| 致谢 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 志贺菌概况 | 第10-11页 |
| 1.2 志贺菌病的流行病学 | 第11页 |
| 1.3 志贺菌的致病机制 | 第11-14页 |
| 1.3.1 志贺菌侵入肠上皮细胞 | 第11-12页 |
| 1.3.2 志贺菌的毒力相关基因 | 第12-14页 |
| 1.4 志贺菌IpaC蛋白 | 第14-15页 |
| 1.5 蛋白质的相互作用 | 第15-19页 |
| 1.5.1 酵母双杂交技术 | 第15-17页 |
| 1.5.2 串联亲和纯化 | 第17-18页 |
| 1.5.3 免疫共沉淀(Co-IP) | 第18页 |
| 1.5.4 噬菌体展示技术(Phage display techniques,PDT) | 第18-19页 |
| 1.5.5 GSTpull-down技术 | 第19页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 2 鸡源志贺菌IpaC基因的原核表达及蛋白纯化 | 第20-30页 |
| 引言 | 第20页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-26页 |
| 2.1.1 菌株、引物 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.4 培养基配制 | 第21页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第21-23页 |
| 2.1.6 重组表达菌的复苏和培养 | 第23页 |
| 2.1.7 重组表达菌IpaC基因片段的鉴定 | 第23-24页 |
| 2.1.8 重组融合蛋白的诱导与表达 | 第24页 |
| 2.1.9 重组融合蛋白的纯化 | 第24页 |
| 2.1.10 重组融合蛋白的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.1.11 蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-28页 |
| 2.2.1 IpaC基因片段的鉴定 | 第26页 |
| 2.2.2 IpaC蛋白SDS-PAGE和Western blot结果 | 第26-27页 |
| 2.2.3 蛋白浓度测定结果 | 第27-28页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第28-30页 |
| 2.3.1 结论 | 第28页 |
| 2.3.2 讨论 | 第28-30页 |
| 3 鸡肠上皮细胞的培养及膜蛋白的提取 | 第30-39页 |
| 引言 | 第30页 |
| 3.1 材料与方法 | 第30-33页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第30-31页 |
| 3.1.5 鸡肠上皮细胞的培养 | 第31页 |
| 3.1.6 鸡肠上皮细胞的鉴定 | 第31-32页 |
| 3.1.7 鸡肠上皮细胞膜蛋白的提取 | 第32-33页 |
| 3.1.8 鸡肠上皮细胞膜蛋白浓度的测定 | 第33页 |
| 3.1.9 鸡肠上皮细胞膜蛋白的SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定 | 第33页 |
| 3.2 结果与分析 | 第33-35页 |
| 3.2.1 酶消化法分离的肠隐窝单位观察 | 第33页 |
| 3.2.2 倒置显微镜下观察细胞生长状态 | 第33-34页 |
| 3.2.3 鸡肠上皮细胞碱性磷酸酶染色结果 | 第34页 |
| 3.2.4 鸡肠上皮细胞膜蛋白的浓度测定 | 第34页 |
| 3.2.5 鸡肠上皮细胞膜蛋白的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第35-39页 |
| 3.3.1 结论 | 第35页 |
| 3.3.2 讨论 | 第35-39页 |
| 4 鸡源志贺菌IpaC蛋白受体的筛选 | 第39-46页 |
| 引言 | 第39页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.3 蛋白的生物素标记 | 第39-40页 |
| 4.1.4 生物素标记蛋白的鉴定 | 第40页 |
| 4.1.5 免疫沉淀 | 第40页 |
| 4.1.6 沉淀物的SDS-PAGE分离和Western blot鉴定 | 第40-41页 |
| 4.1.7 质谱鉴定和生物信息学分析 | 第41页 |
| 4.2 结果与分析 | 第41-43页 |
| 4.2.1 生物素标记蛋白的鉴定 | 第41页 |
| 4.2.2 免疫沉淀物的SDS-PAGE分离和Western blot鉴定 | 第41-42页 |
| 4.2.3 质谱鉴定和生物信息学分析结果 | 第42-43页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第43-46页 |
| 4.3.1 结论 | 第43-46页 |
| 全文总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| ABSTRACT | 第57-58页 |
