扰IFNα家族后使其抗炎抗病毒能力受损 | 第51-52页 |
| 3.3 易感基因IFNα4和IFNα10体内的功能学研究 | 第52-55页 |
| 3.3.1 IFNα4和IFNα10能显著改善DSS诱导的小鼠急性结肠炎 | 第52-55页 |
| 3.3.2 IBD是多基因疾病 | 第55页 |
| 3.4 探究IFNα4突变对实验动物模型的影响 | 第55-62页 |
| 3.4.1 转基因小鼠的构建与验证 | 第55-59页 |
| 3.4.2 DSS构建急慢性肠炎模型 | 第59-61页 |
| 3.4.3 干扰素突变小鼠表现出更严重的炎症程度 | 第61-62页 |
| 3.5 急性肠炎与肠道微生物 | 第62-69页 |
| 3.5.1 时间对肠道菌群影响更明显 | 第62-65页 |
| 3.5.2 突变组小鼠体内真菌随时间变化更加显著 | 第65-68页 |
| 3.5.3 品系与时间在真菌水平上均与小鼠肠道菌群有显著关联 | 第68-69页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第69-72页 |
| 4.1 克罗恩病最新研究进展 | 第69页 |
| 4.2 干扰素在JAK-STAT通路中的特点 | 第69-70页 |
| 4.3 本课题创新之处 | 第70-71页 |
| 4.4 对课题未来的展望 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| References | 第76-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
