| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第8-14页 |
| 第1章 研究概述 | 第14-34页 |
| 1.1 贯叶连翘概况 | 第14页 |
| 1.2 贯叶连翘的形态特征 | 第14-15页 |
| 1.3 贯叶连翘的生长环境及分布 | 第15页 |
| 1.4 贯叶连翘的经济价值 | 第15页 |
| 1.5 贯叶连翘的主要活性成分 | 第15-17页 |
| 1.5.1 苯并二蒽酮类化合物 | 第15-16页 |
| 1.5.2 间苯三酚类化合物 | 第16-17页 |
| 1.5.3 类黄酮 | 第17页 |
| 1.5.4 聚酮化合物 | 第17页 |
| 1.5.5 褪黑素 | 第17页 |
| 1.6 贯叶连翘主要有效成分的生物合成途径 | 第17-21页 |
| 1.6.1 金丝桃素的生物合成 | 第17-18页 |
| 1.6.2 贯叶金丝桃素的生物合成 | 第18-19页 |
| 1.6.3 褪黑素的生物合成 | 第19-20页 |
| 1.6.4 类黄酮的生物合成 | 第20-21页 |
| 1.7 贯叶连翘的药理作用 | 第21-23页 |
| 1.7.1 抗抑郁作用 | 第21-22页 |
| 1.7.2 抗病毒作用 | 第22页 |
| 1.7.3 抗菌作用 | 第22页 |
| 1.7.4 抗癌作用 | 第22-23页 |
| 1.7.5 抗氧化作用 | 第23页 |
| 1.7.6 抗炎作用 | 第23页 |
| 1.8 遗传多样性研究 | 第23-25页 |
| 1.8.1 遗传多样性及其研究方法 | 第23-24页 |
| 1.8.2 SRAP | 第24页 |
| 1.8.3 SSR | 第24-25页 |
| 1.8.4 贯叶连翘遗传多样性研究 | 第25页 |
| 1.9 贯叶连翘功能基因研究概况 | 第25-27页 |
| 1.9.1 金丝桃素合成酶基因研究进展 | 第25-26页 |
| 1.9.2 聚酮合酶基因研究进展 | 第26-27页 |
| 1.10 HiSeq测序技术简介 | 第27-28页 |
| 1.10.1 HiSeq测序原理 | 第27页 |
| 1.10.2 HiSeq技术的优势及应用范围 | 第27-28页 |
| 1.11 高通量转录组分析 | 第28-31页 |
| 1.11.1 实验流程 | 第28页 |
| 1.11.2 数据处理 | 第28-29页 |
| 1.11.3 信息分析流程 | 第29-30页 |
| 1.11.4 高通量测序技术在药用植物转录组中的应用 | 第30-31页 |
| 1.12 AtPAP1转录因子 | 第31页 |
| 1.13 本研究的目的和意义 | 第31-34页 |
| 第2章 贯叶连翘种质资源的调查 | 第34-42页 |
| 2.1 采样地的选择 | 第34页 |
| 2.2 采样地的气候特点 | 第34页 |
| 2.3 贯叶连翘种质资源描述规范和数据标准 | 第34-42页 |
| 2.3.1 贯叶金丝桃种质资源描述规范及数据标准制定的原则和方法 | 第35-36页 |
| 2.3.2 贯叶连翘种质资源描述规范 | 第36-39页 |
| 2.3.3 表型性状的选择及数据标准 | 第39-42页 |
| 第3章 秦岭地区贯叶连翘遗传多样性研究 | 第42-64页 |
| 3.1 材料 | 第42-44页 |
| 3.2 贯叶连翘资源形态变异研究 | 第44-47页 |
| 3.2.1 研究方法 | 第44页 |
| 3.2.2 数据处理 | 第44页 |
| 3.2.3 结果 | 第44-47页 |
| 3.2.4 讨论 | 第47页 |
| 3.3 有效成分含量的测定 | 第47-53页 |
| 3.3.1 试剂 | 第47-48页 |
| 3.3.2 标准品的配制 | 第48页 |
| 3.3.3 供试样品溶液的制备 | 第48页 |
| 3.3.4 HPLC分析 | 第48页 |
| 3.3.5 用于研究贯叶连翘酚酸类成分的HPLC方法学考证 | 第48-50页 |
| 3.3.6 数据的统计分析 | 第50-51页 |
| 3.3.7 结果 | 第51页 |
| 3.3.8 讨论 | 第51-53页 |
| 3.4 DNA指纹图谱和遗传多样性研究 | 第53-59页 |
| 3.4.1 试剂 | 第53-54页 |
| 3.4.2 方法 | 第54-56页 |
| 3.4.3 结果与讨论 | 第56-59页 |
| 3.5 遗传多样性、形态特征以及活性成分的含量间的关系 | 第59-61页 |
| 3.5.1 遗传多样性、形态特征以及活性成分的含量间的关系 | 第59-60页 |
| 3.5.2 讨论 | 第60-61页 |
| 3.6 小结 | 第61-64页 |
| 第4章 贯叶连翘基因资源的发掘 | 第64-86页 |
| 4.1 材料 | 第64-65页 |
| 4.2 方法 | 第65-69页 |
| 4.2.1 试剂 | 第65页 |
| 4.2.2 总RNA的提取及残余DNA的去除 | 第65-66页 |
| 4.2.3 cDNA文库的构建、DNA簇的生成及RNA的测序 | 第66页 |
| 4.2.4 信息分析 | 第66-68页 |
| 4.2.5 部分转录本的表达模式分析 | 第68-69页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第69-84页 |
| 4.3.1 测序结果统计 | 第69-71页 |
| 4.3.2 Unigene的注释和功能分类 | 第71-75页 |
| 4.3.3 Pathway分析 | 第75-76页 |
| 4.3.4 贯叶连翘主要次生代谢产物合成途径相关基因分析 | 第76-77页 |
| 4.3.5 Ⅲ型聚酮合酶的鉴定 | 第77-80页 |
| 4.3.6 转录因子鉴定 | 第80-81页 |
| 4.3.7 SSR鉴定和引物设计 | 第81-82页 |
| 4.3.8 贯叶连翘活性成分合成相关部分新转录本表达模式研究 | 第82-84页 |
| 4.4 小结 | 第84-86页 |
| 第5章 外源基因AtPA1转化贯叶连翘的研究 | 第86-104页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第86-87页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第86页 |
| 5.1.2 质粒及菌株 | 第86-87页 |
| 5.1.3 试剂 | 第87页 |
| 5.2 实验方法 | 第87-94页 |
| 5.2.1 重组过表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第87-89页 |
| 5.2.2 根癌农杆菌介导的叶盘法转化贯叶连翘 | 第89-90页 |
| 5.2.3 转基因贯叶连翘植株基因组DNA水平的检测 | 第90-91页 |
| 5.2.4 转基因贯叶连翘株系基因表达水平的检测 | 第91-93页 |
| 5.2.5 总酚、总黄酮含量的测定 | 第93-94页 |
| 5.2.6 贯叶连翘有效成分含量的测定 | 第94页 |
| 5.3 结果与分析 | 第94-100页 |
| 5.3.1 贯叶连翘过表达AtPAP1株系gDNA水平的PCR检测 | 第94-95页 |
| 5.3.2 贯叶连翘过表达AtPAP1株系基因表达水平检测 | 第95-96页 |
| 5.3.3 贯叶连翘过表达AtPAP1株系中总酚及总黄酮含量的测定 | 第96页 |
| 5.3.4 贯叶连翘过表达AtPAP1株系次生代谢物含量的测定 | 第96-98页 |
| 5.3.5 贯叶连翘过表达AtPAP1株系中黄酮类成分代谢途径上酶基因的表达情况 | 第98-100页 |
| 5.4 讨论 | 第100-101页 |
| 5.5 小结 | 第101-104页 |
| 第6章 结论 | 第104-108页 |
| 参考文献 | 第108-126页 |
| 附录 | 第126-138页 |
| 致谢 | 第138-140页 |
| 攻读博士学位期间的研究成果 | 第140页 |
