| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-9页 |
| 主要缩写词 | 第13-15页 |
| 1 绪论 | 第15-27页 |
| 1.1 问题的提出 | 第15页 |
| 1.2 国内外动脉粥样硬化相关研究现状 | 第15-21页 |
| 1.2.1 低密度脂蛋白是AS发生的重要因素 | 第16-17页 |
| 1.2.2 切应力对AS发生发展的影响 | 第17-20页 |
| 1.2.3 蛋白组在动脉粥样硬化研究中的应用 | 第20-21页 |
| 1.3 Id1可能参与切应力调控的脂质吸收过程 | 第21-22页 |
| 1.4 研究思路和主要内容 | 第22-26页 |
| 1.4.1 研究思路 | 第22-23页 |
| 1.4.2 主要内容 | 第23-25页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第25-26页 |
| 1.5 本文的创新点 | 第26-27页 |
| 2 低震荡切应力模型血管的蛋白组学分析 | 第27-47页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 材料与方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 ApoE~(-/-)小鼠颈动脉低震荡切应力模型构建 | 第28-30页 |
| 2.2.3 血管组织分离及蛋白提取 | 第30-31页 |
| 2.2.4 样品前处理及完整性检测 | 第31页 |
| 2.2.5 统计分析 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-45页 |
| 2.3.1 ApoE~(-/-)小鼠颈动脉结扎手术后左侧颈动脉形成低震荡切应力 | 第31-32页 |
| 2.3.2 不同力学条件下的血管组织蛋白样品制备 | 第32页 |
| 2.3.3 蛋白浓度完整性测定 | 第32-33页 |
| 2.3.4 差异蛋白鉴定 | 第33-34页 |
| 2.3.5 差异表达蛋白与大分子代谢、脂质代谢及吸收、炎症反应等生物学过程密切相关 | 第34-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 3 低震荡切应力引起脂质堆积促进AS斑块形成 | 第47-63页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 材料和方法 | 第47-53页 |
| 3.2.1 材料 | 第47-49页 |
| 3.2.2 血液指标检测 | 第49页 |
| 3.2.3 斑块的形态学表征 | 第49-50页 |
| 3.2.4 血管及细胞内脂质吸收检测 | 第50-51页 |
| 3.2.5 体外切应力加载装置 | 第51-52页 |
| 3.2.6 细胞免疫荧光染色 | 第52页 |
| 3.2.7 单核细胞粘附实验 | 第52-53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-61页 |
| 3.3.1 ApoE~(-/-)小鼠颈动脉结扎手术后左侧颈动脉形成低震荡切应力 | 第53-54页 |
| 3.3.2 结扎手术形成的低震荡切应力对血浆脂蛋白含量没有显著影响 | 第54-56页 |
| 3.3.3 结扎手术形成的OSS促进斑块形成 | 第56-57页 |
| 3.3.4 体内OSS促进血管脂质堆积及血管内皮细胞脂质吸收 | 第57-58页 |
| 3.3.5 体外加载OSS促进人脐静脉内皮细胞脂质吸收 | 第58-60页 |
| 3.3.6 OSS处理及随后的LDL吸收促进内皮细胞增殖及粘附 | 第60-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-62页 |
| 3.5 小结 | 第62-63页 |
| 4 Id1参与低震荡切应力引起的脂质吸收过程 | 第63-81页 |
| 4.1 引言 | 第63-64页 |
| 4.2 材料与方法 | 第64-70页 |
| 4.2.1 材料 | 第64-66页 |
| 4.2.2 在体enface染色 | 第66页 |
| 4.2.3 蛋白质免疫印迹(Westernblot) | 第66-67页 |
| 4.2.4 Id1过表达慢病毒载体构建 | 第67-70页 |
| 4.3 结果 | 第70-79页 |
| 4.3.1 结扎手术形成的OSS抑制Id1的表达 | 第70-72页 |
| 4.3.2 体外加载的低震荡切应力抑制HUVECs中Id1蛋白的表达 | 第72-73页 |
| 4.3.3 Id1过表达细胞鉴定 | 第73-74页 |
| 4.3.4 Id1过表达可以抑制低震荡切应力引起的脂质吸收过程 | 第74-76页 |
| 4.3.5 IPA预测动脉粥样硬化疾病中与Id1有相互调控作用的分子 | 第76-79页 |
| 4.4 讨论 | 第79-80页 |
| 4.5 小结 | 第80-81页 |
| 5 Id1通过调控LDLR的表达参与低震荡切应力引起的内皮脂质吸收过程 | 第81-101页 |
| 5.1 引言 | 第81页 |
| 5.2 材料与方法 | 第81-86页 |
| 5.2.1 材料 | 第81-82页 |
| 5.2.2 干扰细胞构建 | 第82-83页 |
| 5.2.3 荧光定量PCR | 第83-84页 |
| 5.2.4 免疫共沉淀 | 第84-85页 |
| 5.2.5 荧光共定位 | 第85-86页 |
| 5.3 结果 | 第86-98页 |
| 5.3.1 Id1负调控LDLR蛋白的表达 | 第86-88页 |
| 5.3.2 Id1通过调控LDLR的表达影响内皮细胞对LDL的吸收。 | 第88-91页 |
| 5.3.3 OSS促进LDLR蛋白的表达 | 第91-93页 |
| 5.3.4 OSS处理后内皮细胞中Id1和LDLR的蛋白表达模式相反 | 第93-95页 |
| 5.3.5 OSS通过Id1调控LDLR的表达 | 第95-96页 |
| 5.3.6 Id1与SREBP1存在相互作用 | 第96-98页 |
| 5.4 讨论 | 第98-99页 |
| 5.5 小结 | 第99-101页 |
| 6 结论与展望 | 第101-103页 |
| 6.1 主要结论 | 第101-102页 |
| 6.2 存在的不足和后续研究工作的建议 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-119页 |
| 附录 | 第119页 |
| A.作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第119页 |
| B.作者在攻读博士学位期间参与的科研项目 | 第119页 |
