致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
常用中英文缩写词 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-17页 |
引言 | 第17-18页 |
1 材料与方法 | 第18-30页 |
1.1 材料 | 第18-21页 |
1.1.1 病毒和实验动物来源 | 第18页 |
1.1.2 质粒和感受态细胞 | 第18页 |
1.1.3 相关实验试剂 | 第18页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第18-21页 |
1.1.5 主要实验仪器 | 第21页 |
1.2 方法 | 第21-30页 |
1.2.1 VP1-N15和VP2基因引物设计 | 第21-22页 |
1.2.2 VP1-N15和VP2基因扩增 | 第22页 |
1.2.3 VP1-N15和VP2基因胶回收 | 第22-23页 |
1.2.4 pMD18-T/VP1-N15和pMD18-T/VP2重组质粒的构建 | 第23-24页 |
1.2.5 VP1-N15和VP2原核表达重组质粒的构建 | 第24-25页 |
1.2.6 VP1-N15-His和VP2-His融合蛋白的表达及条件优化 | 第25-26页 |
1.2.7 VP1-N15-His和VP2-His融合蛋白表达形式的鉴定 | 第26页 |
1.2.8 融合蛋白的大量提取与纯化 | 第26-27页 |
1.2.9 动物免疫 | 第27页 |
1.2.10 抗体水平检测 | 第27-28页 |
1.2.11 VP2真核表达重组质粒的构建 | 第28页 |
1.2.12 细胞转染及Western blotting检测 | 第28-30页 |
2 结果与分析 | 第30-37页 |
2.1 VP1-N15和VP2基因克隆与序列分析结果 | 第30页 |
2.2 pET-32a/VP1-N15和pET-32a/VP2重组质粒的构建 | 第30-31页 |
2.3 VP1-N15-His和VP2-His重组蛋白的表达及优化条件 | 第31-33页 |
2.4 VP1-N15-His和VP2-His重组蛋白的表达形式鉴定及纯化 | 第33-34页 |
2.5 抗体水平及特异性检测 | 第34-35页 |
2.5.1 间接ELISA检测抗体水平 | 第34页 |
2.5.2 VP1-N15-His和VP2-His重组蛋白的免疫原性 | 第34-35页 |
2.6 应用VP2多克隆抗体检测VP2蛋白的表达 | 第35-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
4 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
作者简介 | 第44页 |