| 摘要 | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 茎瘤固氮根瘤菌简介 | 第10页 |
| 1.2 细菌鞭毛的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 鞭毛的类型及组成 | 第10-11页 |
| 1.2.2 鞭毛旋转方向的分子机制 | 第11页 |
| 1.2.3 鞭毛的作用 | 第11-12页 |
| 1.3 双组分信号转导系统的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.3.1 双组分信号转导系统的组成 | 第12-13页 |
| 1.3.2 双组分信号转导系统的分布 | 第13-14页 |
| 1.3.3 双组分系统的信号转导机制 | 第14-15页 |
| 1.3.4 双组分信号转导系统的交叉调控 | 第15页 |
| 1.3.5 双组分信号转导系统的作用 | 第15-16页 |
| 1.4 基因敲除技术研究进展 | 第16-19页 |
| 1.4.1 传统基因敲除方法 | 第16-17页 |
| 1.4.2 新兴基因敲除技术 | 第17-18页 |
| 1.4.3 基因敲除技术的应用 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 茎瘤固氮根瘤菌ORS571鞭毛马达基因fliN与fliM的功能分析 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 供试菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂与仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 培养条件 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 茎瘤固氮根瘤菌ORS571基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 PCR引物设计 | 第22-23页 |
| 2.2.3 敲除载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.4 茎瘤固氮根瘤菌△fliN与△fliM缺失突变株的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.5 生长曲线的测定 | 第27页 |
| 2.2.6 趋化实验 | 第27页 |
| 2.2.7 细菌形态学观察 | 第27-28页 |
| 2.2.8 胞外多糖的观察与测定 | 第28页 |
| 2.2.9 细菌生物膜的形成与测定 | 第28页 |
| 2.2.10 细菌凝结实验 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 △fliN与△fliM突变株的构建 | 第28-29页 |
| 2.3.2 生长曲线测定结果 | 第29页 |
| 2.3.3 趋化能力测定结果 | 第29-30页 |
| 2.3.4 鞭毛形态学观察 | 第30页 |
| 2.3.5 胞外多糖的观察与测定结果 | 第30-31页 |
| 2.3.6 生物膜的形成与测定结果 | 第31-32页 |
| 2.3.7 细菌凝结实验结果 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第33-36页 |
| 第三章 茎瘤固氮根瘤菌ORS571中双组份调控系统基因AZC_0619的功能分析 | 第36-52页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 供试菌株与质粒 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 | 第36页 |
| 3.1.3 培养条件 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 茎瘤固氮根瘤菌ORS571基因组DNA的提取 | 第36页 |
| 3.2.2 PCR引物设计 | 第36-37页 |
| 3.2.3 敲除载体的构建 | 第37页 |
| 3.2.4 茎瘤固氮根瘤菌△0619缺失突变株的构建 | 第37页 |
| 3.2.5 生长曲线的测定 | 第37页 |
| 3.2.6 趋化实验 | 第37页 |
| 3.2.7 细菌形态学观察 | 第37页 |
| 3.2.8 胞外多糖的观察与测定 | 第37页 |
| 3.2.9 细菌生物膜的形成与测定 | 第37页 |
| 3.2.10 细菌凝结实验 | 第37-38页 |
| 3.2.11 根系黏附实验 | 第38页 |
| 3.2.12 竞争性结瘤实验 | 第38页 |
| 3.2.13 AZC_0619的生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.2.14 荧光定量PCR | 第38-41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-50页 |
| 3.3.1 △0619突变株的构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 生长曲线测定结果 | 第42页 |
| 3.3.3 趋化能力测定结果 | 第42-43页 |
| 3.3.4 鞭毛形态学观察 | 第43页 |
| 3.3.5 胞外多糖的观察与测定结果 | 第43-44页 |
| 3.3.6 生物膜的形成与测定结果 | 第44-45页 |
| 3.3.7 细菌凝结实验结果 | 第45-46页 |
| 3.3.8 根系黏附实验结果 | 第46-47页 |
| 3.3.9 竞争性结瘤实验结果 | 第47-48页 |
| 3.3.10 AZC_0619的生物信息学分析结果 | 第48-49页 |
| 3.3.11 荧光定量PCR结果 | 第49-50页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第50-52页 |
| 第四章 全文总结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| Abstract | 第58-59页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 硕士期间发表论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
