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鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330单克隆抗体的制备及调控研究

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-11页
主要符号表第15-16页
文献综述第16-21页
引言第21-22页
1 材料与方法第22-38页
    1.1 实验材料第22-24页
        1.1.1 试验菌株及质粒第22页
        1.1.2 细胞及实验动物第22页
        1.1.3 主要酶与试剂第22-23页
        1.1.4 主要仪器设备第23页
        1.1.5 培养基和缓冲液配制第23-24页
    1.2 方法第24-38页
        1.2.1 M949_RS06330基因的生物信息学分析第24-25页
        1.2.2 M949_RS06330基因的原核表达第25-30页
        1.2.3 M949_RS06330单克隆抗体的制备第30-35页
        1.2.4 M949_RS06330基因的调控研究第35-38页
2 结果第38-54页
    2.1 M949_RS06330基因序列的生物信息学分析第38-45页
        2.1.1 M949_RS06330同源蛋白多重序列比对第38-39页
        2.1.2 鸭疫里默氏杆菌临床分离株序列比对第39-43页
        2.1.3 不同种属间M949_RS06330同源蛋白多重序列比对第43-45页
    2.2 pET28a_M949_RS06330原核表达载体的构建第45-47页
        2.2.1 M949_RS06330基因的扩增产物第45-46页
        2.2.2 pET28a-M949_RS06330原核表达质粒的鉴定第46-47页
        2.2.3 重组质粒pET28a-M949_RS06330的蛋白表达第47页
    2.3 .单克隆抗体的制备第47-50页
        2.3.1 M949_RS06330重组蛋白的大量表达第47-48页
        2.3.2 M949_RS06330重组蛋白的纯化第48页
        2.3.3 M949_RS06330单克隆抗体细胞株的制备第48页
        2.3.4 Ig类及亚型测定第48页
        2.3.5 单抗腹水的效价检测第48-49页
        2.3.6 腹水单克隆抗体的特异性鉴定第49-50页
    2.4 荧光定量PCR检测四环素类药物对M949_RS06320、M949_RS06325、M949_RS06330表达的影响第50-53页
        2.4.1 替加环素对三种基因表达的影响第50-51页
        2.4.2 四环素对三种基因表达的影响第51-53页
    2.5 WesternBlot检测替加环素和四环素对M949_RS06330蛋白表达的影响第53-54页
        2.5.1 .替加环素对M949_RS06330蛋白表达的影响第53页
        2.5.2 .四环素对M949_RS06330蛋白表达的影响第53-54页
3 讨论第54-57页
    3.1 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330的生物信息学分析第54页
    3.2 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330的原核表达第54-55页
    3.3 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330单克隆抗体的制备第55页
    3.4 四环素类药物对M949_RS06330基因的诱导调控作用第55-57页
4 结论第57-58页
参考文献第58-64页
作者简介第64页

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