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盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 前言第12-27页
    1.1 盾叶薯蓣概述第12-14页
        1.1.1 盾叶薯蓣简介及其资源分布第12页
        1.1.2 薯蓣资源简介第12-13页
        1.1.3 盾叶薯蓣根状茎中螺甾皂苷与呋甾皂苷的转化第13页
        1.1.4 盾叶薯蓣皂苷元的应用第13-14页
    1.2 β-葡萄糖苷酶概述第14-24页
        1.2.1 β-葡萄糖苷酶简介第14页
        1.2.2 β-葡萄糖苷酶的作用第14-15页
        1.2.3 β-葡萄糖苷酶的分离纯化第15-16页
        1.2.4 β-葡萄糖苷酶的理化性质第16-21页
            1.2.4.1 β-葡萄糖苷酶分子量第16页
            1.2.4.2 β-葡萄糖苷酶最适温度和热稳定性第16-17页
            1.2.4.3 β-葡萄糖苷酶最适βH和βH稳定性第17-20页
            1.2.4.3 植物中β-葡萄糖苷酶的激活因子和抑制因子第20页
            1.2.4.4 β-葡萄糖苷酶的Km和Vmax第20-21页
        1.2.5 β-葡萄糖苷酶活性测定方法第21-22页
        1.2.6 β-葡萄糖苷酶固定化研究第22-23页
        1.2.7 β-葡萄糖苷酶的应用第23-24页
            1.2.7.1 β-葡萄糖苷酶在食品工业中的应用第23-24页
            1.2.7.2 β-葡萄糖苷酶在茶叶增香中的应用第24页
            1.2.7.3 β-葡萄糖苷酶在其他方面的应用第24页
    1.3 特殊的β-葡萄糖苷酶呋甾皂苷26-O-β-葡萄糖苷酶的研究进展第24-25页
    1.4 本研究的目的和意义第25-27页
第二章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶提取条件的优化第27-38页
    2.1 实验材料和试剂第27-28页
        2.1.1 实验材料第27页
        2.1.2 主要试剂第27-28页
        2.1.3 主要仪器第28页
    2.3 实验方法第28-30页
        2.3.1 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶粗酶液制备第28页
        2.3.2 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶活性测定第28-29页
            2.3.2.1 pNPG法操作步骤第28-29页
            2.3.2.2 对硝基苯酚标准曲线绘制第29页
        2.3.3 蛋白质含量的测定第29-30页
        2.3.4 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶初步提取条件的确定第30页
            2.3.4.1 单因素试验第30页
            2.3.4.2 盾叶薯蓣β-葡萄糖苷酶提取条件优化第30页
    2.4 结果与分析第30-35页
        2.4.1 对硝基苯酚浓度-吸光度标准曲线第30-31页
        2.4.2 牛血清蛋白(BSA)浓度-吸光度标准曲线第31-32页
        2.4.3 粗酶液提取条件的确定第32-35页
            2.4.3.1 缓冲液种类对粗酶液提取的影响第32-33页
            2.4.3.2 缓冲液pH对粗酶液提取的影响第33-34页
            2.4.3.3 时间T对粗酶液提取的影响第34页
            2.4.3.4 最佳条件的优化第34-35页
    2.5 本章小结第35-37页
    附:重要试剂的配制第37-38页
第三章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶分离纯化第38-50页
    3.1 实验材料与试剂第38-39页
        3.1.1 材料第38页
        3.1.2 主要试剂第38页
        3.1.3 主要仪器第38-39页
    3.2 实验方法第39-43页
        3.2.1 硫酸铵分级沉淀第39-40页
        3.2.2 β-葡萄糖苷酶透析脱盐与浓缩第40-41页
        3.2.3 离子交换层析第41-42页
        3.2.4 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第42-43页
        3.2.5 疏水层析第43页
    3.3 实验结果与分析第43-48页
        3.3.1 硫酸铵沉淀分级结果第43-46页
        3.3.2 透析除盐浓缩后的样品酶活力第46页
        3.3.3 离子交换层析第46页
        3.3.4 疏水层析第46-47页
        3.3.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第47-48页
    3.4 本章小结第48-49页
    附:各重要试剂的配制第49-50页
第四章 盾叶薯蓣根状茎β-葡萄糖苷酶基本酶学性质研究第50-69页
    4.1 实验材料和试剂第50-51页
        4.1.1 实验材料第50页
        4.1.2 主要试剂第50-51页
        4.1.3 主要仪器第51页
    4.2 实验方法第51-54页
        4.2.1 反应时间及底物浓度对酶活的影响第51页
        4.2.2 β-葡萄糖苷酶反应最适温度和pH第51-52页
        4.2.3 β-葡萄糖苷酶热稳定性和pH稳定性第52页
        4.2.4 金属离子对酶活力的影响第52页
        4.2.5 有机溶剂对酶活力的影响第52页
        4.2.6 常见有机物对酶活力的影响第52页
        4.2.7 添加不同底物的酶活力比较第52-53页
        4.2.8 酶水解pNPG动力学常数Vmax和Km的确定第53-54页
        4.2.9 干燥不同时间对酶活力的影响第54页
    4.3 实验结果分析第54-67页
        4.3.1 反应时间及底物浓度对酶活的影响第54-56页
        4.3.2 β-葡萄糖苷酶最适温度和热稳定性研究第56-59页
        4.3.3 β-葡萄糖苷酶最适pH和pH稳定性研究第59-60页
        4.3.4 金属离子对β-葡萄糖苷酶酶活力的影响第60-61页
        4.3.5 有机溶剂对酶活力的影响第61-62页
        4.3.6 常见有机物对β-葡萄糖苷酶活力的影响第62-63页
        4.3.7 添加不同底物的酶活力比较第63-66页
        4.3.8 酶促动力学参数第66页
        4.3.9 盾叶薯蓣根状茎干燥过程中β-葡萄糖苷酶酶活力的变化第66-67页
    4.4 本章小结第67-69页
总结和展望第69-70页
参考文献第70-79页
在读期间发表的论文第79-80页
致谢第80页

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