中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
前言 | 第8-12页 |
1. 自噬的基本过程 | 第8-9页 |
2. 线粒体自噬 | 第9页 |
3. 参与自噬调节的信号通路 | 第9-11页 |
4. 酵母Whi2蛋白及其同源蛋白KCTD | 第11-12页 |
材料与方法 | 第12-26页 |
1. 实验材料 | 第12-16页 |
1.1 酵母菌株 | 第12页 |
1.2 质粒 | 第12-13页 |
1.3 培养基 | 第13-14页 |
1.4 主要试剂 | 第14-16页 |
1.5 主要仪器 | 第16页 |
2. 实验方法 | 第16-26页 |
2.1 分子克隆 | 第16-20页 |
2.2 酵母基因组DNA的提取 | 第20页 |
2.3 酵母的质粒转染 | 第20-21页 |
2.4 同源重组法敲除酵母基因 | 第21-22页 |
2.5 同源重组法标记酵母内源性蛋白 | 第22页 |
2.6 酵母TORC1活性检测 | 第22-23页 |
2.7 酵母蛋白的蛋白免疫印记 | 第23-24页 |
2.8 酵母生长实验 | 第24-26页 |
实验结果 | 第26-44页 |
1. Whi2对TORC1活性的抑制独立于Gtr复合物 | 第26-27页 |
2. Whi2对自噬的影响 | 第27-39页 |
2.1 ATG8基因的诱导表达需要Whi2的参与 | 第28-31页 |
2.2 Whi2对自噬流的影响 | 第31-36页 |
2.3 Whi2对自噬的影响 | 第36-39页 |
3. Whi2对线粒体自噬的影响 | 第39-40页 |
4. PKA对Whi2调控自噬过程的影响 | 第40-44页 |
讨论 | 第44-47页 |
1. Whi2蛋白在TORC1信号通路中的位置 | 第44页 |
2. Whi2对细胞自噬的影响 | 第44-45页 |
3. Whi2对线粒体自噬的影响 | 第45页 |
4. PKA对Whi2调控自噬过程的影响 | 第45-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
酿酒酵母自噬过程的方法概述 | 第51-64页 |
参考文献 | 第62-64页 |
英文缩略词表 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |