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通过改造地衣芽胞杆菌支链氨基酸合成和转运途径提高杆菌肽产量

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 绪论第11-26页
    1.1 杆菌肽简述第11-15页
        1.1.1 杆菌肽的结构第11-12页
        1.1.2 杆菌肽的抑菌机理第12页
        1.1.3 杆菌肽的生物合成机制第12-14页
        1.1.4 杆菌肽的应用第14-15页
    1.2 杆菌肽的高产策略第15-18页
        1.2.1 杆菌肽高产菌株育种第15-16页
        1.2.2 杆菌肽发酵工艺优化第16-18页
    1.3 支链氨基酸的生物合成及其代谢调控第18-24页
        1.3.1 支链氨基酸的生物合成途径第18-19页
        1.3.2 支链氨基酸合成的关键酶第19-21页
        1.3.3 支链氨基酸转运途径第21-22页
        1.3.4 支链氨基酸的代谢调控第22-24页
    1.4 本课题的目的和意义第24-26页
第2章 材料和方法第26-37页
    2.1 实验材料第26-30页
        2.1.1 菌株和质粒第26-27页
        2.1.2 PCR引物第27-28页
        2.1.3 工具酶和试剂第28-29页
        2.1.4 培养基配方及培养条件第29页
        2.1.5 主要仪器第29-30页
    2.2 实验方法第30-37页
        2.2.1 分子生物学方法第30-32页
        2.2.2 大肠杆菌重组质粒的构建第32页
        2.2.3 地衣芽胞杆菌工程菌的构建第32-33页
        2.2.4 发酵培养条件第33页
        2.2.5 杆菌肽效价测定第33页
        2.2.6 氨基酸检测第33-34页
        2.2.7 转录水平检测第34-36页
        2.2.8 数据处理第36-37页
第3章 结果和分析第37-58页
    3.1 外源添加支链氨基酸对地衣芽胞杆菌DW2杆菌肽合成的影响第37-39页
    3.2 强化支链氨基酸合成途径关键基因对杆菌肽产量的影响第39-46页
        3.2.1 地衣芽胞杆菌游离表达工程菌的构建与发酵第39-42页
        3.2.2 基因ilvB整合表达工程菌的构建与发酵第42-46页
    3.3 支链氨基酸转运蛋白YhdG对杆菌肽产量的影响第46-52页
        3.3.1 基因yhdG游离表达工程菌和缺失工程菌的构建第46-49页
        3.3.2 基因yhdG游离表达工程菌和缺失工程菌的发酵第49-52页
    3.4 削弱支链氨基酸旁路途径甲硫氨酸合成途径对杆菌肽产量的影响第52-53页
    3.5 工程菌DW2::ilvB△yhdG菌株构建和杆菌肽发酵特性第53-58页
        3.5.1 工程菌DW2::ilvB△yhdG菌株构建和杆菌肽检测第53-54页
        3.5.2 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵过程中的支链氨基酸变化第54-55页
        3.5.3 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵过程中的生物量和杆菌肽效价变化第55-56页
        3.5.4 工程菌DW2::ilvB△yhdG发酵培养基的豆粕浓度优化第56-58页
第4章 讨论与展望第58-61页
    4.1 讨论第58-60页
    4.2 展望第60-61页
参考文献第61-69页
致谢第69-70页
攻读硕士学位期间的研究成果第70页

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