| 致谢 | 第4-9页 |
| 缩略词表Abbreviation | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 枣疯病研究现状 | 第11-12页 |
| 1.1 枣疯病病原及感病症状 | 第11页 |
| 1.2 枣疯病抗病机制的研究 | 第11-12页 |
| 2 WRKY转录因子家族研究进展 | 第12-17页 |
| 2.1 植物转录因子概念 | 第12页 |
| 2.2 WRKY家族转录因子 | 第12-13页 |
| 2.2.1 WRKY转录因子的结构与分类 | 第12页 |
| 2.2.2 WRKY转录因子的进化 | 第12-13页 |
| 2.3 WRKY转录因子功能研究 | 第13-17页 |
| 2.3.1 WRKY转录因子参与植物生长发育进程 | 第13页 |
| 2.3.2 WRKY转录因子参与植物激素信号通路途径 | 第13-14页 |
| 2.3.3 WRKY转录因子参与调控植物生物胁迫与非生物胁迫 | 第14-17页 |
| 2.3.3.1 生物胁迫 | 第14-15页 |
| 2.3.3.2 非生物胁迫 | 第15-17页 |
| 第二章 枣WRKY转录因子的基因组分析 | 第17-37页 |
| 1 前言 | 第17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-21页 |
| 2.1 试验材料 | 第17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-18页 |
| 2.2.1 嫁接方法 | 第17页 |
| 2.2.2 取样方法 | 第17页 |
| 2.2.3 改良CTAB法提取枣叶片DNA | 第17-18页 |
| 2.2.4 PCR鉴定 | 第18页 |
| 2.3 枣转录组测序 | 第18-19页 |
| 2.3.1 植原体侵染不同时期鉴定 | 第18页 |
| 2.3.2 枣叶片RNA提取 | 第18-19页 |
| 2.3.3 转录组测序 | 第19页 |
| 2.4 枣WRKY家族转录因子的基因组分析 | 第19页 |
| 2.4.1 枣假定WRKY转录因子的识别 | 第19页 |
| 2.4.2 枣WRKY家族的进化树分析及染色体定位 | 第19页 |
| 2.4.3 枣WRKY转录蛋白的保守区域比对及基序分析 | 第19页 |
| 2.4.4 枣WRKY转录因子家族基因在枣疯病发病过程中的差异表达 | 第19页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR分析 | 第19-21页 |
| 2.5.1 cDNA第一条链的合成 | 第20页 |
| 2.5.2 荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.6 水杨酸和茉莉酸甲酯胁迫处理 | 第21页 |
| 2.6.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.6.2 试验方法 | 第21页 |
| 2.6.3 RNA提取 | 第21页 |
| 2.6.4 cDNA第一条链合成 | 第21页 |
| 2.6.5 荧光定量PCR | 第21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-33页 |
| 3.1 枣WRKY转录因子家族成员鉴定与命名 | 第21-24页 |
| 3.2 枣WRKY转录因子与拟南芥WRKY家族的进化树分析及其分类 | 第24-25页 |
| 3.3 枣WRKY转录因子的染色体定位 | 第25-26页 |
| 3.4 枣WRKY转录因子的保守结构域及基序分析 | 第26-30页 |
| 3.5 枣WRKY转录因子在植原体胁迫下的差异表达分析 | 第30-31页 |
| 3.6 差异表达基因的实时荧光定量PCR分析 | 第31-32页 |
| 3.7 水杨酸和茉莉酸甲酯胁迫分析 | 第32-33页 |
| 3.7.1 水杨酸处理后枣WRKY转录因子的表达分析 | 第32-33页 |
| 3.7.2 茉莉酸处理后枣WRKY转录因子的表达分析 | 第33页 |
| 4 讨论与结论 | 第33-37页 |
| 4.1 讨论 | 第33-35页 |
| 4.1.1 枣WRKY转录家族的基因组分析 | 第33-34页 |
| 4.1.2 枣疯病发病过程中WRKY转录因子的差异表达 | 第34页 |
| 4.1.3 外源施加SA、MeJA后WRKY基因的表达量差异 | 第34-35页 |
| 4.2 结论 | 第35-37页 |
| 第三章 枣ZjWRKY8、52、61的烟草遗传转化和瞬时表达 | 第37-48页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-42页 |
| 2.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 2.1.2 试验所用培养基及其配方 | 第37-38页 |
| 2.2 试验方法 | 第38-42页 |
| 2.2.1 烟草播种 | 第38页 |
| 2.2.2 枣叶片RNA的提取 | 第38页 |
| 2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第38页 |
| 2.2.4 ZjWRKY8、ZjWRKY52和ZjWRKY61的基因克隆 | 第38页 |
| 2.2.5 PCR产物的检测及回收 | 第38页 |
| 2.2.6 回收DNA与克隆载体的连接转化 | 第38页 |
| 2.2.7 重组载体的阳性克隆验证 | 第38-39页 |
| 2.2.8 ZjWRKY8、ZjWRKY52和ZjWRKY61的基因测序及过表达载体构建 | 第39页 |
| 2.2.9 农杆菌介导的ZjWRKY8、ZjWRKY52和ZjWRKY61基因转化 | 第39-40页 |
| 2.2.9.1 GV3101感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| 2.2.9.2 重组质粒转化GV3101感受态农杆菌细胞 | 第40页 |
| 2.2.9.3 农杆菌介导转化烟草叶片 | 第40页 |
| 2.2.10 农杆菌介导烟草叶片瞬时表达 | 第40-41页 |
| 2.2.10.1 制备菌体清洗液 | 第40页 |
| 2.2.10.2 注射液准备 | 第40-41页 |
| 2.2.11 过氧化氢胁迫处理 | 第41页 |
| 2.2.11.1 DAB染色液配制 | 第41页 |
| 2.2.11.2 DAB染色 | 第41页 |
| 2.2.12 SOD、CAT的酶活测定 | 第41-42页 |
| 2.2.12.1 考马斯亮蓝法测样品蛋白浓度 | 第41页 |
| 2.2.12.2 过氧化氢酶(CAT)活力测定 | 第41-42页 |
| 2.2.12.3 超氧化物歧化酶(SOD)活力测定 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.1 基因克隆 | 第42页 |
| 3.2 表达载体及转化农杆菌鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3 烟草遗传转化 | 第43页 |
| 3.4 PCR检测 | 第43-44页 |
| 3.5 CAT,SOD酶活测定 | 第44-45页 |
| 3.6 DAB染色 | 第45页 |
| 4 讨论与结论 | 第45-48页 |
| 4.1 讨论 | 第45-47页 |
| 4.1.2 ZjWRKY8、ZjWRKY52和ZjWRKY61的烟草转化 | 第45-46页 |
| 4.1.2 过氧化氢胁迫处理与DAB组织化学染色 | 第46-47页 |
| 4.2 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 英文摘要 | 第58-59页 |
