| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 引言 | 第10-24页 |
| 一、肿瘤的发生机制 | 第10-13页 |
| (一)诱发肿瘤的外部因素 | 第10-11页 |
| (二)诱发肿瘤的内部因素 | 第11-12页 |
| (三)原癌基因致癌的分子机制 | 第12-13页 |
| 二、肿瘤的治疗 | 第13-16页 |
| (一)传统治疗 | 第13-14页 |
| (二)免疫治疗 | 第14-15页 |
| (三)分子靶向治疗 | 第15-16页 |
| 三、Cripto-1与肿瘤 | 第16-22页 |
| (一)Cripto-1简述 | 第16-17页 |
| (二)Cripto-1的表达调控 | 第17页 |
| (三)Cripto-1的生物学功能 | 第17-20页 |
| (四)Cripto-1与肿瘤的相关性 | 第20-22页 |
| 四、抗肿瘤药物的筛选 | 第22-23页 |
| (一)动物水平的药物筛选 | 第22页 |
| (二)细胞、分子水平的药物筛选 | 第22-23页 |
| 五、本研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第24-37页 |
| 一、实验材料 | 第24-27页 |
| (一)实验仪器 | 第24页 |
| (二)实验试剂及配制 | 第24-27页 |
| (三)实验材料 | 第27页 |
| 二、实验方法 | 第27-37页 |
| (一)Cripto-1mRNA3'UTR的调取 | 第27-30页 |
| (二)pGL3-Cripto-1mRNA3'UTR荧光素酶报告载体的构建 | 第30-31页 |
| (三)细胞培养 | 第31-32页 |
| (四)荧光素酶检测技术 | 第32页 |
| (五)抑制Cripto-1表达的化合物筛选 | 第32-33页 |
| (六)逆转录PCR(RT-PCR) | 第33页 |
| (七)MTT检测 | 第33-34页 |
| (八)免疫印迹分析(WesternBlot) | 第34页 |
| (九)Transwell侵袭实验 | 第34-35页 |
| (十)细胞划痕实验(WoundHealing) | 第35页 |
| (十一)BrdU掺入实验 | 第35页 |
| (十二)细胞凋亡检测 | 第35页 |
| (十三)细胞周期检测 | 第35-37页 |
| 第三部分 实验结果 | 第37-58页 |
| 一、pGL3-Cripto-1mRNA3'UTR荧光素酶报告载体的构建及鉴定 | 第37-39页 |
| (一)构建pGL3-Cripto-13'UTR的TA克隆质粒 | 第37-38页 |
| (二)pGL3-Cripto-13'UTR荧光素酶报告载体构建及鉴定 | 第38-39页 |
| 二、靶向Cripto-1mRNA3'UTR的化合物筛选 | 第39-47页 |
| (一)Cripto-1表达抑制剂的初步筛选 | 第39-45页 |
| (二)Cripto-1表达抑制剂的复筛 | 第45-46页 |
| (三)TI574对Cripto-1表达的影响 | 第46-47页 |
| 三、TI574的体外抗肿瘤活性研究 | 第47-56页 |
| (一)TI574对肿瘤细胞活力的影响 | 第47-48页 |
| (二)TI574对肿瘤细胞增殖能力的影响 | 第48-51页 |
| (三)TI574对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第51-54页 |
| (四)TI574对肿瘤细胞侵袭与迁移的影响 | 第54-56页 |
| 四、过表达Cripto-1对TI574体外抗肿瘤活性的影响 | 第56-58页 |
| 第四部分 讨论 | 第58-61页 |
| 第五部分 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
