| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·Foxp3简介 | 第12-19页 |
| ·Foxp3与FOX家族 | 第12页 |
| ·小鼠Foxp3结构分析 | 第12-13页 |
| ·Foxp3与Treg细胞 | 第13-17页 |
| ·Treg细胞与临床 | 第17-19页 |
| ·PTD简介 | 第19-22页 |
| ·蛋白转导域种类与结构 | 第19-20页 |
| ·HIV-1中TAT PTD的转导特点 | 第20-22页 |
| 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第22-24页 |
| ·研究目的、方法 | 第22页 |
| ·实验方案的设计 | 第22页 |
| ·本研究的意义 | 第22-24页 |
| 第三章 实验材料 | 第24-27页 |
| ·细胞系 | 第24页 |
| ·实验质粒和菌株 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·其他试剂及材料 | 第24页 |
| ·实验动物 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要溶液 | 第25-27页 |
| 第四章 实验方法 | 第27-40页 |
| ·融合蛋白的制备 | 第27-29页 |
| ·Rosetta感受态的制备 | 第27页 |
| ·PTD-eGFP-Foxp3质粒转化 | 第27-28页 |
| ·PTD-eGFP-Foxp3融合蛋白的诱导表达 | 第28页 |
| ·PTD-eGFP-Foxp3融合蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·蛋白质的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白浓度的测定(Bradford法) | 第29页 |
| ·融合蛋白穿膜功能实验 | 第29页 |
| ·融合蛋白定位实验 | 第29-30页 |
| ·激光共聚焦显微镜观测穿膜蛋白在细胞内的定位 | 第29-30页 |
| ·Western Blot分析 | 第30页 |
| ·融合蛋白的细胞毒性试验 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白的增殖抑制实验 | 第31-33页 |
| ·磁珠法分离CD4~+T,CD4~+CD25~-T,CD4~+CD25~+T细胞。 | 第31-32页 |
| ·刺激剂浓度的确定 | 第32页 |
| ·标本的收集及CD4+CD25~-T淋巴细胞增殖能力测定 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白对CD4~+CD25~-T细胞分泌的细胞因子RNA水平的检测 | 第33-38页 |
| ·标准质粒的构建 | 第33-37页 |
| ·不同时间细胞分泌的细胞因子条件的摸索 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白对CD4~+CD25~-T细胞分泌的细胞因子的检测 | 第38-39页 |
| ·标本的收集 | 第38页 |
| ·ELISA检测标本 | 第38-39页 |
| ·融合蛋白转导的CD4~+CD25~-T细胞对效应细胞的增殖抑制实验 | 第39页 |
| ·融合蛋白转导的CD4~+CD25~-T细胞表面标志的变化 | 第39页 |
| ·统计学处理 | 第39-40页 |
| 第五章 实验结果与讨论 | 第40-53页 |
| ·PTD-eGFP-Foxp3,PTD-Foxp3,PTD-eGFP,Foxp3融合蛋白的诱导表达纯化 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白的穿膜定位试验 | 第41-43页 |
| ·流式细胞仪分析PTD-eGFP-Foxp3融合蛋白的穿膜试验 | 第41页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察PTD-eGFP-Foxp3融合蛋白的定位试验 | 第41-42页 |
| ·Western Blot鉴定PTD-Foxp3融合蛋白的定位试验 | 第42-43页 |
| ·融合蛋白的毒性试验 | 第43页 |
| ·融合蛋白对细胞的增殖抑制试验 | 第43-44页 |
| ·OVA_(323-339)浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白的细胞增殖抑制试验 | 第44页 |
| ·融合蛋白对CD4~+CD25~-T细胞分泌的细胞因子的影响 | 第44-48页 |
| ·构建标准质粒 | 第45页 |
| ·不同时间各细胞因子的分泌情况 | 第45-46页 |
| ·Real time PCR测定mRNA水平融合蛋白处理的CD4~+CD25~-T细胞分泌的细胞因子 | 第46-47页 |
| ·ELISA测定检测上清中融合蛋白处理的细胞分泌的细胞因子 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白转导的CD4~+CD25~-T细胞功能 | 第48-50页 |
| ·融合蛋白转导的CD4~+CD25~-T细胞对效应细胞的增殖抑制试验 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白转导的CD4~+CD25~-T细胞表面标志的变化 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 第六章 主要结论及展望 | 第53-54页 |
| ·主要结论 | 第53页 |
| ·展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 英文缩写索引 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位发表的学术论文 | 第63页 |
