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基于静电纺纳米纤维膜的Caco-2细胞模型构建及其槲皮素吸收机制研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第一章 前言第11-26页
    1.1 小肠的生理构造第11-12页
    1.2 Caco-2细胞第12-13页
    1.3 基于Caco-2细胞的常用肠道模型第13-14页
    1.4 肠道模型的改进第14-22页
        1.4.1 培养基的改进第14-15页
        1.4.2 载体材料的改性第15-16页
        1.4.3 生物反应器的改进第16-21页
            1.4.3.1 Caco-2细胞的生物反应器第16-18页
            1.4.3.2 非Caco-2细胞的生物反应器第18-21页
        1.4.4 微流体系统的改进第21-22页
    1.5 纳米纤维第22-23页
        1.5.1 纳米纤维概念及其特点第22页
        1.5.2 纳米纤维的制备方法第22-23页
        1.5.3 在组织工程中的应用第23页
    1.6 肠道吸收研究方法第23-25页
        1.6.1 体内法第23-24页
        1.6.2 在体法第24页
        1.6.3 体外法第24-25页
    1.7 研究目的和意义第25页
    1.8 研究内容第25-26页
第二章 用Caco-2细胞培养静电纺纳米纤维的制备和筛选第26-37页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验部分第26-27页
        2.2.1 实验原料第26页
        2.2.2 仪器第26-27页
    2.3 静电纺丝制备纳米纤维膜第27-30页
        2.3.1 聚丙烯腈纳米纤维膜的制备第27-28页
        2.3.2 聚乳酸纳米纤维膜的制备第28页
        2.3.3 醋酸纤维素纳米纤维膜的制备第28页
        2.3.4 聚己内酰胺纳米纤维膜的制备第28页
        2.3.5 细胞培养第28-29页
            2.3.5.1 细胞复苏第29页
            2.3.5.2 细胞传代第29页
        2.3.6 静电纺纳米纤维膜培养Caco-2细胞第29页
        2.3.7 静电纺纳米纤维膜的红外分析第29页
        2.3.9 扫描电子显微镜第29-30页
        2.3.10 数据统计分析第30页
    2.4 实验结果与分析第30-36页
        2.4.1 静电纺聚丙烯腈纳米纤维膜第30-31页
            2.4.1.1 电压对纤维的影响第30-31页
            2.4.1.2 流速对纤维的影响第31页
        2.4.2 静电纺聚乳酸纳米纤维膜第31-33页
            2.4.2.1 电压对纤维的影响第32-33页
            2.4.2.2 流速对纤维的影响第33页
        2.4.3 静电纺醋酸纤维素纳米纤维膜第33页
        2.4.4 静电纺聚己内酰胺纳米纤维膜第33-34页
        2.4.5 静电纺纳米纤维膜的细朐毒性检测第34-35页
        2.4.6 静电纺聚乳酸纳米纤维膜的化学结构第35-36页
    2.5 本章小结第36-37页
第三章 静电纺聚乳酸纳米纤维膜上Caco-2细胞功能分析第37-53页
    3.1 引言第37页
    3.2 实验部分第37-41页
        3.2.1 实验原料第37页
        3.2.2 仪器第37-38页
        3.2.3 静电纺聚乳酸纳米纤维膜插入式Transwell模型制备第38页
        3.2.4 Caco-2细胞的培养第38页
        3.2.5 静电纺聚乳酸纳米纤维膜培养Caco-2细胞第38页
        3.2.6 扫描电子显微镜第38页
        3.2.7 透射电子显微镜第38页
        3.2.8 细胞计数第38-39页
        3.2.9 细胞琥珀酸脱氢酶活性测定第39页
        3.2.10 激光共聚焦荧光显微镜第39页
        3.2.11 Caco-2细胞TEER值变化第39-40页
        3.2.12 苯酚红通透性的测定第40页
        3.2.13 碱性磷酸酶(ALP)活性测定第40页
        3.2.14 细胞转运蛋白活性的测定第40-41页
        3.2.15 数据统计分析第41页
    3.3 实验结果与分析第41-52页
        3.3.1 扫描电子显微镜第41-44页
        3.3.2 透射电子显微镜第44页
        3.3.3 Caco-2细胞计数第44-45页
        3.3.4 Caco-2细胞琥珀酸脱氢酶活性第45-46页
        3.3.5 Caco-2细胞的CLSM结果第46-47页
        3.3.6 细胞层的旁路渗透性质第47-49页
        3.3.7 Caco-2细胞层跨膜电阻第49-50页
        3.3.8 Caco-2细胞内碱性磷酸酶活性第50-51页
        3.3.9 Caco-2细胞内转运蛋白的活性第51-52页
    3.4 本章小结第52-53页
第四章 Caco-2细胞肠道模型用于槲皮素吸收机制研究第53-63页
    4.1 引言第53-54页
        4.1.1 槲皮素的理化性质第53-54页
    4.2 实验部分第54-56页
        4.2.1 实验原料第54页
        4.2.2 仪器第54页
        4.2.3 槲皮素对细胞存活率的影响第54页
        4.2.4 槲皮素HPLC分析方法的建立第54-55页
            4.2.4.1 色谱条件第54-55页
            4.2.4.2 标准曲线第55页
        4.2.5 跨膜转运实验第55-56页
            4.2.5.1 槲皮素在不同时间下的跨膜转运实验第55页
            4.2.5.2 槲皮素在不同pH下的跨膜转运实验第55页
            4.2.5.3 槲皮素在不同浓度下的跨膜转运实验第55-56页
            4.2.5.4 表观通透系数的计算第56页
        4.2.6 数据统计分析第56页
    4.3 实验结果与分析第56-61页
        4.3.1 槲皮素的HPLC检测标准曲线第56-57页
        4.3.2 细胞存活率第57-58页
        4.3.3 不同浓度对槲皮素跨膜转运的影响第58-59页
        4.3.4 不同时间对槲皮素跨膜转运的影响第59-60页
        4.3.5 不同pH对槲皮素跨膜转运的影响第60-61页
    4.4 本章小结第61-63页
第五章 全文总结第63-65页
    5.1 总结第63页
    5.2 论文主要创新点第63-64页
    5.3 展望第64-65页
参考文献第65-71页
致谢第71页

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