摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
1.1 小肠的生理构造 | 第11-12页 |
1.2 Caco-2细胞 | 第12-13页 |
1.3 基于Caco-2细胞的常用肠道模型 | 第13-14页 |
1.4 肠道模型的改进 | 第14-22页 |
1.4.1 培养基的改进 | 第14-15页 |
1.4.2 载体材料的改性 | 第15-16页 |
1.4.3 生物反应器的改进 | 第16-21页 |
1.4.3.1 Caco-2细胞的生物反应器 | 第16-18页 |
1.4.3.2 非Caco-2细胞的生物反应器 | 第18-21页 |
1.4.4 微流体系统的改进 | 第21-22页 |
1.5 纳米纤维 | 第22-23页 |
1.5.1 纳米纤维概念及其特点 | 第22页 |
1.5.2 纳米纤维的制备方法 | 第22-23页 |
1.5.3 在组织工程中的应用 | 第23页 |
1.6 肠道吸收研究方法 | 第23-25页 |
1.6.1 体内法 | 第23-24页 |
1.6.2 在体法 | 第24页 |
1.6.3 体外法 | 第24-25页 |
1.7 研究目的和意义 | 第25页 |
1.8 研究内容 | 第25-26页 |
第二章 用Caco-2细胞培养静电纺纳米纤维的制备和筛选 | 第26-37页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验部分 | 第26-27页 |
2.2.1 实验原料 | 第26页 |
2.2.2 仪器 | 第26-27页 |
2.3 静电纺丝制备纳米纤维膜 | 第27-30页 |
2.3.1 聚丙烯腈纳米纤维膜的制备 | 第27-28页 |
2.3.2 聚乳酸纳米纤维膜的制备 | 第28页 |
2.3.3 醋酸纤维素纳米纤维膜的制备 | 第28页 |
2.3.4 聚己内酰胺纳米纤维膜的制备 | 第28页 |
2.3.5 细胞培养 | 第28-29页 |
2.3.5.1 细胞复苏 | 第29页 |
2.3.5.2 细胞传代 | 第29页 |
2.3.6 静电纺纳米纤维膜培养Caco-2细胞 | 第29页 |
2.3.7 静电纺纳米纤维膜的红外分析 | 第29页 |
2.3.9 扫描电子显微镜 | 第29-30页 |
2.3.10 数据统计分析 | 第30页 |
2.4 实验结果与分析 | 第30-36页 |
2.4.1 静电纺聚丙烯腈纳米纤维膜 | 第30-31页 |
2.4.1.1 电压对纤维的影响 | 第30-31页 |
2.4.1.2 流速对纤维的影响 | 第31页 |
2.4.2 静电纺聚乳酸纳米纤维膜 | 第31-33页 |
2.4.2.1 电压对纤维的影响 | 第32-33页 |
2.4.2.2 流速对纤维的影响 | 第33页 |
2.4.3 静电纺醋酸纤维素纳米纤维膜 | 第33页 |
2.4.4 静电纺聚己内酰胺纳米纤维膜 | 第33-34页 |
2.4.5 静电纺纳米纤维膜的细朐毒性检测 | 第34-35页 |
2.4.6 静电纺聚乳酸纳米纤维膜的化学结构 | 第35-36页 |
2.5 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 静电纺聚乳酸纳米纤维膜上Caco-2细胞功能分析 | 第37-53页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验部分 | 第37-41页 |
3.2.1 实验原料 | 第37页 |
3.2.2 仪器 | 第37-38页 |
3.2.3 静电纺聚乳酸纳米纤维膜插入式Transwell模型制备 | 第38页 |
3.2.4 Caco-2细胞的培养 | 第38页 |
3.2.5 静电纺聚乳酸纳米纤维膜培养Caco-2细胞 | 第38页 |
3.2.6 扫描电子显微镜 | 第38页 |
3.2.7 透射电子显微镜 | 第38页 |
3.2.8 细胞计数 | 第38-39页 |
3.2.9 细胞琥珀酸脱氢酶活性测定 | 第39页 |
3.2.10 激光共聚焦荧光显微镜 | 第39页 |
3.2.11 Caco-2细胞TEER值变化 | 第39-40页 |
3.2.12 苯酚红通透性的测定 | 第40页 |
3.2.13 碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第40页 |
3.2.14 细胞转运蛋白活性的测定 | 第40-41页 |
3.2.15 数据统计分析 | 第41页 |
3.3 实验结果与分析 | 第41-52页 |
3.3.1 扫描电子显微镜 | 第41-44页 |
3.3.2 透射电子显微镜 | 第44页 |
3.3.3 Caco-2细胞计数 | 第44-45页 |
3.3.4 Caco-2细胞琥珀酸脱氢酶活性 | 第45-46页 |
3.3.5 Caco-2细胞的CLSM结果 | 第46-47页 |
3.3.6 细胞层的旁路渗透性质 | 第47-49页 |
3.3.7 Caco-2细胞层跨膜电阻 | 第49-50页 |
3.3.8 Caco-2细胞内碱性磷酸酶活性 | 第50-51页 |
3.3.9 Caco-2细胞内转运蛋白的活性 | 第51-52页 |
3.4 本章小结 | 第52-53页 |
第四章 Caco-2细胞肠道模型用于槲皮素吸收机制研究 | 第53-63页 |
4.1 引言 | 第53-54页 |
4.1.1 槲皮素的理化性质 | 第53-54页 |
4.2 实验部分 | 第54-56页 |
4.2.1 实验原料 | 第54页 |
4.2.2 仪器 | 第54页 |
4.2.3 槲皮素对细胞存活率的影响 | 第54页 |
4.2.4 槲皮素HPLC分析方法的建立 | 第54-55页 |
4.2.4.1 色谱条件 | 第54-55页 |
4.2.4.2 标准曲线 | 第55页 |
4.2.5 跨膜转运实验 | 第55-56页 |
4.2.5.1 槲皮素在不同时间下的跨膜转运实验 | 第55页 |
4.2.5.2 槲皮素在不同pH下的跨膜转运实验 | 第55页 |
4.2.5.3 槲皮素在不同浓度下的跨膜转运实验 | 第55-56页 |
4.2.5.4 表观通透系数的计算 | 第56页 |
4.2.6 数据统计分析 | 第56页 |
4.3 实验结果与分析 | 第56-61页 |
4.3.1 槲皮素的HPLC检测标准曲线 | 第56-57页 |
4.3.2 细胞存活率 | 第57-58页 |
4.3.3 不同浓度对槲皮素跨膜转运的影响 | 第58-59页 |
4.3.4 不同时间对槲皮素跨膜转运的影响 | 第59-60页 |
4.3.5 不同pH对槲皮素跨膜转运的影响 | 第60-61页 |
4.4 本章小结 | 第61-63页 |
第五章 全文总结 | 第63-65页 |
5.1 总结 | 第63页 |
5.2 论文主要创新点 | 第63-64页 |
5.3 展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71页 |