| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-18页 |
| 一、糖尿病 | 第9-10页 |
| (一)糖尿病及其危害 | 第9页 |
| (二)糖尿病的病因 | 第9-10页 |
| (三)糖尿病的治疗 | 第10页 |
| 二、GLUT4研究进展 | 第10-15页 |
| (一)GLUT4基因简介 | 第11页 |
| (二)GLUT4蛋白简介 | 第11-12页 |
| (三)GLUT4基因的表达调控 | 第12-15页 |
| 三、GLUT4与胰岛素抵抗和2型糖尿病 | 第15-17页 |
| 四、本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第18-33页 |
| 一、实验材料 | 第18-22页 |
| (一)主要实验仪器 | 第18页 |
| (二)质粒与细胞株 | 第18页 |
| (三)实验试剂 | 第18-20页 |
| (四)试剂配制 | 第20-22页 |
| 二、实验方法 | 第22-33页 |
| (一)载体连接相关实验方法 | 第22-24页 |
| (二)GLUT4启动子的钓取 | 第24-25页 |
| (三)TA克隆 | 第25-26页 |
| (四)GLUT4启动子荧光素酶报告载体pGL3-GLUT4的构建 | 第26-28页 |
| (五)细胞培养及质粒的瞬时转染 | 第28-29页 |
| (六)荧光素酶报告活性及β-gal活性检测 | 第29-30页 |
| (七)GLUT4表达激活剂的筛选 | 第30-31页 |
| (八)蛋白免疫印迹分析(WesternBlot) | 第31-32页 |
| (九)2-NBDG检测葡萄糖的摄取 | 第32页 |
| (十)统计学分析 | 第32-33页 |
| 第三部分 实验结果 | 第33-54页 |
| 一、GLUT4启动子荧光素酶报告载体(pGL3-GLUT4)的构建及活性鉴定 | 第33-36页 |
| (一)pGL3-GLUT4荧光素酶报告载体的构建 | 第33-36页 |
| (二)pGL3-GLUT4的荧光素酶活性检测 | 第36页 |
| 二、基于GLUT4启动子活性的化合物的筛选 | 第36-50页 |
| (一)GLUT4转录激活剂的初步筛选 | 第36-48页 |
| (二)GLUT4转录激活剂的复筛 | 第48-50页 |
| 三、候选化合物促进GLUT4表达功能的确认 | 第50页 |
| 四、候选化合物促进GLUT4表达的分子机制研究 | 第50-53页 |
| (一)TI432对AMPK信号通路的影响 | 第50-51页 |
| (二)TI432通过激活AMPK信号通路来促进GLUT4的表达 | 第51-52页 |
| (三)TI432促进MEF2转录因子的功能 | 第52-53页 |
| 五、TI432促进胰岛素诱导的细胞对葡萄糖的摄取 | 第53-54页 |
| 第四部分 讨论 | 第54-56页 |
| 第五部分 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
