致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
主要符号表 | 第15-16页 |
文献综述 | 第16-21页 |
引言 | 第21-22页 |
1 材料与方法 | 第22-38页 |
1.1 实验材料 | 第22-24页 |
1.1.1 试验菌株及质粒 | 第22页 |
1.1.2 细胞及实验动物 | 第22页 |
1.1.3 主要酶与试剂 | 第22-23页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第23页 |
1.1.5 培养基和缓冲液配制 | 第23-24页 |
1.2 方法 | 第24-38页 |
1.2.1 M949_RS06330基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
1.2.2 M949_RS06330基因的原核表达 | 第25-30页 |
1.2.3 M949_RS06330单克隆抗体的制备 | 第30-35页 |
1.2.4 M949_RS06330基因的调控研究 | 第35-38页 |
2 结果 | 第38-54页 |
2.1 M949_RS06330基因序列的生物信息学分析 | 第38-45页 |
2.1.1 M949_RS06330同源蛋白多重序列比对 | 第38-39页 |
2.1.2 鸭疫里默氏杆菌临床分离株序列比对 | 第39-43页 |
2.1.3 不同种属间M949_RS06330同源蛋白多重序列比对 | 第43-45页 |
2.2 pET28a_M949_RS06330原核表达载体的构建 | 第45-47页 |
2.2.1 M949_RS06330基因的扩增产物 | 第45-46页 |
2.2.2 pET28a-M949_RS06330原核表达质粒的鉴定 | 第46-47页 |
2.2.3 重组质粒pET28a-M949_RS06330的蛋白表达 | 第47页 |
2.3 .单克隆抗体的制备 | 第47-50页 |
2.3.1 M949_RS06330重组蛋白的大量表达 | 第47-48页 |
2.3.2 M949_RS06330重组蛋白的纯化 | 第48页 |
2.3.3 M949_RS06330单克隆抗体细胞株的制备 | 第48页 |
2.3.4 Ig类及亚型测定 | 第48页 |
2.3.5 单抗腹水的效价检测 | 第48-49页 |
2.3.6 腹水单克隆抗体的特异性鉴定 | 第49-50页 |
2.4 荧光定量PCR检测四环素类药物对M949_RS06320、M949_RS06325、M949_RS06330表达的影响 | 第50-53页 |
2.4.1 替加环素对三种基因表达的影响 | 第50-51页 |
2.4.2 四环素对三种基因表达的影响 | 第51-53页 |
2.5 WesternBlot检测替加环素和四环素对M949_RS06330蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
2.5.1 .替加环素对M949_RS06330蛋白表达的影响 | 第53页 |
2.5.2 .四环素对M949_RS06330蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-57页 |
3.1 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330的生物信息学分析 | 第54页 |
3.2 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330的原核表达 | 第54-55页 |
3.3 鸭疫里默氏杆菌四环素耐药基因M949_RS06330单克隆抗体的制备 | 第55页 |
3.4 四环素类药物对M949_RS06330基因的诱导调控作用 | 第55-57页 |
4 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
作者简介 | 第64页 |