| 摘要 | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 1.1 大豆皂苷检测技术的现状 | 第9页 |
| 1.2 A类大豆皂苷的研究概况 | 第9-11页 |
| 1.2.1 A类大豆皂苷的简介 | 第9-10页 |
| 1.2.2 A类大豆皂苷的代谢途径 | 第10-11页 |
| 1.3 基因多态性检测的研究进展 | 第11页 |
| 1.4 可视化检测的概述 | 第11-12页 |
| 1.5 HCR反应的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第14页 |
| 1.7 技术路线 | 第14-15页 |
| 第二章 A类大豆皂苷及其关键酶基因表达分析 | 第15-26页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第15-17页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-18页 |
| 2.2.1 Aa、Ab皂苷含量的测定 | 第17页 |
| 2.2.2 GmSg-1基因的获得和测序 | 第17页 |
| 2.2.3 目标基因DNA序列单核苷酸多态性分析 | 第17页 |
| 2.2.4 GmSg-1基因表达的qRT-PCR检测 | 第17-18页 |
| 2.3 结果与分析 | 第18-24页 |
| 2.3.1 A类大豆皂苷组成多态性分析 | 第18页 |
| 2.3.2 不同类型大豆材料Aa、Ab皂苷含量分析 | 第18-19页 |
| 2.3.3 籽粒不同发育时期大豆皂苷含量的分析 | 第19页 |
| 2.3.4 GmSg-1基因的多态性分析 | 第19-23页 |
| 2.3.5 不同发育时期GmSg-1基因相对表达量分析 | 第23-24页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 HCR法检测A类大豆皂苷基因的可行性探究 | 第26-37页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第26-27页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 3.2.1 HCR反应体系 | 第27页 |
| 3.2.2 HCR反应体系Tris-HCl缓冲溶液pH值的选择 | 第27-28页 |
| 3.2.3 HCR体系缓冲溶液中KCl浓度的选择 | 第28页 |
| 3.2.4 HCR体系探针浓度的选择 | 第28页 |
| 3.2.5 HCR体系反应时间的选择 | 第28页 |
| 3.2.6 HCR体系中显色反应吸光值随时间的变化 | 第28页 |
| 3.2.7 HCR体系反应特异性研究 | 第28-29页 |
| 3.2.8 HCR体系反应基因芯片的制作 | 第29页 |
| 3.3 结果与分析 | 第29-35页 |
| 3.3.1 HCR反应体系Tris-HCl缓冲溶液pH值的选择 | 第29-31页 |
| 3.3.2 HCR体系缓冲溶液中KCl浓度的选择 | 第31页 |
| 3.3.3 HCR体系探针浓度和反应时间的选择 | 第31-32页 |
| 3.3.4 HCR体系中显色反应吸光值随时间的变化 | 第32-33页 |
| 3.3.5 HCR体系反应特异性 | 第33-34页 |
| 3.3.6 HCR体系反应基因芯片制作 | 第34-35页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 HCR法检测A类大豆皂苷基因的实际应用 | 第37-47页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 预测不同长度的目标片段进行HCR反应检测的可行性 | 第39页 |
| 4.2.2 HCR反应检测不同长度的目标片段 | 第39页 |
| 4.2.3 HCR反应定性检测目标基因片段 | 第39-40页 |
| 4.2.4 应用HCR反应定量检测目标基因片段 | 第40页 |
| 4.3 结果与分析 | 第40-45页 |
| 4.3.1 HCR反应检测不同长度的目标片段 | 第40-42页 |
| 4.3.2 HCR反应检测GmSg-1~a、GmSg-1~b基因的原理 | 第42-43页 |
| 4.3.3 应用HCR反应定性检测目标基因片段 | 第43-45页 |
| 4.3.4 应用HCR反应定量检测目标基因片段 | 第45页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 全文总结 | 第47-49页 |
| 5.1 A类大豆皂苷及其关键酶基因表达分析 | 第47页 |
| 5.2 HCR法检测A类大豆皂苷基因的可行性探究 | 第47页 |
| 5.3 HCR法检测A类大豆皂苷基因的实际应用 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| Abstract | 第55-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
