摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第12-27页 |
1.1 盾叶薯蓣概述 | 第12-14页 |
1.1.1 盾叶薯蓣简介及其资源分布 | 第12页 |
1.1.2 薯蓣资源简介 | 第12-13页 |
1.1.3 盾叶薯蓣根状茎中螺甾皂苷与呋甾皂苷的转化 | 第13页 |
1.1.4 盾叶薯蓣皂苷元的应用 | 第13-14页 |
1.2 β-葡萄糖苷酶概述 | 第14-24页 |
1.2.1 β-葡萄糖苷酶简介 | 第14页 |
1.2.2 β-葡萄糖苷酶的作用 | 第14-15页 |
1.2.3 β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第15-16页 |
1.2.4 β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第16-21页 |
1.2.4.1 β-葡萄糖苷酶分子量 | 第16页 |
1.2.4.2 β-葡萄糖苷酶最适温度和热稳定性 | 第16-17页 |
1.2.4.3 β-葡萄糖苷酶最适βH和βH稳定性 | 第17-20页 |
1.2.4.3 植物中β-葡萄糖苷酶的激活因子和抑制因子 | 第20页 |
1.2.4.4 β-葡萄糖苷酶的Km和Vmax | 第20-21页 |
1.2.5 β-葡萄糖苷酶活性测定方法 | 第21-22页 |
1.2.6 β-葡萄糖苷酶固定化研究 | 第22-23页 |
1.2.7 β-葡萄糖苷酶的应用 | 第23-24页 |
1.2.7.1 β-葡萄糖苷酶在食品工业中的应用 | 第23-24页 |
1.2.7.2 β-葡萄糖苷酶在茶叶增香中的应用 | 第24页 |
1.2.7.3 β-葡萄糖苷酶在其他方面的应用 | 第24页 |
1.3 特殊的β-葡萄糖苷酶呋甾皂苷26-O-β-葡萄糖苷酶的研究进展 | 第24-25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第二章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶提取条件的优化 | 第27-38页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第27-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
2.3 实验方法 | 第28-30页 |
2.3.1 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶粗酶液制备 | 第28页 |
2.3.2 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第28-29页 |
2.3.2.1 pNPG法操作步骤 | 第28-29页 |
2.3.2.2 对硝基苯酚标准曲线绘制 | 第29页 |
2.3.3 蛋白质含量的测定 | 第29-30页 |
2.3.4 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶初步提取条件的确定 | 第30页 |
2.3.4.1 单因素试验 | 第30页 |
2.3.4.2 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶提取条件优化 | 第30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-35页 |
2.4.1 对硝基苯酚浓度-吸光度标准曲线 | 第30-31页 |
2.4.2 牛血清蛋白(BSA)浓度-吸光度标准曲线 | 第31-32页 |
2.4.3 粗酶液提取条件的确定 | 第32-35页 |
2.4.3.1 缓冲液种类对粗酶液提取的影响 | 第32-33页 |
2.4.3.2 缓冲液pH对粗酶液提取的影响 | 第33-34页 |
2.4.3.3 时间T对粗酶液提取的影响 | 第34页 |
2.4.3.4 最佳条件的优化 | 第34-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-37页 |
附:重要试剂的配制 | 第37-38页 |
第三章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶分离纯化 | 第38-50页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第38-39页 |
3.1.1 材料 | 第38页 |
3.1.2 主要试剂 | 第38页 |
3.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
3.2 实验方法 | 第39-43页 |
3.2.1 硫酸铵分级沉淀 | 第39-40页 |
3.2.2 β-葡萄糖苷酶透析脱盐与浓缩 | 第40-41页 |
3.2.3 离子交换层析 | 第41-42页 |
3.2.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第42-43页 |
3.2.5 疏水层析 | 第43页 |
3.3 实验结果与分析 | 第43-48页 |
3.3.1 硫酸铵沉淀分级结果 | 第43-46页 |
3.3.2 透析除盐浓缩后的样品酶活力 | 第46页 |
3.3.3 离子交换层析 | 第46页 |
3.3.4 疏水层析 | 第46-47页 |
3.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第47-48页 |
3.4 本章小结 | 第48-49页 |
附:各重要试剂的配制 | 第49-50页 |
第四章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶基本酶学性质研究 | 第50-69页 |
4.1 实验材料和试剂 | 第50-51页 |
4.1.1 实验材料 | 第50页 |
4.1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
4.1.3 主要仪器 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-54页 |
4.2.1 反应时间及底物浓度对酶活的影响 | 第51页 |
4.2.2 β-葡萄糖苷酶反应最适温度和pH | 第51-52页 |
4.2.3 β-葡萄糖苷酶热稳定性和pH稳定性 | 第52页 |
4.2.4 金属离子对酶活力的影响 | 第52页 |
4.2.5 有机溶剂对酶活力的影响 | 第52页 |
4.2.6 常见有机物对酶活力的影响 | 第52页 |
4.2.7 添加不同底物的酶活力比较 | 第52-53页 |
4.2.8 酶水解pNPG动力学常数Vmax和Km的确定 | 第53-54页 |
4.2.9 干燥不同时间对酶活力的影响 | 第54页 |
4.3 实验结果分析 | 第54-67页 |
4.3.1 反应时间及底物浓度对酶活的影响 | 第54-56页 |
4.3.2 β-葡萄糖苷酶最适温度和热稳定性研究 | 第56-59页 |
4.3.3 β-葡萄糖苷酶最适pH和pH稳定性研究 | 第59-60页 |
4.3.4 金属离子对β-葡萄糖苷酶酶活力的影响 | 第60-61页 |
4.3.5 有机溶剂对酶活力的影响 | 第61-62页 |
4.3.6 常见有机物对β-葡萄糖苷酶活力的影响 | 第62-63页 |
4.3.7 添加不同底物的酶活力比较 | 第63-66页 |
4.3.8 酶促动力学参数 | 第66页 |
4.3.9 盾叶薯蓣根状茎干燥过程中β-葡萄糖苷酶酶活力的变化 | 第66-67页 |
4.4 本章小结 | 第67-69页 |
总结和展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-79页 |
在读期间发表的论文 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |