中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-25页 |
1.1 细胞周期与肿瘤 | 第15-19页 |
1.1.1 细胞周期蛋白对细胞周期的调控 | 第15-17页 |
1.1.2 CDK对细胞周期的调控 | 第17页 |
1.1.3 CKI对细胞周期的调控 | 第17-18页 |
1.1.4 Cds25对细胞周期的调控 | 第18-19页 |
1.2 细胞凋亡与肿瘤 | 第19-20页 |
1.2.1 细胞凋亡的特征 | 第19页 |
1.2.2 细胞凋亡的生物学意义 | 第19-20页 |
1.2.3 细胞凋亡的重要相关基因 | 第20页 |
1.3 肾细胞癌 | 第20-23页 |
1.4 肾细胞癌治疗现状 | 第23-24页 |
1.5 研究目的与意义 | 第24-25页 |
第2章 ANRIL在肾癌细胞和组织中的表达水平检测 | 第25-35页 |
2.1 材料与仪器 | 第25-27页 |
2.1.1 临床病例与病理资料 | 第25页 |
2.1.2 材料与试剂 | 第25-26页 |
2.1.3 主要仪器 | 第26页 |
2.1.4 溶液配制 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-32页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第27页 |
2.2.2 细胞培养 | 第27-28页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第28页 |
2.2.4 细胞消化与传代 | 第28页 |
2.2.5 实验细胞准备 | 第28-29页 |
2.2.6 q RT-PCR检测临床病理组织与细胞中ANRIL的RNA表达 | 第29-32页 |
2.3 结果 | 第32-33页 |
2.3.1 ANRIL在RCC病变组织及正常组织中的RNA表达水平 | 第32页 |
2.3.2 ANRIL在RCC细胞及正常细胞中的RNA表达水平 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
第3章 ANRIL对于肾癌细胞的影响 | 第35-51页 |
3.1 材料与仪器 | 第35-37页 |
3.1.1 载体 | 第35页 |
3.1.2 材料与试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.1.4 溶液配制 | 第36-37页 |
3.2 方法 | 第37-45页 |
3.2.1 细胞复苏 | 第37页 |
3.2.2 细胞培养 | 第37-38页 |
3.2.3 细胞冻存 | 第38页 |
3.2.4 细胞消化与传代 | 第38页 |
3.2.5 ANRIL过表达慢病毒载体的转染 | 第38-39页 |
3.2.6 si-ANRIL脂质体转染细胞 | 第39-40页 |
3.2.7 CCK-8 检测细胞活力 | 第40页 |
3.2.8 细胞集落数量检测 | 第40页 |
3.2.9 细胞凋亡相关蛋白westernblot检测 | 第40-42页 |
3.2.10 细胞转移能力检测 | 第42页 |
3.2.11 细胞侵袭能力检测 | 第42页 |
3.2.12 上皮向间质转移相关基因表达检测 | 第42-44页 |
3.2.13 上皮向间质转移相关蛋白检测 | 第44-45页 |
3.2.14 数据分析 | 第45页 |
3.3 结果 | 第45-48页 |
3.3.1 ANRIL对于肾癌细胞活力和凋亡的影响 | 第45-47页 |
3.3.2 ANRIL对于肾癌细胞转移和侵袭能力的影响 | 第47-48页 |
3.4 讨论 | 第48-51页 |
第4章 ANRIL影响肾癌细胞的作用机制 | 第51-63页 |
4.1 材料与仪器 | 第51-53页 |
4.1.1 材料与试剂 | 第51-52页 |
4.1.2 主要仪器 | 第52页 |
4.1.3 溶液配制 | 第52-53页 |
4.2 方法 | 第53-58页 |
4.2.1 细胞复苏 | 第53页 |
4.2.2 细胞培养 | 第53页 |
4.2.3 细胞冻存 | 第53-54页 |
4.2.4 细胞消化与传代 | 第54页 |
4.2.5 CCK-8 检测细胞活力 | 第54-55页 |
4.2.6 细胞通路蛋白westernblot检测 | 第55-56页 |
4.2.7 细胞转移能力检测 | 第56页 |
4.2.8 细胞侵袭能力检测 | 第56页 |
4.2.9 相关基因表达检测 | 第56-58页 |
4.2.10 数据分析 | 第58页 |
4.3 结果 | 第58-60页 |
4.3.1 ANRIL活化β-catenin通路 | 第58-59页 |
4.3.2 β-catenin通路抑制剂抑制ANRIL的致癌作用 | 第59-60页 |
4.4 讨论 | 第60-63页 |
第5章 RAC对于肾癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响 | 第63-71页 |
5.1 材料与仪器 | 第63-64页 |
5.1.1 材料与试剂 | 第63页 |
5.1.2 主要仪器 | 第63-64页 |
5.1.3 溶液配制 | 第64页 |
5.2 方法 | 第64-67页 |
5.2.1 细胞复苏 | 第64-65页 |
5.2.2 细胞培养 | 第65页 |
5.2.3 细胞冻存 | 第65页 |
5.2.4 细胞消化与传代 | 第65-66页 |
5.2.5 细胞活力检测(MTT) | 第66页 |
5.2.6 细胞周期检测 | 第66页 |
5.2.7 细胞凋亡检测 | 第66-67页 |
5.2.8 数据分析 | 第67页 |
5.3 结果 | 第67-69页 |
5.3.1 RAC抑制RCC细胞的生长 | 第67-68页 |
5.3.2 RAC引起RCC的细胞周期停留 | 第68-69页 |
5.3.3 RAC诱导RCC细胞凋亡 | 第69页 |
5.4 讨论 | 第69-71页 |
第6章 RAC影响肾癌细胞的作用机理 | 第71-79页 |
6.1 材料与仪器 | 第71-74页 |
6.1.1 临床病例与病理资料 | 第71-72页 |
6.1.2 材料与试剂 | 第72-73页 |
6.1.3 主要仪器 | 第73页 |
6.1.4 溶液配制 | 第73-74页 |
6.2 方法 | 第74-76页 |
6.2.1 组织内蛋白westernblot检测 | 第74-75页 |
6.2.2 组织的免疫组化染色 | 第75-76页 |
6.3 结果 | 第76-77页 |
6.3.1 肾细胞瘤组中的Notch1和Jagged1表达量显著上调 | 第76页 |
6.3.2 免疫组化检测 | 第76-77页 |
6.4 讨论 | 第77-79页 |
第7章 结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-93页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第93-95页 |
致谢 | 第95-96页 |