摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第11-26页 |
1.1 杆菌肽简述 | 第11-15页 |
1.1.1 杆菌肽的结构 | 第11-12页 |
1.1.2 杆菌肽的抑菌机理 | 第12页 |
1.1.3 杆菌肽的生物合成机制 | 第12-14页 |
1.1.4 杆菌肽的应用 | 第14-15页 |
1.2 杆菌肽的高产策略 | 第15-18页 |
1.2.1 杆菌肽高产菌株育种 | 第15-16页 |
1.2.2 杆菌肽发酵工艺优化 | 第16-18页 |
1.3 支链氨基酸的生物合成及其代谢调控 | 第18-24页 |
1.3.1 支链氨基酸的生物合成途径 | 第18-19页 |
1.3.2 支链氨基酸合成的关键酶 | 第19-21页 |
1.3.3 支链氨基酸转运途径 | 第21-22页 |
1.3.4 支链氨基酸的代谢调控 | 第22-24页 |
1.4 本课题的目的和意义 | 第24-26页 |
第2章 材料和方法 | 第26-37页 |
2.1 实验材料 | 第26-30页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第26-27页 |
2.1.2 PCR引物 | 第27-28页 |
2.1.3 工具酶和试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 培养基配方及培养条件 | 第29页 |
2.1.5 主要仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-37页 |
2.2.1 分子生物学方法 | 第30-32页 |
2.2.2 大肠杆菌重组质粒的构建 | 第32页 |
2.2.3 地衣芽胞杆菌工程菌的构建 | 第32-33页 |
2.2.4 发酵培养条件 | 第33页 |
2.2.5 杆菌肽效价测定 | 第33页 |
2.2.6 氨基酸检测 | 第33-34页 |
2.2.7 转录水平检测 | 第34-36页 |
2.2.8 数据处理 | 第36-37页 |
第3章 结果和分析 | 第37-58页 |
3.1 外源添加支链氨基酸对地衣芽胞杆菌DW2杆菌肽合成的影响 | 第37-39页 |
3.2 强化支链氨基酸合成途径关键基因对杆菌肽产量的影响 | 第39-46页 |
3.2.1 地衣芽胞杆菌游离表达工程菌的构建与发酵 | 第39-42页 |
3.2.2 基因ilvB整合表达工程菌的构建与发酵 | 第42-46页 |
3.3 支链氨基酸转运蛋白YhdG对杆菌肽产量的影响 | 第46-52页 |
3.3.1 基因yhdG游离表达工程菌和缺失工程菌的构建 | 第46-49页 |
3.3.2 基因yhdG游离表达工程菌和缺失工程菌的发酵 | 第49-52页 |
3.4 削弱支链氨基酸旁路途径甲硫氨酸合成途径对杆菌肽产量的影响 | 第52-53页 |
3.5 工程菌DW2::ilvB△yhdG菌株构建和杆菌肽发酵特性 | 第53-58页 |
3.5.1 工程菌DW2::ilvB△yhdG菌株构建和杆菌肽检测 | 第53-54页 |
3.5.2 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵过程中的支链氨基酸变化 | 第54-55页 |
3.5.3 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵过程中的生物量和杆菌肽效价变化 | 第55-56页 |
3.5.4 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵培养基的豆粕浓度优化 | 第56-58页 |
第4章 讨论与展望 | 第58-61页 |
4.1 讨论 | 第58-60页 |
4.2 展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第70页 |