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茶皂素抑制奶牛源耐药金葡菌生物被膜的机制研究

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩写词表第9-12页
1.文献综述第12-18页
    1.1 奶牛乳房炎研究概述第12-13页
    1.2 金黄色葡萄球菌耐药性研究概述第13-15页
    1.3 生物被膜概述第15-16页
    1.4 茶皂素概述第16-18页
2 引言第18-20页
    2.1 研究目的及意义第18页
    2.2 国内外研究进展第18-19页
    2.3 研究内容和方法第19页
        2.3.1 金黄色葡萄球菌临床分离株的药敏试验第19页
        2.3.2 金黄色葡萄球菌生物被膜体外成膜最佳时间摸索第19页
        2.3.3 不同浓度茶皂素对SA2成生物被膜的影响第19页
        2.3.4 金黄色葡萄球菌生物被膜调控基因的探寻第19页
        2.3.5 茶皂素对金黄色葡萄球菌成生物被膜的调控研究第19页
    2.4 技术路线第19-20页
3 实验材料和方法第20-33页
    3.1 主要材料第20-22页
        3.1.1 实验菌株第20页
        3.1.2 主要试剂和试剂盒第20-21页
        3.1.3 培养基和常用试剂的配制第21页
        3.1.4 实验仪器第21-22页
    3.2 实验方法第22-33页
        3.2.1 SA2革兰氏染色第22页
        3.2.2 SA2药敏试验第22-23页
        3.2.3 SA2耐药基因的确定第23-26页
        3.2.4 SA2生物被膜成膜实验第26页
        3.2.5 SA2生长曲线的测定第26-27页
        3.2.6 SA2成生物被膜基因的检测第27页
        3.2.7 激光共聚焦显微镜观察细菌加药前后成生物膜情况第27-29页
        3.2.8 荧光定量PCR第29-33页
4 结果与分析第33-43页
    4.1 革兰氏染色第33页
    4.2 二倍稀释法检测SA2最小抑菌浓度(MIC)第33页
    4.3 SA2耐药基因检测第33-36页
    4.4 SA2生物膜成膜情况第36-38页
        4.4.1 SA2生物膜成膜最佳时间第36-37页
        4.4.2 不同浓度茶皂素溶液对金葡菌分离株SA2的成膜影响第37-38页
    4.5 SA2生长曲线的绘制第38-39页
    4.6 SA2成膜基因的检测第39-40页
    4.7 激光共聚焦显微镜观察SA2加药前后成生物膜情况第40-41页
        4.7.1 8325 质粒的提取第40页
        4.7.2 SA2电转荧光质粒后显微镜检第40页
        4.7.3 激光共聚焦显微镜图片第40-41页
    4.8 荧光定量PCR分析icaA在加100μg/ml茶皂素前后表达量的变化第41-43页
        4.8.1 SA2RNA的提取第41-42页
        4.8.2 RT-qPCR对icaA转录水平的检测第42-43页
5.讨论第43-45页
    5.1 金黄色葡萄球菌耐药现状第43页
    5.2 金黄色葡萄球菌生物被膜最适成膜时间的确立第43页
    5.3 茶皂素对金黄色葡萄球菌临床分离株的影响第43页
    5.4 激光共聚焦显微镜下发现茶皂素影响金黄色葡萄球菌生物被膜的形成第43页
    5.5 金黄色葡萄球菌生物被膜调控基因的研究第43-44页
    5.6 茶皂素对金黄色葡萄球菌生物被膜基因表达的调控第44-45页
6 结论第45-46页
参考文献第46-52页
作者简介第52-53页
附在校读研期间发表的学术论文第53页

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